無花果葉研究進展

張慧婧，胡志利

(1.山東大學(xué)藥學(xué)院，山東 濟南250012;2.山東藥品食品職業(yè)學(xué)院，山東威海264210)

無花果(Ficus carica Linn)，?？崎艑贌o花果亞屬無花果種，主要生長于熱帶和溫帶，屬亞熱帶落葉小喬木，樹干高、樹冠大，葉面寬，夏秋兩季結(jié)果.無花果是人類最早人工栽培的古老果樹樹種.目前除東北三省、西藏自治區(qū)和青海省外，我國其他省市自治區(qū)均有無花果分布，總面積約4.5萬畝，屬于目前國內(nèi)栽培面積最小的果樹種類之一，主要栽培區(qū)域為新疆、山東、江蘇、廣西等地.

無花果葉是?？崎艑贌o花果亞屬無花果種植物的葉子.干燥葉多皺縮，有時破碎，完整葉片濕潤后展平呈掌狀，厚膜質(zhì)，寬卵形或卵圓形，3～5裂掌狀，裂片卵形，邊緣有不規(guī)則鈍齒，葉片上表面暗綠色，有絨毛，粗糙;下表面淡綠色，密生黃褐色短柔毛;基部淺心形，基生脈3～5條，側(cè)脈5～7對，主脈顯著下突，葉柄圓且細長，長5～15 cm，鮮葉葉柄折斷后有白色的分泌物流出［1］.每年夏秋季可多次采摘，曬干或陰干備用，也可鮮用.

無花果葉的藥性和作用很早就被發(fā)現(xiàn).在明《本草綱目》中記載“甘微辛，平，有小毒”，清《本經(jīng)逢原》又稱其“微辛，無毒”;元代的朱丹溪《丹溪心法》中記載無花果葉“治五痔腫痛，煎湯頻熏洗之”，傳統(tǒng)主要用于清濕熱，解濕毒，消腫止痛，可用于濕熱泄瀉、帶下、痔瘡、癰腫以及瘰疬，民間驗方中屢有無花果葉搗碎外敷治療疣瘊的記載.

1 無花果葉主要化學(xué)成分

1.1 香柑內(nèi)酯和補骨脂素 孟正木等［2］取干燥無花果葉粉碎，水提三次后用乙酸乙酯萃取水提液，萃取物經(jīng)硅膠柱層析，以石油醚－無水乙醇為流動相梯度洗脫，得到兩個組分，將兩組分回收溶劑后重結(jié)晶，分離，經(jīng)過熔點測定、紫外光譜、紅外光譜、氣質(zhì)聯(lián)用以及核磁共振等分析確定為香柑內(nèi)酯(香檸檬內(nèi)酯)及補骨脂素.

1.2 黃酮 楊潤亞等［3］采用超聲波輔助提取無花果葉中總黃酮的方法，使用體積分數(shù)40%乙醇的溶液為提取液，按照料液比1∶60(g·mL－1)、超聲功率400 W、超聲溫度60℃的工藝條件，提取50 min，所得產(chǎn)物在510 nm處測吸收度，經(jīng)蘆丁標準曲線測定得率，其提取量為25.04 mg·g－1.

1.3 單寧 張縱圓等［4］使用無花果葉粉末為原料，在酸性條件下以80%的乙醇浸提三次，每次2 h，提取液合并過濾得澄清濾液，利用單寧與鎢酸鈉－磷鉬酸在弱堿性條件下形成穩(wěn)定的藍色配合物的性質(zhì)，在755 nm處測定顯色液的吸光度確定單寧的含量在2.04 ～12.24 mg·mL－1范圍內(nèi).

1.4 維生素C 蘇衛(wèi)國等［5］使用無花果鮮葉加入1%草酸經(jīng)勻漿機搗碎，過濾得濾液，濾液經(jīng)2，6－二氯靛酚滴定法測定維生素 C 的含量為0.971 mg·g－1.

1.5 其他成分 除上述成分外，酶［5］、生物堿類、苷類等［6］也是無花果葉重要成分，其代表物質(zhì)為蛋白酶、超氧化物歧化酶、花椒毒素、紫花前胡苷元、β－谷甾醇、β－香樹脂醇和無花果苷元等.此外無花果葉中鐵、鋅等微量元素［7］含量較高.

