腎茶提取物藥理作用的最新研究進(jìn)展*

侯志勇 王立強(qiáng) 梁振生

（1.解放軍211醫(yī)院，黑龍江哈爾濱150080；2.福建省泉州市華僑大學(xué)分子藥物學(xué)研究所，福建泉州362021）

腎茶為腎茶屬（Clerodendranthus）唇形科多年生草本植物 ，其雄蕊狀如貓的胡須，故又稱貓須草，全草入藥。作為傳統(tǒng)或民間藥物已延續(xù)流傳使用了幾個(gè)世紀(jì)，用作治療膀胱炎、腎炎、泌尿系統(tǒng)結(jié)石、動(dòng)脈硬化、痛風(fēng)、黃疸、感冒等疾病。傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)認(rèn)為其性味甘淡微苦、涼，具有清熱去濕、排石利水的功效。福建醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院在2008年收治三鹿奶粉致嬰幼兒泌尿系統(tǒng)結(jié)石、腎臟損傷的患者時(shí)，就應(yīng)用了該藥并收到較好效果。目前已從腎茶中分離鑒定了近 200種化合物，包括黃酮及黃酮苷類、二萜類、酚類及多酚酸類、三萜類、精油及其他類成分，其中多酚類是腎茶葉子中最主要的成分，發(fā)揮腎茶的大部分藥效作用。本文就腎茶提取物近年來的藥理學(xué)研究進(jìn)展綜述如下。

1 治療泌尿系統(tǒng)疾病

腎小球系膜細(xì)胞增殖是多數(shù)進(jìn)展性腎小球疾病的核心病理表現(xiàn)，抑制系膜細(xì)胞的增殖，就可以控制腎小球疾病的進(jìn)展，減少終末期腎臟病和移植腎衰竭的發(fā)生。腎小球系膜細(xì)胞增殖往往由炎癥刺激引起，又會(huì)通過旁分泌和自分泌釋放更多的炎癥細(xì)胞因子，使炎癥效應(yīng)不斷放大，形成放大效應(yīng)。李月婷[1]用腎茶水煎劑處理原代培養(yǎng)的大鼠腎小球系膜細(xì)胞，腎茶在（50～250）μg/mL濃度范圍內(nèi)能夠抑制血清或脂多糖刺激的腎小球系膜細(xì)胞增殖及脂多糖誘導(dǎo)的系膜細(xì)胞產(chǎn)生致炎因子IL-1β，抑制了系膜細(xì)胞增殖的放大效應(yīng)。

研究表明，TGF-β在腎臟疾病發(fā)展中也起著重要的作用，能夠引起腎小球系膜細(xì)胞外基質(zhì)的積聚，2003年，Yoshimural[2]發(fā)現(xiàn)腎茶的水提和甲醇粗提取物能劑量依賴地抑制Bal/c 3T3細(xì)胞25I1-TGF-β與其受體的結(jié)合，隨后分離鑒定出有效成分熊果酸和齊墩果酸，抑制25I1-TGF-β與其受體結(jié)合的IC50分別為（6.9±0.8）μM和（21.0±2.3）μM。利尿是治療腎結(jié)石的重要方法。Arafat[3]研究了腎茶提取物的利尿和降低尿酸活性，發(fā)現(xiàn)大鼠口服甲醇/水（體積比1∶1）腎茶提取物（SEOS）能夠增大尿量和加大Na+和K+的排出，與氫氯噻嗪的作用相當(dāng)，并且與別嘌呤一樣能夠降低高尿酸小鼠的血液尿酸濃度。

以前研究表明，腺苷A1受體分布于腎臟的傳入小動(dòng)脈、腎小球、近端小管和集合管，腺苷A1受體拮抗劑能通過誘導(dǎo)利尿和鈉的排泄來保護(hù)腎臟，2009年，Yuliana[4]從腎茶的提取物種分離出七種甲氧黃酮作為腺苷A1受體配體的Ki值在微摩爾范圍，進(jìn)一步闡明了腎茶作為腺苷A1受體拮抗劑利尿活性的分子作用機(jī)制。1972年，F(xiàn)ujimoto也曾發(fā)現(xiàn)MEOA中的肌醇起到了利尿的作用。

2 抗炎鎮(zhèn)痛作用

Yam[5]發(fā)現(xiàn)，口服SEOS 500mg/kg或1000mg/kg能顯著降低角叉菜膠致鼠足腫脹，在乙酸誘導(dǎo)的扭體實(shí)驗(yàn)和甲醛誘導(dǎo)的靜脈指彈實(shí)驗(yàn)中顯示出顯著的止痛效果，但對(duì)甩尾測試和熱板測試沒有影響，這表明腎茶具有抗炎鎮(zhèn)痛活性，而并沒有鎮(zhèn)靜活性，推測腎茶可能是環(huán)氧合酶或/和脂氧合酶的抑制劑。

