合歡花黃酮類(lèi)化學(xué)成分的研究

耿 紅 梅

(衡水學(xué)院 化工學(xué)院，河北 衡水 053000)

合歡花黃酮類(lèi)化學(xué)成分的研究

耿 紅 梅

(衡水學(xué)院 化工學(xué)院，河北 衡水 053000)

合歡花用 70%乙醇提取，然后經(jīng)葡聚糖凝膠、硅膠、聚酰胺柱色譜技術(shù)進(jìn)行分離純化，得到 7個(gè)黃酮類(lèi)化合物，通過(guò)理化常數(shù)測(cè)定和光譜分析鑒定為槲皮苷(I)、異槲皮苷(II)、蘆丁(III)、槲皮素(IV)、異鼠李素(V)、山柰酚(VI)、木犀草素(VII)．化合物V異鼠李素首次從合歡花植物中得到．

合歡花；黃酮；化學(xué)成分

合歡花是豆科植物 Albizzia julibrissin Durazz 的干燥花序，是一種分布廣泛的傳統(tǒng)中草藥，性平味苦，具有解郁理氣、安神活絡(luò)之功效．初步藥理實(shí)驗(yàn)表明合歡花水煎液和醇提取物均表現(xiàn)出顯著的抗抑郁作用[1]．李作平等[2-3]報(bào)道從合歡花中分離得到了二十四烷酸和槲皮苷等 8個(gè)化合物．我們用紫外分光光度法初步測(cè)得合歡花中總黃酮含量為 3.9%，并對(duì)合歡花中的黃酮類(lèi)化合物進(jìn)行了研究，通過(guò)理化性質(zhì)、譜學(xué)數(shù)據(jù)分析并結(jié)合文獻(xiàn)，鑒定了化合物槲皮苷(I)、異槲皮苷(II)、蘆丁(III)、槲皮素(IV)、異鼠李素(V)、山柰酚(VI)、木犀草素(VII)的結(jié)構(gòu)，其中化合物V異鼠李素為首次從該植物中分離得到的已知化合物．

1 儀器與材料

1.1 儀器

X－4型顯微熔點(diǎn)測(cè)定儀(溫度未校正)(天津市分析儀器廠)；EQUINO55型紅外光譜儀、GCT型質(zhì)譜儀、AM－500核磁共振儀(德國(guó)Burker公司)；Agilent 1100 液相色譜(德國(guó)Agilent公司)．

1.2 試藥

薄層色譜用硅膠 G、H 和 GF254及柱色譜用硅膠(青島海洋化工廠)，Sephadex LH－20(瑞士法瑪西亞公司)；柱色譜用聚酰胺、聚酰胺薄膜為浙江省臺(tái)州市路橋四甲生化塑料廠產(chǎn)品，實(shí)驗(yàn)所用試劑均為分析純．

實(shí)驗(yàn)所用試劑均為分析純．合歡花購(gòu)于衡水市紅旗大藥房，經(jīng)衡水市藥檢所主任藥師蔡詠梅鑒定為豆科植物合歡花Albizzia julibrissin Durazz．

2 方法與結(jié)果

2.1 提取分離

合歡花8 kg，以體積分?jǐn)?shù)70%乙醇加熱回流提取3次，每次2 h，合并提取液，減壓濃縮回收乙醇得浸膏，用水分散后依次用石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯和正丁醇進(jìn)行萃取，每種溶劑萃取數(shù)次(至溶液顏色變淺)，合并各萃取液，減壓濃縮至干，分別得石油醚萃取物120 g、二氯甲烷萃取物28 g、乙酸乙酯萃取物100 g、正丁醇萃取物 92 g．經(jīng)過(guò)預(yù)試，發(fā)現(xiàn)黃酮類(lèi)化合物主要分布在醋酸乙酯和正丁醇部位，因此對(duì)這兩部分進(jìn)行了詳細(xì)分離．取醋酸乙酯萃取物，經(jīng)硅膠色譜柱色譜分離，聚酰胺柱層析，二氯甲烷-甲醇系統(tǒng)梯度洗脫得到化合物IV～VII，分別為木犀草素(8 mg)、槲皮素(80 mg)、異鼠李素(6 mg)、山柰酚(40 mg)；取正丁醇萃取物，經(jīng)AB-8大孔吸附樹(shù)脂富集，聚酰胺柱、硅膠柱層析，二氯甲烷-甲醇系統(tǒng)梯度洗脫，Sephadex LH-20(甲醇)純化得到化合物I～I(xiàn)II，為槲皮苷(250 mg)、異槲皮苷(13 mg)、蘆丁(20 mg)．

2.2 結(jié)構(gòu)鑒定

1) 化合物 I 黃色粉末，m.p. 183～185 ℃，鹽酸-鎂粉反應(yīng)陽(yáng)性，Molish反應(yīng)陽(yáng)性．示為黃酮苷類(lèi)化合物．用苯-甲醇(2︰1)聚酰胺板展開(kāi)、氯仿-甲醇(5︰1)硅膠板展開(kāi)、醋酸乙酯-正丁醇-甲酸-水(5︰4︰1︰1)展開(kāi)，與槲皮苷對(duì)照品的 Rf值相同．用高效液相色譜法 HPLC檢測(cè)，與槲皮苷對(duì)照品的 tR值相同，且與槲皮苷對(duì)照品的混合熔點(diǎn)不下降，確認(rèn)化合物I為槲皮苷(quercitrin)．

