脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2與冠狀動(dòng)脈病變的關(guān)系

何晨，唐曉芳，袁晉青，楊躍進(jìn)，陳紀(jì)林，陳玨，尤士杰，吳元，李建軍，劉海波，吳永健，姚 民，秦學(xué)文，戴軍，喬樹(shù)賓，高潤(rùn)霖

脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2(LP-PLA2)是近年來(lái)新發(fā)現(xiàn)的與冠心病發(fā)病有密切關(guān)系的炎性標(biāo)志物，薈萃分析顯示［1］:LP-PLA2與心血管事件的發(fā)病率明顯相關(guān)，是影響預(yù)后的獨(dú)立危險(xiǎn)因子。LP-PLA2主要由動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的特征細(xì)胞所產(chǎn)生，促進(jìn)巨噬細(xì)胞轉(zhuǎn)化成泡沫細(xì)胞，形成動(dòng)脈粥樣硬化斑塊。還會(huì)使得血小板源生長(zhǎng)因子和表皮生長(zhǎng)因子表達(dá)增加，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡壞死［2］。本研究擬入選不同類型冠心病以及對(duì)照組的患者，對(duì)其進(jìn)行選擇性冠狀動(dòng)脈(冠脈)造影檢查，測(cè)定并比較不同組別之間其血漿中LP-PLA2的水平，以探討LP-PLA2與各型冠心病的冠脈病變支數(shù)，冠脈狹窄程度以及和斑塊穩(wěn)定程度的關(guān)系。

1 資料與方法

研究對(duì)象:入選2009-04至2009-09入住我院，并行冠脈造影檢查的患者共計(jì)197例，平均年齡為(58.1±10.8)歲，依據(jù)世界衛(wèi)生組織診斷標(biāo)準(zhǔn)和中華醫(yī)學(xué)會(huì)心血管病學(xué)分會(huì)的相關(guān)指南進(jìn)行分組，分為急性心肌梗死組51例，不穩(wěn)定性心絞痛組48例，穩(wěn)定性心絞痛組54例，造影正常者為對(duì)照組44例。

標(biāo)本采集:冠脈造影前即刻經(jīng)介入途徑動(dòng)脈采血5 ml，置于依地酸(EDTA)抗凝管中，混勻后4℃ 3000 r/min離心15 min，分離并分裝血漿，保持于－20℃中，在1個(gè)月內(nèi)測(cè)定各項(xiàng)指標(biāo)。測(cè)定當(dāng)日于37℃水浴中迅速?gòu)?fù)融。同時(shí)由檢驗(yàn)科進(jìn)行肝腎功能、血糖、血脂、心肌酶等檢測(cè)。

測(cè)定方法:采用酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)法測(cè)定以下指標(biāo):LP-PLA2、基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)、基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑-1(TIMP-1)，試劑盒由USCNLIFE公司(美國(guó))提供，新喋呤(Neopterin)試劑盒由IBL公司(德國(guó))提供。MMP-9和TIMP-1的單位為ng/ml，新喋呤的單位為nmol/L，LP-PLA2單位為pg/ml。

冠脈狹窄程度評(píng)估:采用Judkins法接受選擇性冠脈造影檢查，每支冠脈均經(jīng)多體位投照。參照美國(guó)心臟病學(xué)會(huì)/美國(guó)心臟病協(xié)會(huì)(ACC/AHA)冠脈造影指南［2］和Gensini積分評(píng)估系統(tǒng)，管腔狹窄和彌漫程度以定量冠脈造影分析為基礎(chǔ)，采用2種方式評(píng)估:①冠脈病變支數(shù):當(dāng)病變管腔狹窄≥50%時(shí)為陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)，累及左前降支，左回旋支，右冠脈各記為1支，累及左主干記為2支。②Gensini積分法:將冠脈分為14段，根據(jù)病變血管的不同節(jié)段和血管病變不同程度制定不同的權(quán)重系數(shù):評(píng)分方法為冠脈狹窄程度權(quán)重系數(shù)乘以各病變血管的權(quán)重系數(shù)，最后評(píng)分為各分支評(píng)分之和。

