非發(fā)酵革蘭陰性桿菌臨床耐藥性分析

梁偉 李娟

近年來，由于各種廣譜抗菌藥物、免疫制劑的大量使用以及介入性診療技術(shù)的開展，醫(yī)院非發(fā)酵革蘭陰性桿菌的感染率和耐藥率日漸增高。為了解我院非發(fā)酵革蘭陰性桿菌的感染和耐藥情況，以提高臨床抗菌藥物的應(yīng)用。我們對(duì)我院2010年5月～2011年5月非發(fā)酵革蘭陰性桿菌的分布和耐藥性進(jìn)行了分析，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 菌株來源

2010年5月～2011年5月,我院住院和門診患者各類標(biāo)本中,包括支氣管分泌物及痰、分泌物(引流液、創(chuàng)面拭子)、膿液、中段尿、血液、胸、腹水、腦脊液等,分離得到銅綠假單胞菌315株、不動(dòng)桿菌屬64株、嗜麥寡養(yǎng)單胞菌26株。剔除同一患者相同部位的重復(fù)菌株。

1.2 細(xì)菌分離培養(yǎng)與鑒定

按《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》[1]對(duì)各類標(biāo)本進(jìn)行接種、分離,采用DadeBehring Microscan Autoscan-4微生物鑒定儀作菌株鑒定,鑒定儀和NC-31鑒定卡購(gòu)自美國(guó)德靈公司。

1.3 藥物敏感性試驗(yàn)

藥敏試驗(yàn)采用K-B紙片擴(kuò)散法,M-H瓊脂為杭州天和產(chǎn)品。藥敏紙片(英國(guó)Oxoid公司產(chǎn)品):氨曲南、頭孢他啶、慶大霉素、哌拉西林、亞胺培南、哌拉西林/他唑巴坦、替卡西林/克拉維酸、復(fù)方新諾明、頭孢吡肟、左氧氟沙星、環(huán)丙沙星、美羅培南、米諾環(huán)素。結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)按照美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)(NCCLS)規(guī)定進(jìn)行。采用WHONET5.3進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。

1.4 質(zhì)控菌株

銅綠假單胞菌ACTCC 27853(購(gòu)自中國(guó)藥品生物制品檢定所)。

2 結(jié)果

2.1 病原菌分布情況

2010年5月～2011年5月從我院臨床和門診患者各類標(biāo)本中共分離出851株革蘭陰性桿菌,其中非發(fā)酵革蘭陰性桿菌428株占50.3%，以銅綠假單胞菌檢出率最高，共315株(73.5%)、其次為不動(dòng)桿菌屬64株(15.0%)、嗜麥芽寡養(yǎng)單胞菌26株(6.1%),其他非發(fā)酵細(xì)菌,包括伯克霍德菌屬、產(chǎn)堿菌屬細(xì)菌23株(5.4%)。分離情況見表1。

表1 非發(fā)酵革蘭陰性桿菌菌檢出分布構(gòu)成比(%)

表2 428株非發(fā)酵菌在臨床標(biāo)本中的分布（株）

2.2 臨床各類標(biāo)本的分離率

所有非發(fā)酵革蘭陰性桿菌以支氣管分泌物及痰標(biāo)本檢出率最高309株(72.2%),其次為分泌物52株(12.1%),中段尿41株(9.6%),膿液10株(2.3%),血液9株(2.1%)，胸、腹水7株(1.6%),各類細(xì)菌的標(biāo)本分離構(gòu)成比見表2。

2.3 藥敏結(jié)果

三種常見非發(fā)酵革蘭陰性桿菌對(duì)13種抗菌藥物的耐藥情況見表3。

表3 三種非發(fā)酵糖革蘭陰性桿菌對(duì)18種抗菌藥物的耐藥率（%）

3 討論

非發(fā)酵菌為一群需氧或兼性厭氧、不發(fā)酵糖類革蘭陰性桿菌,包括假單胞菌屬、不動(dòng)桿菌屬、產(chǎn)堿桿菌屬、寡養(yǎng)單胞菌屬等。臨床上比較常見的為銅綠假單胞菌、不動(dòng)桿菌屬和嗜麥芽寡養(yǎng)單胞菌。近年來,由于臨床上廣譜抗生素的大量應(yīng)用,以及免疫抑制性藥物和各種侵襲性診療方法的普及應(yīng)用,使得耐藥率高的非發(fā)酵菌在臨床的感染率呈逐年上升趨勢(shì),其已成為引起院內(nèi)感染的主要病原菌之一[2]。本院分離的非發(fā)酵菌中以銅綠假單胞菌檢出率最高,其次為不動(dòng)桿菌屬和嗜麥芽寡養(yǎng)單胞菌,占醫(yī)院總分離革蘭陰性桿菌的50.3%(428/851)。從臨床標(biāo)本分布特點(diǎn)來看,以支氣管分泌物及痰中分離率最高,其次為分泌物,提示非發(fā)酵菌是引起本院患者呼吸系統(tǒng)和傷口感染的主要致病菌。

非發(fā)酵革蘭陰性桿菌對(duì)常用抗菌藥物的耐藥率呈逐年上升趨勢(shì)。NCCLS 2003、2004年規(guī)定,用于銅綠假單胞菌、不動(dòng)桿菌屬常規(guī)檢測(cè)的B類抗菌藥物氨曲南在本院的耐藥率以分別達(dá)到50.48%, 76.56%,已不適合作為治療銅綠假單胞菌及不動(dòng)桿菌屬的常規(guī)和經(jīng)驗(yàn)用藥[3]。另一方面,以往常用于治療銅綠假單胞菌、不動(dòng)桿菌屬感染的碳青霉烯類藥物（美羅培南、亞胺培南）已經(jīng)出現(xiàn)了較高的耐藥率且均以＞50%；其他多種抗菌藥物(哌拉西林、哌拉西林/他唑巴坦、復(fù)方新諾明、慶大霉素、替卡西林/克拉維酸)的耐藥率均以＞50%,臨床抗菌藥物的使用應(yīng)參考微生物實(shí)驗(yàn)室的藥敏數(shù)據(jù)。對(duì)于嗜麥芽寡養(yǎng)單胞菌的藥敏試驗(yàn),紙片法常規(guī)只檢測(cè)復(fù)方新諾明、左氧氟沙星和米諾環(huán)素3種抗菌藥物[4-6]。從表3中顯示,嗜麥芽寡養(yǎng)單胞菌對(duì)美羅培南、亞胺培南天然耐藥,對(duì)復(fù)方新諾明、左氧氟沙星和米諾環(huán)素3種抗菌藥物的耐藥率分別為38.46%、19.23%、3.85%。

非發(fā)酵菌耐藥現(xiàn)象嚴(yán)重,對(duì)多種抗菌藥物具有天然耐藥性[7-9]。非發(fā)酵菌的耐藥機(jī)制十分復(fù)雜,其可通過質(zhì)粒、染色體及轉(zhuǎn)座子介導(dǎo)的超廣譜β-內(nèi)酰胺酶、氨基糖苷類修飾酶、青霉素結(jié)合蛋白改變、外膜蛋白通透性降低等機(jī)制傳播獲得耐藥性[2，10]。非發(fā)酵菌已成為院內(nèi)感染的重要病原菌，且耐藥率高，這給臨床抗感染治療增加了難度，因此臨床醫(yī)師應(yīng)根據(jù)微生物實(shí)驗(yàn)室的藥敏結(jié)果合理選用抗菌藥物，對(duì)減少和延緩耐藥菌株的產(chǎn)生,有效控制醫(yī)院感染具有重要的意義[11]。

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