鄭志挺
(浙江省溫嶺市第一人民醫(yī)院中藥房,浙江 溫嶺 317500)
蠶蛹為鱗翅目(Lepidoptera)蠶蛹科(Bombycidae)昆蟲(chóng)家蠶(Bombyx mori Linnacus)的蛹,中國(guó)的蠶桑資源十分豐富,過(guò)去我們只重視栽桑養(yǎng)蠶、繅絲織綢,而對(duì)大量的蠶副產(chǎn)品如蠶蛹、蠶沙,蠶蛾、大板絲、僵蠶、桑椹、桑枝等,尚未進(jìn)行很好的開(kāi)發(fā)利用。據(jù)資料報(bào)道,生產(chǎn)一噸生絲可以得到一噸蠶蛹[1]。近年來(lái)對(duì)蠶蛹綜合利用的研究表明,具有較高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和一定的藥用價(jià)值[2]。根據(jù)本草記載,蠶蛹自古就作為治療小兒疳熱,消渴等,還作為滋補(bǔ)強(qiáng)身,和脾胃,長(zhǎng)肌肉的食物和藥物加以應(yīng)用。現(xiàn)代研究也證實(shí)其含有豐富的營(yíng)養(yǎng)成分[3]。蠶蛹蛋白質(zhì)含量較高,以干品達(dá)55%~65%,含有18種氨基酸,其中必需氨基酸含量占總氨基酸40%左右[4],配比合理,符合聯(lián)合國(guó)糧農(nóng)組織及世界衛(wèi)生組織所規(guī)定的要求,其營(yíng)養(yǎng)價(jià)值可與牛奶、雞蛋媲美。另外,蠶蛹中還含有豐富的脂肪、多糖,在醫(yī)藥保健方面也具有較高的利益價(jià)值。但是由于品種、出產(chǎn)地域和氣候不同造成了不同產(chǎn)地的蠶蛹油品質(zhì)上有所差異。本文對(duì)不同產(chǎn)地蠶蛹的營(yíng)養(yǎng)成分進(jìn)行了分析研究。
1.1.1 藥材
蠶蛹:分別來(lái)源于廣東、湖北宜昌、浙江海寧和浙江湖州四種不同產(chǎn)地。
1.1.2 主要儀器
101A-3型數(shù)顯電熱風(fēng)干燥箱(上海浦東榮豐科學(xué)儀器有限公司)、套式恒溫器(海寧新華醫(yī)療器械廠)、DDY-5型總氮測(cè)定儀(北京興化真空儀表廠)、LWY-型調(diào)溫式遠(yuǎn)紅外燒煮爐(吉林省四平市興科儀表廠)、SZF-06A型脂肪測(cè)定儀(上海新佳電子有限公司)、萬(wàn)分之一電子天平(德國(guó)SARTORIUS公司)、Vrian Prostar高效液相色譜系統(tǒng)(230三元梯度泵、二級(jí)管陣列檢測(cè)器、410自動(dòng)進(jìn)樣器)、SUPELCOSLTMLC-DABS柱(4.6mm×150mm,3μm)、JBZ-14型恒溫磁力攪拌器(上海志威電器有限公司)、PH201型PH計(jì)(意大利哈那公司)、真空干燥箱(上海申儀開(kāi)關(guān)廠)。
1.1.3 主要試劑
甲醛(AR)、氫氧化鈉(AR)、乙醚(AR)、硫酸銅(AR)、硫酸鉀(AR)硫酸(AR)、鹽酸(AR)、混合硼酸指示劑(現(xiàn)配)、Dabsyl-CL衍生劑(SUPELCO 批號(hào)502219)、磷酸二氫鉀(AR)、丙酮(AR)、乙醇(AR)、甲醇(HPLC級(jí))、乙腈(HPLC)、Dabsyl-CL衍生試劑(SUPELCO公司)、氨基酸標(biāo)準(zhǔn)品(Waters公司)。
1.2.1 水分含量的測(cè)定
分別稱(chēng)取不同產(chǎn)地蠶蛹藥材粉末4~5g,平鋪于干燥至恒重的扁平形稱(chēng)量瓶中,精密稱(chēng)重,打開(kāi)瓶蓋在105℃下干燥5h,將瓶蓋蓋好,移置干燥器中,冷卻30min,精密稱(chēng)重,再在上述溫度干燥1h,冷卻,稱(chēng)重,至兩次稱(chēng)重的差異不超過(guò)5mg為止。根據(jù)減失的重量,計(jì)算供試品中含水量(%)。
