犬排卵檢測(cè)技術(shù)的研究

劉成武 李向黨

犬排卵檢測(cè)技術(shù)的研究

劉成武 李向黨

犬的發(fā)情周期與很多動(dòng)物不同，犬是單次發(fā)情動(dòng)物，發(fā)情周期為6個(gè)月左右，即在一個(gè)發(fā)情周期內(nèi)交配沒(méi)有受孕，犬都將再經(jīng)過(guò)6個(gè)月到達(dá)下一個(gè)發(fā)情周期才允許交配。因此，準(zhǔn)確掌握犬排卵的時(shí)間尤為重要，只有正確地掌握母犬的排卵時(shí)間，才能做到適時(shí)配種，提高母犬的受孕率和繁殖力。

一、犬的卵泡發(fā)育、排卵機(jī)制

犬的卵巢是由卵巢囊包裹，排出的卵直接進(jìn)入卵巢囊內(nèi)，輸卵管與卵巢囊相接，靠輸卵管的運(yùn)動(dòng)而將卵子送到輸卵管漏斗部。卵泡充血時(shí)是排卵開(kāi)始，成熟卵泡的直徑為6～7mm。犬的卵巢囊由長(zhǎng)約8mm的腹腔口開(kāi)口于腹腔，發(fā)情時(shí)輸卵管傘充血、增厚，與卵巢囊相接處的部分長(zhǎng)出腹腔口，安全遮住了卵巢囊腹腔口，使得排出的卵不致于落入腹腔中。犬的排卵發(fā)生于發(fā)情期初期，排卵時(shí)卵是初級(jí)卵母細(xì)胞，剛排出時(shí)尚未成熟，在輸卵管內(nèi)繼續(xù)發(fā)育并進(jìn)行第一次成熟分裂，放出第一極體而變?yōu)榇渭?jí)卵母細(xì)胞，此時(shí)才具有受精能力，這是犬不同于其他動(dòng)物的特性。卵從卵巢排出，又經(jīng)過(guò)第二次成熟分裂，分裂后，在輸卵管與精子結(jié)合形成合子。犬的卵在排卵后保持4天的受精能力。要得到較高的受胎率，必須使卵子和精子在活力最強(qiáng)時(shí)相遇。

二、排卵檢測(cè)方法

（一）陰道外觀(guān)檢測(cè)：犬處在發(fā)情期，生殖道會(huì)表現(xiàn)出規(guī)律性的變化。表現(xiàn)為陰唇腫脹，臨近排卵時(shí)腫脹程度最高，而后逐漸消退；陰道的肌肉組織由緊張狀態(tài)逐漸變成松弛狀態(tài)，使陰道松軟，陰腔逐漸變大，在排卵期變得最大，而后逐漸恢復(fù)正常；陰道壁和子宮內(nèi)膜組織增生，陰道流出血樣物質(zhì)，開(kāi)始時(shí)呈暗紅或鮮紅色，而后逐漸變淡，至排卵期時(shí)呈淡淡的粉紅色或無(wú)色，之后逐漸消失。

（二）促黃體生成素(LH)測(cè)定法：LH是由α和β兩個(gè)亞基組成的糖蛋白，含有219個(gè)氨基酸。LH的主要生理作用是：協(xié)同F(xiàn)SH發(fā)揮作用，促進(jìn)卵泡成熟，粒膜增生，使卵泡內(nèi)膜產(chǎn)生雌激素，并在與FSH達(dá)到一定比例時(shí)，導(dǎo)致排卵，對(duì)排卵起著主要作用。排卵前1天，LH的分泌出現(xiàn)高峰，通常根據(jù)LH的高峰值可以準(zhǔn)確地判斷出排卵時(shí)間。

（三）促卵泡素（FSH)測(cè)定法：FSH為一種由α和β兩個(gè)亞基組成的糖蛋白，糖基是以N-糖苷鍵的方式分別連接在α和β兩個(gè)亞基上。FSH的主要生理作用是：刺激卵泡的生長(zhǎng)發(fā)育，卵泡生長(zhǎng)至有腔卵泡時(shí)，F(xiàn)SH能夠刺激它繼續(xù)發(fā)育增大至接近成熟。FSH高峰出現(xiàn)的時(shí)間與LH出現(xiàn)的高峰時(shí)間相當(dāng)，但LH的高峰明顯高于FSH的高峰。

（四）雌激素(E2)測(cè)定法：母犬的產(chǎn)生部位主要是卵泡膜內(nèi)層及胎盤(pán)，卵巢的間質(zhì)細(xì)胞也能產(chǎn)生。E2主要生理作用是：刺激并維持母犬生殖道的發(fā)育。發(fā)情時(shí)E2的分泌將逐漸增多，排卵前到達(dá)高峰。