NO在致炎因子刺激下由某些細(xì)胞產(chǎn)生，通過破壞致病的DNA來保護(hù)正常組織，但過多的產(chǎn)生則導(dǎo)致組織損傷甚至膿毒性休克。因此，有效地抑制炎癥刺激產(chǎn)生的NO積聚，是一種有益的治療炎癥反應(yīng)的策略。2003年Awale[6，7]發(fā)現(xiàn)腎茶的甲醇提取物有顯著的抑制NO產(chǎn)生的活性，進(jìn)而分離甲醇提取物，從溶于CHCl3的部分分離出47個(gè)高氧合的isopimarane型骨架二萜和staminane型骨架二萜，所有這些二萜都分別具有抑制LPS活化的巨噬細(xì)胞樣J774.1細(xì)胞產(chǎn)生NO的活性。

2010年，Chin[8]通過總多酚，Trolox等價(jià)抗氧化能力（TEAC，trolox equivalent antioxidant capacity），氧自由基清除能力（oxygen radical absorbance capacity）和細(xì)胞抗氧化能力（cellular antioxidant activity）測定分別評(píng)價(jià)了MEOA，腎茶乙醇提取物（EEOA）和腎茶水提取物的抗氧化活性，證實(shí)MEOA和EEOA的抗氧化活性較高，并且表明EEOA能最顯著地抑制脂多糖刺激RAW 264.7鼠巨噬細(xì)胞產(chǎn)生NO，PEG2和ROS（活性氧簇），通過高效液相分析二者都有迷迭香酸和齊墩果酸，并且EEOA和迷迭香酸均能抑制脂多糖激發(fā)的RAW 264.7細(xì)胞中iNOS和COX-2 mRNA和蛋白的表達(dá)，這些結(jié)果表明，EEOA及其有效成分迷迭香酸通過降低ROS的產(chǎn)生及iNOS和COX-2基因的表達(dá)來抑制生成NO和PEG2。

由此可見，腎茶的二帖類、多酚類和黃酮類均具有抗炎活性，它們通過清除氧自由基、抑制iNOS和COX-2的表達(dá)從而減少NO和PEG2的產(chǎn)生等多條炎癥相關(guān)途徑阻止炎癥的發(fā)生。

3 抗癌及化療增敏作用

2000年，Tezuka[10]測定了腎茶地上部分的甲醇提取物對(duì)鼠肝轉(zhuǎn)移結(jié)腸癌細(xì)胞26-L5的細(xì)胞毒性（ED50，73.6μg/mL），進(jìn)一步分 離 出 溶 于 己 烷 部 分 （ED50，＞100μg/mL）， 氯 仿 部 分（ED50，76.2μg/mL），乙酸乙酯部分（ED50，82.4μg/mL），正丁醇（ED50，＞100μg/mL）和水溶部分（ED50，＞100 mg/mL），通過柱層層析和薄層層析分離活性較強(qiáng)的氯仿和乙酸乙酯部分，得到10種新型二帖和16種已知化合物，分別又檢查了他們的26-L5細(xì)胞毒性，ED50值在（10～90）μg/mL范圍內(nèi)；接著又從氯仿部分分離到5種高度氧化二帖，norstaminone A和nororthosiphonolide A等[11]也都顯示出微弱的肝轉(zhuǎn)移結(jié)腸癌26-L5細(xì)胞毒性和HT-1080纖維肉瘤細(xì)胞毒性。

腫瘤化療時(shí)，腫瘤細(xì)胞膜上P糖蛋白能依賴ATP將各種結(jié)構(gòu)的化療藥包括阿霉素，長春新堿和放線菌素D等泵出細(xì)胞外，因此降低了胞內(nèi)的藥物積聚。2002年，Choi[12]發(fā)現(xiàn)腎茶中的成分橙黃酮能夠劑量依賴地逆轉(zhuǎn)P糖蛋白過表達(dá)細(xì)胞AML-2/D100對(duì)長春新堿的耐受，通過流式細(xì)胞儀檢測到橙黃酮?jiǎng)┝恳蕾嚨卦黾恿嘶熕幵诩?xì)胞內(nèi)的積聚，其化療增敏作用比分別比5、7、30、40-四甲氧基黃酮和3，7-二羥基-30，40-二甲氧基黃酮強(qiáng)了10和18倍，而且不同于其他二代化療增敏劑作為P糖蛋白的競爭性底物，藥理劑量會(huì)產(chǎn)生很大的副作用，橙黃酮能夠降低P糖蛋白的表達(dá)，在抑制濃度時(shí)不產(chǎn)生副作用。

4 抑制血管生成作用

目前抗血管生成已經(jīng)成為治療腫瘤等疾病的重要策略，而天然藥物用于抗血管生成更是被視為一種理想的治療策略。腎茶中含有較多的抗氧化和多酚類化合物，以往報(bào)道這類化合物具有抗血管生成作用，2009年，Sahib[13]等考查了腎茶的石油醚、氯仿、甲醇和水提取物的抑制血管生成活性，大動(dòng)脈環(huán)實(shí)驗(yàn)測定（Aorta Ring Assay）得出甲醇提取部分具有最高的抑制血管生成活性（93.28±1.24）%，接著是氯仿部分，石油醚部分和水提部分，還發(fā)現(xiàn)甲醇部分具有清除DPPH自由基活性，IC50為0.286mg/mL。