2 無花果葉的藥理作用

2.1 抗病毒 無花果葉干燥粉碎后經(jīng)過醇提和水提兩種方式得到活性物質(zhì)，作用于在地鼠腎(BHK21)細胞、人上皮樣癌(Hep－2)細胞以及雞胚成纖細胞(CEF)上的新城疫病毒.結(jié)果表明，無花果葉提取物在三種細胞上的抗病毒作用沒有明顯差別，都具有明顯的抗新城疫病毒的作用，另外無花果葉提取物不但可以直接殺滅病毒，對吸附于細胞表面和傳入細胞內(nèi)部的病毒也有抑制作用，實驗也證實無花果葉水提取物對細胞的毒性要大于無花果葉乙醇提取物［7］.另也有實驗表明，單純皰疹病毒－1(HSV－1)也能夠被無花果葉提取物直接殺死［8］.這兩個實驗表明，無花果葉具有一定的抗病毒活性.

2.2 抗菌 將含有100 mg·L－1的無花果葉醇提物的無菌濾紙片放置在接種有金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌、腸球菌、大腸桿菌、蠟樣芽孢桿菌、陰溝桿菌、變形桿菌、枯草桿菌黑色變種8種細菌的營養(yǎng)瓊脂平板上，其抑菌圈直徑皆大于7 mm;經(jīng)過梯度濃度的無花果葉醇提物的細菌營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)實驗測定其最低抑菌濃度，結(jié)果表明，最敏感的菌為金黃色葡萄球菌和溶血性鏈球菌，最不敏感的為腸球菌和變形桿菌［9］，這兩個試驗說明無花果葉醇提物具有良好、廣譜的抑菌活性.

2.3 降血糖及降血脂 糖尿病模型大鼠(成年Wistar雄性大鼠180 mg·kg－1鏈佐星腹腔注射)腹腔注射無花果葉水提取物，觀察藥物急性作用，口服無花果葉水提取物3周，以觀察其慢性作用.結(jié)果如下:①口服組給藥3周后，血糖濃度由(28 ±3.7)mmol·L－1降至(19.9 ± 10.1)mmol·L－1，甘油三酯濃度由(3.9 ±2.3)mmol·L－1降至(0.9 ±0.9)mmol·L－1，但是膽固醇含量變化不明顯;②腹腔注射組給藥90 min后，血中葡萄糖、甘油三酯無明顯變化，給藥48 h后，血糖濃度由(28 ±4.5)mmol·L－1降至(21.3 ±8.6)mmol·L－1，甘油三酯由(6.7 ±4.3)mmol·L－1降至(1.2 ±1.4)mmol·L－1;③對照組小鼠血糖、甘油三酯和總膽固醇含量無明顯變化［10］;以上數(shù)據(jù)表明，無花果葉水提物對于鏈佐星糖尿病模型大鼠的高血糖和高血脂有明顯的降低作用.

2.4 抗腫瘤 新鮮無花果葉以水為溶劑經(jīng)過超聲波輔助提取膜濾得濾液，用不同濃度無花果葉提取物處理體外培養(yǎng)的肝癌HepG2細胞，無花果葉水提物對HepG2細胞體外增殖的影響采用細胞形態(tài)學(xué)觀察、MTT法測定細胞活力來評價，細胞凋亡情況使用凋亡相關(guān)蛋白Caspase3和p53免疫組織化學(xué)法及流式細胞術(shù)的膜聯(lián)蛋白V/碘化丙啶法(Annexin V/PI法)評價.結(jié)果如下:①經(jīng)形態(tài)學(xué)觀察發(fā)現(xiàn)無花果葉水提物處理24 h后細胞出現(xiàn)明顯凋亡，細胞增殖活力顯著降低;②流式細胞儀檢測到無花果水提物處理12 h所有劑量組細胞平均凋亡率均高于對照組;③免疫組化結(jié)果顯示caspase3表達增強，p53蛋白表達減弱，以上作用效果呈現(xiàn)劑量依賴性［11］;這些數(shù)據(jù)說明無花果葉提取物具有顯著的抗腫瘤活性，其抑制肝癌HepG2細胞體外生長與增殖作用，是通過激活caspase3和p53從而誘導(dǎo)肝癌HepG2細胞凋亡而發(fā)生的.

2.5 降血壓 將無花果葉的石油醚提取物回收溶劑并重結(jié)晶，可以得到使兔、狗、貓的血壓顯著降低的粗結(jié)晶，將該結(jié)晶通過氧化鋁柱進行柱層析并進一步純化，可以得到補骨脂素和香柑內(nèi)酯兩個組分，將兩組份按照6 mg·kg－1的使用量對麻醉家兔進行靜脈注射可致家兔血壓降低并有呼吸抑制作用［12］.

2.6 光敏作用 使用無花果葉水提物滅菌水溶液進行肌肉注射治療白癜風(fēng)，有效率58.82%，有效成分為補骨脂素，該物質(zhì)有顯著的光敏作用［13］.