（五）孕酮測(cè)定法：在不發(fā)情期或發(fā)情前期，孕酮水平是非常低的。在促黃體激素增長(zhǎng)之前，孕酮含量就已經(jīng)開(kāi)始上升了，而在LH峰值的時(shí)候，孕酮含量已經(jīng)達(dá)到1.5～2.5 ng/ml，并且繼續(xù)上升。孕酮升到3 ng/ml，該母犬處于排卵的第一天。排卵后黃體形成，分泌多量孕酮（黃體酮），比排卵前的孕酮明顯增加。

（六）B超診斷法檢測(cè)：B超檢測(cè)排卵是比較安全的，具有經(jīng)濟(jì)、無(wú)創(chuàng)、直觀(guān)性好、重復(fù)性強(qiáng)的優(yōu)點(diǎn)，為臨床提供了監(jiān)測(cè)排卵的可靠方法。由于B超檢測(cè)需要母犬積尿充盈膀胱，但是臨床上犬不會(huì)大量積尿或者B超刺激后會(huì)馬上排尿，為檢測(cè)帶來(lái)困難。陰道超聲可以解決此問(wèn)題，與腹部超聲檢查相比，母犬無(wú)需充盈膀胱就能直接觀(guān)察到卵泡生長(zhǎng)、成熟及排卵的特征，成為監(jiān)測(cè)卵泡發(fā)育的重要手段。在發(fā)情的第8天開(kāi)始每天給母犬進(jìn)行B超監(jiān)測(cè)1次，直至卵泡破裂排卵為止。成熟的卵泡呈圓形或橢圓形，直徑達(dá)6～9 mm，卵泡內(nèi)呈無(wú)回聲暗區(qū)，亮度好，境界清晰，80%的成熟卵泡可以見(jiàn)到卵丘結(jié)構(gòu)，卵泡周?chē)霈F(xiàn)透聲環(huán)。排卵后卵泡消失或體積縮小，內(nèi)部呈現(xiàn)光點(diǎn)，1～2天完全消失。

（七）陰道上皮細(xì)胞檢測(cè)：陰道上皮的細(xì)胞學(xué)變化，是在母犬體內(nèi)激素作用下產(chǎn)生的。采取陰道粘膜采片法，按其細(xì)胞涂片的形態(tài)學(xué)觀(guān)察能更客觀(guān)更準(zhǔn)確地反映卵巢的活動(dòng)，為選定母犬最佳適時(shí)交配期提供可靠依據(jù)。乏情期陰道上皮細(xì)胞數(shù)量少，細(xì)胞直徑小，細(xì)胞核清楚；發(fā)情前期細(xì)胞學(xué)變化主要為出現(xiàn)大量的帶核的表皮細(xì)胞，這一時(shí)期細(xì)胞直徑變大，呈多角形，核呈空泡狀；進(jìn)入發(fā)情期，帶核表皮細(xì)胞形態(tài)上發(fā)生角化，變成無(wú)核的角化鱗狀細(xì)胞；發(fā)情后期細(xì)胞形態(tài)逐漸恢復(fù)，無(wú)核、角化細(xì)胞消失，細(xì)胞形態(tài)規(guī)則、核明顯。

（八） 唾液檢測(cè)：近年來(lái)發(fā)現(xiàn)，在雌激素的影響下，唾液中的蛋白質(zhì)、氯化鈉及水分的含量發(fā)生變化，唾液結(jié)晶隨發(fā)情周期的變化而發(fā)生明顯的規(guī)律性變化。發(fā)情期開(kāi)始后，顯微鏡下唾液結(jié)晶的形狀為典型羊齒狀或松針狀，主梗直而粗硬，分枝密而長(zhǎng)，且排卵后2天結(jié)晶消失，表明唾液羊齒結(jié)晶出現(xiàn)及消失的時(shí)間比較集中，可預(yù)測(cè)排卵期。

繁殖是養(yǎng)犬業(yè)發(fā)展的基礎(chǔ)，而較高的受孕率是繁殖的重要保障。只有正確地掌握母犬的排卵時(shí)期，才能做到適時(shí)配種，提高受孕率。在臨床上應(yīng)該陰道外觀(guān)檢查、陰道細(xì)胞學(xué)檢查、B 超檢查和激素檢測(cè)方法結(jié)合起來(lái)，才能更準(zhǔn)確地確定母犬的排卵時(shí)間。

（作者單位：公安部警犬技術(shù)學(xué)校，330100）

（編輯：李 冰）