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    不同激素水平對(duì)文心蘭原球莖脫分化的影響1)

    2011-08-07 10:15:34尤海波
    中國林副特產(chǎn) 2011年5期
    關(guān)鍵詞:原球莖細(xì)胞分裂文心

    尤海波

    (黑龍江省農(nóng)科院園藝分院,哈爾濱 150069)

    文心蘭屬蘭科文心蘭屬(Oncidium),花形奇特似舞女,又名跳舞蘭、金粉蝶蘭、瘤瓣蘭,屬復(fù)莖類洋蘭,附生或地生[1],原產(chǎn)墨西哥、西印度群島、巴西等地[1-7]??勺鳛榕杌ê颓谢ǎm及大花蕙蘭一樣,作為主要的栽培品種,市場(chǎng)需求量越來越大[2-5]。文心蘭傳統(tǒng)的繁殖方式為分株繁殖,繁殖系數(shù)較低,容易受到病毒感染,造成品質(zhì)退化,應(yīng)用植物組織培養(yǎng)技術(shù)進(jìn)行快繁利于保持種苗特性,有效控制病害,因此,探索文心蘭組織培養(yǎng)快速繁殖方式具有重要意義。

    細(xì)胞分裂素類激素在試管苗增殖中起關(guān)鍵作用。本試驗(yàn)以誘導(dǎo)出的文心蘭原本球莖為外植體,采用3種常用的細(xì)胞分裂素考察文心蘭原球莖分化效果,選出適于文心蘭原球莖分化培養(yǎng)基,同時(shí)也為進(jìn)一步研究3種細(xì)胞分裂素的作用機(jī)理奠定基礎(chǔ)。

    1 材料與方法

    1.1 材料與試劑

    黑龍江省農(nóng)科院科技園區(qū)栽培的寬唇文心蘭品種(Oncidium )誘導(dǎo)的原球莖;6-BA(6-芐基腺嘌呤)、KT(激動(dòng)素)、Ad(腺嘌呤硫酸鹽)、NAA(α-萘乙酸)等購于中國上?;菖d生化試劑公司。

    1.2 培養(yǎng)基

    以 MS為基本培養(yǎng)基,糖30g/L、瓊脂粉6g/L、pH 5.6,各種激素配比見表1。

    1.3 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

    3種細(xì)胞分裂素分別采用單因素隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)。

    1.4 接種方法

    將文心蘭原球莖置于超凈工作臺(tái)上,用手術(shù)刀分成大小均勻的小塊,接種于上述不同培養(yǎng)基,每處理10瓶,每瓶5塊原球莖。觀察記錄接種后新芽產(chǎn)生的時(shí)間、生長狀況及35d的分化情況。

    1.5 培養(yǎng)條件

    培養(yǎng)室溫度(25±1)℃、光強(qiáng)2000~1500lx、光照時(shí)間12h/d。

    表1 各處理培養(yǎng)基中激素的組合及濃度 mg·L-1

    2 結(jié)果與分析

    2.1 不同濃度6-BA對(duì)文心蘭原球莖分化試管苗的影響

    表2 不同濃度6-BA對(duì)文心蘭新芽產(chǎn)生的時(shí)間及分化率的影響

    不同濃度6-BA對(duì)文心蘭原球莖分化的影響情況見表2。由表2可以看出,當(dāng)NAA濃度一定時(shí),在6-BA低濃度時(shí)沒有原球莖(Protocorm Like Body,PLB)形成。6-BA濃度在0.5~3.0mg/L范圍內(nèi),隨著濃度的逐漸增加,新芽形成時(shí)間逐漸縮短,且試管苗的分化率逐漸提高;當(dāng)6-BA濃度為2.0mg/L,NAA濃度0.1mg/L時(shí),試管苗的分化率較高,分化系數(shù)達(dá)7.27,同時(shí)在苗與培養(yǎng)基接觸面附近有少量原球莖形成;當(dāng)6-BA 濃度為2.0mg/L,NAA 濃度0.2mg/L時(shí),試管苗的分化率最高,分化系數(shù)達(dá)7.27,在苗與培養(yǎng)基接觸面附近沒有原球莖形成;但當(dāng)6-BA濃度超過3.0mg/L時(shí),分化系數(shù)下降,而原球莖形成量卻增加。這說明濃度適中的6-BA對(duì)BA對(duì)增殖率影響達(dá)到了極顯著差異的水平。6-BA濃度在2.0mg/L,NAA濃度在0.2水平下的培養(yǎng)基較適合試管苗的增殖。

    2.2 不同濃度KT對(duì)文心蘭試管苗增殖的影響

    由表3可以看出,KT濃度在0.5~2.0mg/L的處理中沒有新芽產(chǎn)生,而當(dāng)KT濃度為3.0~4.0mg/L時(shí)有叢生芽形成,但形成叢生芽的時(shí)間在不同處理之間差異不大,同時(shí),在NAA為0.2mg/L的情況下,KT無論在高濃度或低濃度時(shí)均有原球莖產(chǎn)生。由此可見,KT對(duì)文心蘭的原球莖有增殖作用,對(duì)原球莖分化成苗作用相對(duì)較弱。

    表3 不同濃度KT對(duì)文心蘭原球莖分化的時(shí)間及分化率的影響

    3 結(jié)論

    以MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基,用2種不同的細(xì)胞分裂素6-BA、KT和不同濃度生長素NAA組配對(duì)文心蘭原球莖分化影響的研究結(jié)果表明,2種激素對(duì)文心蘭試管苗的影響差異較大。用一定濃度(2.0mg/L)的6-BA對(duì)文心蘭原球莖進(jìn)行分化不僅增殖率高,而且苗的狀況好,沒有原球莖的增殖,比較適合文心蘭原球莖分化的培養(yǎng)基為 MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.2。

    [1]Santana G E,Chaparro K.Clonal Progpgation of Oncidium Through the Culture of Floral buds[J].Acculture,1997,482:315-320.

    [2]Kerbelly G B.1984.Plant regeneration of Oncidium varicosum by means of root tip culture.Plant Cell Reports.3(1)21-29.

    [3]陳興貽.文心蘭組織培養(yǎng)[J].植物生理學(xué)通訊,1989(2):49.

    [4]陳菁英,藍(lán)賀勝,陳雄鷹.蘭花組織培養(yǎng)與快速繁殖技術(shù)[M].北京:中國農(nóng)業(yè)出版社,2004:107-115.

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    [6]朱根發(fā),王懷宇,陳明莉,等.文心蘭脫毒快速繁殖技術(shù)研究[J].廣東農(nóng)業(yè)科學(xué),1997(4):27-28.

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