統(tǒng)計(jì)學(xué)方法:計(jì)量資料用x±s表示，采用 t檢驗(yàn)進(jìn)行兩組間的比較;采用ANOVA方差分析進(jìn)行多組間的比較，若有顯著性差異，則進(jìn)一步采用LSD檢驗(yàn)進(jìn)行多重比較。計(jì)數(shù)資料用絕對(duì)數(shù)表示，假設(shè)檢驗(yàn)為卡方檢驗(yàn)。兩個(gè)變量間的相關(guān)程度應(yīng)用Spearman秩相關(guān)系數(shù)進(jìn)行描述。所有分析應(yīng)用SPSS統(tǒng)計(jì)軟件處理，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

患者基本臨床資料如表1所示:四組之間在年齡、高脂血癥、糖尿病發(fā)病率上差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，在急性心肌梗死組、不穩(wěn)定性心絞痛組、穩(wěn)定性心絞痛組三組中的男性，高血壓和吸煙史的比例較對(duì)照組高(P均＜0.05)，穩(wěn)定性心絞痛組和不穩(wěn)定性心絞痛組高血壓的發(fā)生率高于急性心肌梗死組(P均＜0.05)，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

表1 臨床基本資料［%(例)］

LP-PLA2和其他炎癥因子在各組中的比較(表2):在穩(wěn)定性心絞痛組和不穩(wěn)定性心絞痛組中LPPLA2水平較對(duì)照組高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，而急性心肌梗死組雖有升高，但與對(duì)照組比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。急性心肌梗死組高敏C反應(yīng)蛋白、新喋呤、MMP-9、TIMP-1均高于對(duì)照組(P均＜0.05)。急性心肌梗死組以上四個(gè)指標(biāo)同樣高于不穩(wěn)定性心絞痛組及穩(wěn)定性心絞痛組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均＜0.05)。

表2 四組中脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2和其他炎癥因子水平的比較(x±s)

LP-PLA2的水平與高敏C反應(yīng)蛋白(R=0.02，P=0.82)、新喋呤(R=－0.11，P=0.14)、MMP-9(R=－0.15，P=0.40)以及 TIMP-1(R=0.12，P=0.11)皆無(wú)相關(guān)性。

LP-PLA2水平與冠脈病變支數(shù)關(guān)系:LP-PLA2水平與冠脈病變支數(shù)關(guān)系如表3所示，各組內(nèi)隨著病變支數(shù)的增加，LP-PLA2的水平有逐步升高趨勢(shì)，但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。將病變支數(shù)相同的三組患者合計(jì)結(jié)果顯示:隨著病變支數(shù)增加，LP-PLA2水平逐步升高，雙支及雙支+左主干、三支及三支+左主干病變的LP-PLA2水平明顯大于單支病變，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。急性心肌梗死組患者單支病變所占比例顯著高于不穩(wěn)定性心絞痛組及穩(wěn)定性心絞痛組(P＜0.05)，急性心肌梗死組三支及三支+左主干病變比例顯著低于不穩(wěn)定性心絞痛組及穩(wěn)定性心絞痛組(P＜0.05)，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

表3 脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2與冠脈病變支數(shù)關(guān)系(x±s)

LP-PLA2水平與冠脈狹窄程度評(píng)估:在評(píng)估LP-PLA2水平和冠脈狹窄程度關(guān)系時(shí)，為了去除支架和急性血栓的影響，只入選新發(fā)的未曾置入支架的穩(wěn)定性和不穩(wěn)定性心絞痛的患者，共計(jì)78例患者，其中穩(wěn)定性心絞痛38例，不穩(wěn)定心絞痛40例。78例中單支病變20例，雙支病變16例，三支病變42例，LP-PLA2(pg/ml)水平單支病變 45.7±24.8、雙支病變 52.5±27.7、三支病變 63.3±40.3，三支病變較單支病變有增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);Gensini積分單支病變14.4±12.9、雙支病變 27.0±26.4、三支病變 61.3±36.6，三支病變較單支病變有增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。兩種評(píng)估方式中，雙支病變與單支病變均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)

3 討論

LP-PLA2是近年新發(fā)現(xiàn)與冠心病發(fā)病有密切關(guān)系的炎性標(biāo)志物，相關(guān)的實(shí)驗(yàn)報(bào)道表明［3］:LP-PLA2促進(jìn)動(dòng)脈粥樣硬化的形成，是心血管事件的獨(dú)立預(yù)測(cè)因子。

