革蘭陰性桿菌超廣譜β-內(nèi)酰胺酶檢測(cè)結(jié)果分析

周明輝

（連州市人民醫(yī)院，廣東 連州513400）

隨著廣譜抗生素類(lèi)藥物的廣泛應(yīng)用，尤其是在近年以來(lái)，三代頭孢類(lèi)藥物被臨床廣泛應(yīng)用，使大多數(shù)的革蘭陰性桿菌產(chǎn)生了大量的ESBL，這類(lèi)酶能夠使所有的青霉素類(lèi)藥物發(fā)生水解[1]。對(duì)于第一、二、三代頭孢類(lèi)藥物和某些第四代頭孢菌素類(lèi)藥物及單環(huán)氨曲南類(lèi)藥物，為患者病情的治療帶來(lái)相當(dāng)大的困難。所以，對(duì)ESBL進(jìn)行準(zhǔn)確及時(shí)的檢測(cè)對(duì)于臨床準(zhǔn)確用藥有一定的指導(dǎo)作用，可以使院內(nèi)感染得到有效控制，具有十分重要的臨床意義[2]。為了對(duì)革蘭氏陰性桿菌超廣譜β-內(nèi)酰胺酶的檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行系統(tǒng)分析，并對(duì)其耐藥性加以闡述，為今后臨床合理用藥提供可靠的依據(jù)，使抗生素的使用更加合理，使患者的治療更加及時(shí)，提供一些比較有參考價(jià)值的資料，我們進(jìn)行了本次研究。在研究的整個(gè)過(guò)程中，我們采用隨機(jī)抽樣的方法，在2007年8月至2010年8月這三年時(shí)間里，抽取250份我院的臨床送檢標(biāo)本資料，對(duì)這些標(biāo)本進(jìn)行常規(guī)細(xì)菌鑒定、ESBL檢測(cè)、藥敏試驗(yàn)，分析相關(guān)結(jié)果耐藥性?，F(xiàn)將分析結(jié)果報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

采用隨機(jī)抽樣的方法，在2007年8月至2010年8月這三年時(shí)間里，抽取250份我院的臨床送檢標(biāo)本資料，標(biāo)本采集患者年齡在22至85歲之間，平均年齡53.2歲；其中包括113例男性患者和137例女性患者；患者的所有自然資料，沒(méi)有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，可以進(jìn)行比較分析。

1.2 方法

采用隨機(jī)抽樣的方法，在2007年8月至2010年8月這三年時(shí)間里，抽取250份我院的臨床送檢標(biāo)本資料，對(duì)這些標(biāo)本進(jìn)行常規(guī)細(xì)菌鑒定、ESBL檢測(cè)、藥敏試驗(yàn)，分析相關(guān)結(jié)果耐藥性。

1.3 操作

采用我院現(xiàn)有的培養(yǎng)基和配套試劑、血瓊脂、水解蛋酪白胨平板、藥敏紙片、沙保弱平板對(duì)采集的尿液標(biāo)本進(jìn)行細(xì)菌鑒定和藥敏試驗(yàn)[3]。

1.4 細(xì)菌培養(yǎng)

首先將標(biāo)的培養(yǎng)基本置于二氧化碳孵箱中，培養(yǎng)基應(yīng)放入?yún)捬醮?，?0℃以上培養(yǎng)兩天，皰肉培養(yǎng)管在35℃以上培養(yǎng)一天，對(duì)有氣體產(chǎn)生者進(jìn)行鑒定，沒(méi)有氣體產(chǎn)生者要繼續(xù)培養(yǎng)一天。對(duì)達(dá)到要求的菌落進(jìn)行觀察，對(duì)染色形態(tài)、具體生化反應(yīng)進(jìn)行記錄，并作出血清學(xué)診斷[4]。

2 結(jié) 果

研究結(jié)果顯示，革蘭陰性桿菌對(duì)第一代頭孢類(lèi)藥物的耐藥性最高，對(duì)第二代頭孢的耐藥率在40%左右，對(duì)第三代頭孢的耐藥率在20%左右。肺炎克雷伯氏菌、大腸埃希菌為產(chǎn)酶株，其耐藥率也呈現(xiàn)顯著增高趨勢(shì)。見(jiàn)表1。

表1 幾種革蘭陰性菌ESBL的檢出率

3 討 論

隨著現(xiàn)代醫(yī)學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，抗生素類(lèi)藥物的問(wèn)世及廣泛應(yīng)用，有創(chuàng)檢查技術(shù)和介入治療方法的不斷增加，導(dǎo)致臨床感染的具體類(lèi)型，細(xì)菌的具體種類(lèi)和相關(guān)耐藥性都發(fā)生了很大的變化，在以前很少能夠?qū)е赂腥镜臈l件和非致病菌所引起的感染在近年來(lái)呈現(xiàn)出增加的趨勢(shì)。革蘭陰性桿菌所產(chǎn)生的耐藥主要是因?yàn)棣?內(nèi)酰胺酶的生成所導(dǎo)致。過(guò)去醫(yī)學(xué)界廣泛認(rèn)為是條件致病菌的不動(dòng)桿菌，在近年來(lái)已經(jīng)開(kāi)始成為導(dǎo)致醫(yī)院內(nèi)部感染的重要致病菌的一種。該類(lèi)菌株對(duì)第三代頭孢菌素類(lèi)藥物以及亞胺培南的耐藥率仍然不是很高[5]。