1.2.2 脂肪含量的測(cè)定
分別稱(chēng)取不同產(chǎn)地蠶蛹藥材粉末4~5g,加乙醚約60mL在脂肪測(cè)定儀上回流6h,回收乙醇后,將平底燒瓶在水浴上揮去有機(jī)溶劑,然后再105℃時(shí)烘至恒重,稱(chēng)其重量,再洗去脂肪,稱(chēng)取烘至恒重的平底燒瓶的重量,兩個(gè)重量相減即得油脂重量,最后計(jì)算供試品中脂肪的含量(%)。
1.2.3 總氮含量的測(cè)定
分別稱(chēng)取不同產(chǎn)地的蠶蛹粉末20mg加入消煮管內(nèi),再分別加入5滴30%的硫酸銅溶液,0.3g硫酸鉀及5mg濃硫酸,然后放入遠(yuǎn)紅外消煮儀以290℃消煮3h后(消煮完全),冷卻,用總氮測(cè)定儀測(cè)定總氮。
1.2.4 氨基酸含量測(cè)定
1.2.4.1 蠶蛹水解液的制備
取不同產(chǎn)地蠶蛹個(gè)200mg分別加入6mol/L的HCL600mL置三口燒瓶中在110℃下加熱24h[5]后,放置室溫,抽濾,濾渣棄去,濾液用蒸餾水定容至1000mL。
1.2.4.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的制備
精密吸取混合氨基酸標(biāo)準(zhǔn)品100μL,用NaHCO3溶液(pH=9.0)稀釋至2mL,則得到123nmol/mL的標(biāo)準(zhǔn)液。精密吸取此標(biāo)準(zhǔn)液100μL于試管中,加入500μL DABS-CL衍生劑,70℃水浴反應(yīng)10min后,真空干燥,干燥固體用1mL 70%乙醇溶解,微孔濾膜過(guò)濾,備用,分別去3、9、15、24、30μL進(jìn)樣,測(cè)定峰面積并繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。
1.2.4.3 色譜條件
①流動(dòng)相。A:0.025mol/L的磷酸二氫鉀緩沖液(pH調(diào)至7.0);B:70%乙腈與30%甲醇(體積比)混勻。②梯度條件:initial至9min,A有80%調(diào)至70%,保持到23min,23min至24minA由75%調(diào)至68%,保持到30min;30min至37min,A由68%調(diào)至60%;37min至46min,A由60%調(diào)至40%;46min至54min,A由40%調(diào)至25%,保持到59min;59min至60min,A由25%調(diào)至80%,保持到80min結(jié)束。③流速:1.5mL/min。④檢測(cè)器:PDA(436nm)。⑤柱溫:30℃。
1.2.4.4 樣品氨基酸含量測(cè)定
取100μL蠶蛹水解液,衍生化同標(biāo)準(zhǔn)品,經(jīng)微孔濾膜過(guò)濾后,上樣分析,樣品液氨基酸的含量測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表表盒2。
表1 不同產(chǎn)地蠶蛹粉末的水分、脂肪、總氮含量(單位:g./100g)
表2 各產(chǎn)地蠶蛹氨基酸的含量測(cè)定結(jié)果(單位:g/100g)
由表1、2可見(jiàn),四個(gè)產(chǎn)地蠶蛹的水分含量以湖州產(chǎn)蠶蛹最高,容易發(fā)生霉變,收購(gòu)后應(yīng)馬上烘干。各地蠶蛹的脂肪和總氮含量相差無(wú)幾,以浙江海寧和廣東產(chǎn)蠶蛹含量較高。四個(gè)產(chǎn)地蠶蛹水解后氨基酸含量和必需氨基酸含量以廣東和浙江海寧產(chǎn)的較高,湖北產(chǎn)蠶蛹各項(xiàng)指標(biāo)均為最低。