目前，關(guān)于LP-PLA2的水平與斑塊的穩(wěn)定性以及與冠脈事件的關(guān)系存在較大爭(zhēng)議［4，5］。Winkler等［6，7］發(fā)現(xiàn)LP-PLA2在冠脈造影陽(yáng)性的病人中明顯增高，但是在冠心病各組之間卻無(wú)明顯差異，同時(shí)LP-PLA2的活性與急性期炎癥因子指標(biāo)(高敏C反應(yīng)蛋白，纖維蛋白原，脂蛋白A)并不相關(guān)。表明LP-PLA2的活性并不是機(jī)體炎癥活性的反應(yīng)指標(biāo)，也與心肌的缺血程度以及斑塊的穩(wěn)定性無(wú)關(guān)，與冠心病管腔狹窄程度有關(guān)。

Blankenberg等［8］研究結(jié)果顯示:與對(duì)照組相比，急性冠脈綜合征組和穩(wěn)定性心絞痛組的患者LP-PLA2的活性均增加，并且急性冠脈綜合征組比穩(wěn)定性心絞痛組升高更加明顯。但急性冠脈綜合征組高于穩(wěn)定性心絞痛組的可能原因并未解釋。研究結(jié)論:LP-PLA2活性與其他急性期的炎癥標(biāo)志物(高敏C反應(yīng)蛋白、白細(xì)胞介素-6、纖維蛋白原)無(wú)明顯相關(guān)性，而與斑塊穩(wěn)定程度相關(guān)。

本研究所得出的結(jié)果顯示:在穩(wěn)定性心絞痛和不穩(wěn)定性心絞痛組，LP-PLA2的水平均明顯高于對(duì)照組，有顯著性差異，而急性心肌梗死組雖有升高，但與對(duì)照組無(wú)顯著差異，同時(shí)高敏C反應(yīng)蛋白，MMP-9，TIMP-1以及新喋呤等炎癥因子在急性心梗組皆明顯升高，但與LP-PLA2的沒(méi)有明顯的相關(guān)性。

在對(duì)LP-PLA2的水平與冠脈病變支數(shù)的關(guān)系進(jìn)行分析后發(fā)現(xiàn):隨著病變支數(shù)增加，LP-PLA2水平逐步升高，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。多支病變患者的LP-PLA2水平明顯高于單支病變者，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。在病變支數(shù)相同時(shí)，各組間LP-PLA2的水平差異并無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。對(duì)反映冠脈狹窄程度和彌漫程度的Gensini積分進(jìn)行分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn):隨著冠脈病變的支數(shù)增加，LP-PLA2水平及Gensini積分呈現(xiàn)逐步升高趨勢(shì)，3支病變與單支病變差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。上述研究結(jié)果表明:LP-PLA2的水平與病變支數(shù)和管腔狹窄彌漫程度有密切關(guān)系，而與病變性質(zhì)穩(wěn)定與否并無(wú)明確關(guān)系，其原因可能與LPPLA2有直接促進(jìn)動(dòng)脈粥樣硬化的作用有關(guān)。

本研究中，AMI組LP-PLA2水平升高不明顯，可能是因?yàn)長(zhǎng)P-PLA2的水平與該組患者的冠脈病變支數(shù)和狹窄程度相關(guān)，而與斑塊破裂無(wú)關(guān)。業(yè)已證明［9-11］，急性心肌梗死患者的閉塞血管在斑塊破裂之前梗阻并不嚴(yán)重，65%的患者冠狀動(dòng)脈管腔狹窄直徑＜50%。這可能是急性心肌梗死組中LP-PLA2水平增高不明顯的原因。此外，急性心肌梗死組中單支病變的患者明顯多于其他兩組，而雙支病變以上的患者在穩(wěn)定性心絞痛和不穩(wěn)定性心絞痛中所占的比率皆明顯高于急性心肌梗死組。這也可能是急性心肌梗死組中LP-PLA2水平增高不明顯的原因之一。

LP-PLA2的水平與冠脈的病變支數(shù)有著密切關(guān)系，可以在一定程度上反應(yīng)了冠脈的狹窄程度。LPPLA2與冠脈粥樣硬化和斑塊穩(wěn)定與否的關(guān)系，仍需進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)評(píng)估。

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