2.7 抗氧化 使用乙醇為溶劑浸提無花果葉，提取物采用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇進行萃取，測定無花果葉不同溶劑提取物對二苯代苦味胼基自由基(DPPH·)，F(xiàn)enton反應(yīng)產(chǎn)生的羥自由基(·OH)和鄰苯三酚自氧化法產(chǎn)生超氧陰離子自由基()清除能力.結(jié)果如下:①無花果葉石油醚提取物、乙酸乙酯提取物和正丁醇提取物對二苯代苦味胼基自由基(DPPH·)的半數(shù)清除濃度分別為121.3、125.0和 550.9 μg·mL－1;②對羥自由基(·OH)的半數(shù)清除濃度分別為470.0、350.0 和 610.0 μg·mL－1;③對超氧陰離子自由基()的半數(shù)清除濃度分別為 140.0、210.0 和 150.0 μg·mL－1［14］，這說明無花果葉不同有機溶劑提取物均有顯著的抗氧化活性.

2.8 抗骨質(zhì)疏松 干無花果葉片按照料液比1∶3倍加入95%乙醇，在溫度(70±5)℃下回流提取3次，每次3 h，合并回收乙醇，濃縮得浸膏;隨機取得SD大鼠，按照5 mg·kg－1潑尼松劑量灌胃建立骨質(zhì)疏松模型，分別按照高、中、低劑量給予無花果葉醇提物，七周后觀察大鼠骨物理指標、骨生化指標、骨中羥脯氨酸的含量、骨組織構(gòu)成以及血清生化指標.結(jié)果如下:骨的重量提高和骨質(zhì)的含量增加，骨髓腔中脂肪的含量減少，血中堿性磷酸酶和高密度脂蛋白含量升高，這說明無花果葉醇提物有良好的對抗骨質(zhì)疏松的作用［15］.

2.9 急性毒性 無花果葉水提液對昆明種小白鼠進行急性毒性實驗，分別采用經(jīng)口灌胃法(ig)和腹腔注射給藥法(ip)兩種給藥途徑.結(jié)果如下:①無花果葉提取液進行最大耐受量試驗采取經(jīng)口灌胃法(ig)給藥途徑，當劑量為7.872 g·kg－1·d－1時，未見動物死亡，結(jié)果表明在此劑量下口服時基本無毒性;②采用腹腔注射給藥法(ip)，高劑量組注射后出現(xiàn)萎靡少動、抽搐、發(fā)紺等中毒反應(yīng)，陸續(xù)死亡，低劑量組1～2 d后出現(xiàn)死亡，半數(shù)致死量為1.043 9 g·kg－1，具有一定毒性［16］.

3 無花果葉的臨床應(yīng)用

3.1 治腸炎 民間驗方中將無花果葉和紅糖共同炒制并粉碎成末，用溫開水口服治療腸炎，療效顯著.現(xiàn)代醫(yī)學(xué)認為腸道細菌感染引起腸炎，而無花果葉具有抗菌作用，經(jīng)紅糖炮制后其毒性減弱，紅糖又能夠補益、和中，兩藥配伍對于腸炎特別是細菌感染腸炎導(dǎo)致的疼痛和腹瀉都有一定作用［17］.另有無花果葉熏洗療法治療小兒吐瀉效果明顯［18］.

3.2 外洗治療痔瘡 無花果鮮葉7～10片洗凈，用l～1.5 kg水中煎煮15 min過濾，將藥液置肛門下熏患部，待藥液溫度降至適宜后再用藥棉洗敷患處，每次熏洗30～40 min，每日1次，對于痔瘡有明顯療效［19］.

3.3 外用治療皮膚病 取無花果干葉或鮮葉煮沸后文火煎煮，所得藥液用于沖洗患處或紗布濕敷，可用于會陰部濕疹［20］;無花果葉鮮葉搗碎用食醋調(diào)成糊狀敷于患處，用于治療帶狀皰疹［21］，皆療效明顯.其原因可能為無花果葉水提物具有抗病毒和抑制細菌的作用.

4 結(jié)語

無花果作為水果其經(jīng)濟價值已經(jīng)得到大家的認可，有關(guān)開發(fā)研究正如火如荼地進行，而傳統(tǒng)的藥材無花果葉其開發(fā)利用并未被大家重視.無花果樹在山東種植面積廣，易成活，無花果樹樹冠大，樹葉資源豐富，價廉易得，樹葉無毒并含有香柑內(nèi)酯、補骨脂素以及黃酮等豐富的化學(xué)成分，具有抗菌、抗氧化、抗癌以及降低血糖等藥理學(xué)作用，臨床上具有較廣闊的用途.深入開發(fā)加工無花果樹葉，提取其有效成分并生產(chǎn)成為相應(yīng)的保健品或藥品將會帶來巨大的經(jīng)濟效益.

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