5 肝臟保護(hù)作用

CCl4誘導(dǎo)的肝損傷模型通常用作肝臟保護(hù)藥物的篩選，它在體內(nèi)會(huì)被代謝成高活性的過氧化CCl4自由基，造成肝臟的過氧化損傷，ALT和AST也隨之從肝臟進(jìn)入血清。2007年，Mum[14]在實(shí)驗(yàn)中首先測定了SEOS清除DPPH自由基，抑制Fe＋誘導(dǎo)的脂質(zhì)過氧化活性和TEAC，結(jié)果顯示SEOS具有抗氧化，脂質(zhì)過氧化抑制和自由基清除活性；接著通過CCl4誘導(dǎo)肝毒性，發(fā)現(xiàn)預(yù)先給予SEOS，可以劑量依賴地降低鼠肝壞死和抑制血清中的ALT和AST。表明SEOS可能是通過抗氧化和自由基清除活性來保護(hù)肝臟。

6 解熱作用

發(fā)熱反應(yīng)機(jī)制是腦中PGE2濃度增高，連鎖引起下丘腦控制體溫調(diào)節(jié)的神經(jīng)元沖動(dòng)改變導(dǎo)致；大多數(shù)的解熱藥通過抑制環(huán)氧合酶的活性來降低下丘腦的PEG2水平，但近來認(rèn)為解熱藥的活性還與減少致炎介質(zhì)、增強(qiáng)抗炎信號(hào)或提高大腦解熱信號(hào)相關(guān)。2009年，M.F.Yam[15]發(fā)現(xiàn)，SEOS對(duì)正常鼠體溫沒有影響，但在500mg/kg和1000mg/kg劑量給藥后能夠顯著降低靜脈注射酵母混懸液誘導(dǎo)的體溫升高（由前列腺素生成引起），這種解熱效果能夠持續(xù)4h時(shí)，與撲熱息痛（口服，150mg/kg）的藥效相當(dāng)；HPLC檢測得到提取物中迷迭香酸，橙黃酮，佩蘭素和四甲氧基黃酮分別占到7.58%，0.20%，0.34%和0.24%，其中迷迭香酸已被部分證實(shí)具有解熱作用，作者推測SEOS解熱主要是通過迷迭香酸抑制前列腺素的生成起作用。

7 抗黃疸作用

2009年，F(xiàn)aizul[16]將MEOA用于治療黃疸小鼠，發(fā)現(xiàn)給藥3d后膽紅素顯著降低到正常水平，特別是高劑量組（500和1250 mg/kg），降低膽紅素水平分別從（2.44±0.12）到（0.52±0.12）mg/dL和從（2.67±0.29）到（0.32±0.21）mg/dL。作者認(rèn)為，有可能是MEOA增加了葡萄糖醛酸轉(zhuǎn)移酶活性從而促進(jìn)膽紅素在肝臟的結(jié)合反應(yīng)，或者提高了膽紅素和白蛋白的結(jié)合能力，或者其他機(jī)制。

8 小結(jié)與展望

目前腎茶的研究涉及到泌尿系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)和消化系統(tǒng)等多個(gè)生理系統(tǒng)和多種疾病的治療，藥理作用研究已經(jīng)比較全面，確證了腎茶作為傳統(tǒng)藥物在臨床上的不同應(yīng)用，而且毒性很小，使用安全，這為腎茶的開發(fā)利用奠定了良好的基礎(chǔ)。

但是腎茶的研究還需更加深入，起藥效的相應(yīng)有效成分（部位）及比例的確認(rèn)仍然模糊，后續(xù)的研究應(yīng)借助現(xiàn)代分離檢測手段，對(duì)起藥效的粗提物進(jìn)行更進(jìn)一步地分離檢測，對(duì)不同成分進(jìn)行大量的藥理藥效實(shí)驗(yàn)，特別是體外實(shí)驗(yàn)（細(xì)胞、分子、受體、離子通道、基因等水平）的研究，判定出不同有效成分（部位）在腎茶治療不同疾病時(shí)都起到什么作用，起多大作用，作用機(jī)制是什么；同時(shí)要關(guān)注腎茶不同成分（部位）在疾病治療中的協(xié)同作用以及他們之間的比例，為準(zhǔn)確地篩選出相應(yīng)的有效部位和制定質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供保證。

此外，腎茶的開發(fā)依舊停留在袋泡茶和簡單的復(fù)方制劑水平，有效成分（部位）新藥仍然是空白，隨著腎茶有效成分（部位）分離純化工藝的優(yōu)化和相應(yīng)藥理學(xué)研究的深入，腎茶必將被開發(fā)成治療腎臟及其他多種疾病的新藥，以更高的療效、更可控的質(zhì)量服務(wù)人類健康。

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