蠶蛹自古就作為滋補(bǔ)強(qiáng)身,和脾胃,長(zhǎng)肌肉的食物和藥物。歷代本草著作中都有蠶蛹作藥用的記載?!侗静菥V目》記載蠶蛹“為末飲服,治小兒疳瘦,長(zhǎng)肌,退熱,除蛔蟲(chóng);煎汁飲,止消渴”?,F(xiàn)代的本草學(xué)著作如《中藥大辭典》、《中藥志》、《中華藥海》、《中藥辭海》等也都將蠶蛹作為補(bǔ)益類(lèi)中藥收錄。
蠶蛹的蛋白質(zhì)含量十分豐富,可達(dá)55%~60%。蠶蛹系全價(jià)蛋白,營(yíng)養(yǎng)價(jià)值可與雞蛋、牛奶媲美。試驗(yàn)證實(shí),可促進(jìn)幼齡大鼠生長(zhǎng)發(fā)育、各項(xiàng)營(yíng)養(yǎng)學(xué)指標(biāo)與酪蛋白相一致甚至超過(guò)酪蛋白。20世紀(jì)60年代用脫脂蠶蛹為原料生產(chǎn)蠶蛹蛋白,用于治療浮腫病和干瘦病。本課題組從蠶蛹中提取的復(fù)合氨基酸,含人體所需要的18種氨基酸,組分配比合理,符合FAO/WHO(聯(lián)合國(guó)糧農(nóng)/世界衛(wèi)生組織)所規(guī)定的氨基酸模式。蠶蛹復(fù)合氨基酸可明顯提高免疫低下小鼠T淋轉(zhuǎn)和B淋轉(zhuǎn)功能,并有抗疲勞,促進(jìn)造血,護(hù)肝,降糖和一定的抗腫瘤作用。以蠶蛹復(fù)合氨基酸為原料已研制成食品營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化劑“復(fù)合氨基酸”、“復(fù)方營(yíng)養(yǎng)要素”;保健品“舒樂(lè)康膠囊”、“天龍寶口服液”、“生寶養(yǎng)生液”、“補(bǔ)骨神口服液”、“益爾康膠囊”等,氨基酸系列營(yíng)養(yǎng)食品(面條、餅干、果醬、可樂(lè)等),絲菊美系列化妝品(防皺面霜、二合一洗發(fā)香波、洗面奶、沐浴乳、潤(rùn)膚露、香水等6種)。這些新產(chǎn)品投放市場(chǎng)后,深受群眾歡迎。
蠶蛹油含有約75%不飽和脂肪酸和20%飽和脂肪酸。不飽和脂肪酸主要由油酸、亞油酸和亞麻酸組成,飽和脂肪酸主要為棕櫚酸和硬脂酸,還含有微量夾雜物,如蛋白,磷脂,糖類(lèi),色素等。由于蛹油中含有大量具有三個(gè)不飽和雙鍵的α-亞麻酸,故蛹油的不飽和程度相當(dāng)高。另外值得一提的是蛹油中還含有約4%的磷脂。蛹磷脂中含有溶血卵磷脂,神經(jīng)磷脂,磷脂酰肌醇,卵磷脂等,是治療高血脂癥、動(dòng)脈硬化、肝炎、肝硬化輔助醫(yī)藥醫(yī)療。
蠶蛹甲殼質(zhì)主要集中在蛹皮中。脫脂蠶蛹中含蛹皮8%~9%,主要成分為甲殼質(zhì)、蛋白、無(wú)機(jī)鹽、以及色素等。蛹皮中可提取的甲殼質(zhì)達(dá)50%以上,而蟹殼中可提取的甲殼質(zhì)僅20%~25%,故蛹皮中有用甲殼質(zhì)為蟹殼的兩倍。蠶蛹皮中提取甲殼質(zhì)制備人造皮膚、手術(shù)縫線(xiàn)在醫(yī)學(xué)上用途廣泛。
蠶蛹中還含有磷脂、多糖、膽甾醇、植物甾醇、麥角甾醇、腎上腺素、去甲腎上腺素、腺嘌呤、次黃嘌呤、膽堿和多種蛋白激素,如促前胸腺激素,滯育激素,以及大量維生素A、維生素B2、維生素D、葉酸和豐富的Mg、Ca、Zn、Fe、Cu、Se等微量元素。從蠶蛹中可提取出治療艾滋病的有效藥物成分A.Z.T.及提取脫氧核苷酸鈉、維生素B2等原料,這些項(xiàng)目急待進(jìn)一步深入開(kāi)展。
本研究在課題組以前工作的基礎(chǔ)上,將各個(gè)產(chǎn)地蠶蛹的營(yíng)養(yǎng)成分進(jìn)行系統(tǒng)的比較,為尋找新的優(yōu)良動(dòng)物氮源提供了有力依據(jù)。為蠶蛹提取復(fù)合氨基酸做前期的工作。
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