肺炎克雷伯氏菌、綠膿桿菌等細(xì)菌、大腸埃希氏菌，可以誘導(dǎo)產(chǎn)生β-原內(nèi)酰胺酶，從而導(dǎo)致β-原內(nèi)酰胺類(lèi)的抗生素的活性基因遭到破壞，從而對(duì)于β-原內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素特別是第三代頭孢和氨曲南等耐藥，通常情況下對(duì)于含有β-原內(nèi)酰胺酶抑制劑的一些復(fù)合類(lèi)藥物。氨芐西林/舒巴坦，頭孢派酮/舒巴坦等藥物的敏感性比較強(qiáng)，這種耐藥機(jī)制是由于質(zhì)粒的介導(dǎo)作用所產(chǎn)生的，可以在不同種類(lèi)的細(xì)菌之間進(jìn)行進(jìn)一步的傳播，故該類(lèi)菌株的檢出率呈現(xiàn)出逐漸升高的趨勢(shì)。ESBL主要是依靠質(zhì)粒進(jìn)行介導(dǎo)，很容易導(dǎo)致多種耐藥的產(chǎn)生。產(chǎn)ESBL菌種，由于菌種產(chǎn)酶量的大小不同，在藥敏試驗(yàn)中可以使三代頭孢和氨曲南MIC的數(shù)值明顯縮小，甚至導(dǎo)致體外敏感現(xiàn)象的出現(xiàn)，而在患者體內(nèi)應(yīng)該是耐藥的，即隱蔽性耐藥。所以，臨床醫(yī)生必須了解一點(diǎn)，只要該菌才是產(chǎn)酶菌，必須停用所有的青霉素類(lèi)藥物和頭孢類(lèi)藥物也包括氨曲南。

ESBL的檢測(cè)方法具有操作方便簡(jiǎn)便，結(jié)果準(zhǔn)確可靠，易觀察，便于掌握，對(duì)基層醫(yī)院的常規(guī)應(yīng)用來(lái)說(shuō)比較適合。更為重要的一點(diǎn)是，使臨床對(duì)細(xì)菌耐藥性的認(rèn)識(shí)得到了明顯提高，使抗菌藥物的管理和在臨床上的正確使用得到了顯著加強(qiáng)，防止菌群出現(xiàn)失調(diào)現(xiàn)象，使醫(yī)院感染的發(fā)生率明顯減少。增大了藥敏試驗(yàn)對(duì)臨床的指導(dǎo)作用，使廣大患者能夠得到準(zhǔn)確的診斷和及時(shí)的治療，對(duì)患者病情的早日康復(fù)有著積極的促進(jìn)作用。因此，讓所有的臨床醫(yī)生必須懂得該耐藥機(jī)制，用現(xiàn)代的思維方式結(jié)合藥敏的實(shí)驗(yàn)報(bào)告，才能合理使用抗生素，避免盲目的經(jīng)驗(yàn)用藥，提高臨床治療效果[6]。

綜上所述，對(duì)醫(yī)院內(nèi)的細(xì)菌菌譜和其具體的耐藥情況進(jìn)行定期檢測(cè)，著重了解ESBL陽(yáng)性株在患者體內(nèi)外的具體藥理表現(xiàn)，根據(jù)這一情況選擇合理的抗生素對(duì)患者的病情進(jìn)行治療，有著十分重要的意義，值得在今后的臨床工作中給予足夠的重視。

[1] 于文彬,徐慘禮,馬艷,等.ICU內(nèi)患者感染菌分布及耐藥分析[J].第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào),2005,2l(1):67-68.

[2] 辛建文,百友華.下呼吸道感染患者痰菌分離譜和細(xì)菌耐藥的變遷[J].實(shí)用肺科雜志,2007,4(1):24-27.

[3] 瞿亞紅.秋冬季下呼吸道感染病原菌譜及耐藥分析[J].中國(guó)醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)雜志,2007,6(6):53.

[4] Jacoby G,Carreras A.Activities Of B-Lactam antibiotics against estcherichia colistrains produccing extended spectrum B-lactarnases[J].Agents Chemother,2009,34(51):858.

[5] Bergogne-Berezin EJ,Tower K.Acinetobacter spp as nosocomial pathogens:microbiologcal and epidermiological features[J].Clin Microhiolo Rev,2007,9(12):148.

[6] 戴自英,劉裕昆,汪復(fù).實(shí)用抗菌藥物學(xué)[M].2版.上海:上海科學(xué)技術(shù)出版社,2008:139-140.