2) 化合物II 黃色粉末(甲醇)，m.p. 234～236 ℃．鹽酸-鎂粉反應(yīng)陽(yáng)性，Molish反應(yīng)陽(yáng)性，示為黃酮苷類(lèi)化合物．經(jīng)過(guò)酸水解后與糖的對(duì)照品進(jìn)行薄層層析實(shí)驗(yàn)，證明為葡萄糖．核磁共振氫譜1HNMR(400 MHz DMSO-d6, TMS, δppm)中，存在 6.17(1H，s，H-6)，6.36(1H，s，H-8)，6.81(1H，d, J=8.90 Hz, H-5′)，7.55(1H，s，H-2′), 7.53(1H, s, H-6′)，5.42(1H, d, J=6.95, H-1′)．核磁共振碳譜13CNMR(100MHz，DMSO-d6)中，存在 155.7(C-2)，132.9(C-3)，176.9(C-4)，160.8(C-5)，98.2(C-6)，163.7(C-7)，92.9(C-8)，155.8(C-9)，103.5(C-10)，120.7(C-1′)114.8(C-2′)，144.4(C-3′)，147.9(C-4′)，115.7(C-5′)，121.2(C-6′)，100.4(C-1′)，73.6(C-2′)，75.9(C-3′)，69.5(C-4′v)，77.2(C-5′)，60.5(C-6′)．以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[4-7]中的異槲皮苷譜學(xué)數(shù)據(jù)對(duì)照基本一致，確認(rèn)其結(jié)構(gòu)為異槲皮苷(isoquercitrin)．

3) 化合物 III 黃綠色粉末，m.p. 173～174 ℃，鹽酸-鎂粉反應(yīng)陽(yáng)性，Molish反應(yīng)陽(yáng)性，示為黃酮苷類(lèi)化合物．用TLC(3種不同的展開(kāi)系統(tǒng))和HPLC檢測(cè)，與蘆丁對(duì)照品的Rf值和tR值相同，且與蘆丁對(duì)照品的混合熔點(diǎn)不下降，確認(rèn)化合物III為蘆丁(rutin)．

4) 化合物 IV 黃色粉末(甲醇)，m.p. 312～316 ℃，鹽酸-鎂粉反應(yīng)陽(yáng)性，Molish反應(yīng)陰性．用 TLC 和HPLC檢測(cè)，與槲皮素對(duì)照品的Rf值和tR值相同，且與槲皮素對(duì)照品的混合熔點(diǎn)不下降，確認(rèn)化合物IV為槲皮素(quercetin)．

5) 化合物V 黃色粉末(甲醇)，m.p. 303～305 ℃，鹽酸-鎂粉反應(yīng)陽(yáng)性，Molish反應(yīng)陰性，提示可能為黃酮類(lèi)苷元．用TLC和HPLC檢測(cè)，與異鼠李素對(duì)照品的Rf值和tR值值相同，且與異鼠李素對(duì)照品的混合熔點(diǎn)不下降，確認(rèn)化合物V為異鼠李素(isorhamnetin)．

6) 化合物 VI 黃色粉末(甲醇)，m.p. 276～278 ℃，鹽酸-鎂粉反應(yīng)陽(yáng)性，Molish反應(yīng)陰性，用三氯化鋁顯色后熒光增強(qiáng)，提示可能為黃酮類(lèi)苷元．用TLC和HPLC檢測(cè)，與山柰酚對(duì)照品的Rf值和tR值相同，確認(rèn)化合物VI為山柰酚(kaempferol)．

7) 化合物VII 黃色粉末(甲醇)，m.p. 346～350 ℃，鹽酸-鎂粉反應(yīng)陽(yáng)性，Molish反應(yīng)陰性．核磁共振氫譜1H-NMR(300 MHz, DMSO-d6)中，存在δ12.98(1H, s, 5-OH)、7.42 (1H, dd, J=8.1 Hz, H-6′)、7.40 (1H, d, J=2.0 Hz, H-2′)、6.89(d, J=8.1 Hz, H-5′)、6.68(1H, s, H-3)、6.44(1H, d, J=1.8 Hz, H-8)、6.18(1H, d, J=1.8 Hz, H-6)質(zhì)子信號(hào)．核磁共振碳譜13C-NMR(75 MHz,DMSO-d6), 存在δ182.1(C-4)、165.2(C-2)、164.3(C-7)、161.9(C-5)、157.9(C-9)、 150.6(C-3′)、 146.3(C-4′)、 121.8(C-1′)、 119.3(C-6′)、 116.5(C-2′)、 113.9(C-5′)、 104.0(C-10)、103.2(C-3)、99.6(C-6)、94.5(C-8)碳信號(hào)．上述數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[8]中的木犀草素譜學(xué)數(shù)據(jù)對(duì)照基本一致，故鑒定化合物VII為木犀草素(luteolin)．

[1] 李作平,趙丁,任雷鳴,等.合歡花抗抑郁作用的藥理實(shí)驗(yàn)研究初探[J].河北醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào),2003,24(4):214.

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Abstract:FLOS ALBIZIAE was extracted in 70% acetone solution. Seven components were isolated by Sephadex LH-20,polyamide and silica gel column chromatography. Based on physico-chemical constants and spectral analysis, they were identified as quercitrin (I), isoquercitrin (II), rutin (III), quercetin(IV), isorhamnetin(V), kaempferol (VI), luteolin (VII). Compounds V are isolated from this plant for the first time.

Key words:FLOS ALBIZIAE; Flavonoids; chemical constituents

(責(zé)任編校：李建明英文校對(duì)：李玉玲)

Study on Flavonoids of FLOS ALBIZIAE

GENG Hong-mei
(College of Chemical Engineering, Hengshui University, Hengshui, Hebei 053000, China)

R284.1

A

1673-2065(2011)01-0028-02

2010-09-15

耿紅梅(1968-),女,河北景縣人,衡水學(xué)院應(yīng)用化學(xué)系教授,醫(yī)學(xué)博士.