高效液相色譜法測(cè)定小兒氨酚烷胺顆粒中對(duì)乙酰氨基酚的含量

閆海燕

(寶雞文理學(xué)院 陜西省植物化學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，陜西 寶雞 721013)

小兒氨酚烷胺顆粒是由對(duì)乙酰氨基酚、咖啡因、撲爾敏、人工牛黃等組成的復(fù)方制劑，常用于兒童傷風(fēng)感冒引起的鼻塞、咽喉痛、頭痛、發(fā)熱等[1，2]。其中主要成分對(duì)乙酰氨基酚含量測(cè)定的藥典方法不僅復(fù)雜且不夠準(zhǔn)確。在文獻(xiàn)[3，4]的基礎(chǔ)上，作者建立了一種快速檢測(cè)小兒氨酚烷胺顆粒中對(duì)乙酰氨基酚含量的高效液相色譜法，結(jié)果令人滿意。

1 實(shí)驗(yàn)

1.1 材料、試劑與儀器

小兒氨酚烷胺顆粒(批號(hào)為1008035、20100834、623136726100815)購(gòu)自藥店。

對(duì)乙酰氨基酚對(duì)照品(批號(hào)為100018-200408)，中國(guó)藥品生物制品檢定所；甲醇(色譜純)，美國(guó)Methanex公司；娃哈哈純水。

Agilent 1200型高效液相色譜儀(G1328B二級(jí)管陣列檢測(cè)器)，美國(guó)安捷倫公司；KQ5200E型超聲波清洗器，昆山市超聲儀器有限公司；DZF-1型電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱，上海一恒科學(xué)儀器有限公司；ME254S型電子天平，德國(guó)Sartorius公司；UV-2550型紫外分光光度計(jì)，日本島津公司。

1.2 對(duì)照品溶液的制備

精密稱取105 ℃干燥至恒重的對(duì)乙酰氨基酚對(duì)照品0.0146 g，置50 mL容量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，即為對(duì)照品溶液。

1.3 樣品溶液的制備

分別取3種批號(hào)的小兒氨酚烷胺顆粒6袋，研細(xì)，精密稱取1/6袋，置100 mL容量瓶中，用水稀釋至刻度，用微孔濾膜(0.45 μm)過(guò)濾，即為樣品溶液。

1.4 色譜條件

Eclipse XDB-C18色譜柱(4.6 mm×150 mm，5 μm)，流動(dòng)相為甲醇-水(40∶60)，流速1.0 mL · min-1，進(jìn)樣量20 μL，柱溫25 ℃，檢測(cè)波長(zhǎng)275 nm。

2 結(jié)果與討論

2.1 線性關(guān)系

分別量取對(duì)照品溶液1 mL、2 mL、3 mL、4 mL、5 mL，加入50 mL容量瓶中定容，定容后的濃度(μg·mL-1)分別為5.84、17.52、29.20、40.88、58.40，每次進(jìn)樣20 μL，得到色譜流出曲線。以對(duì)乙酰氨基酚濃度(μg · mL-1)為橫坐標(biāo)、峰面積為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，結(jié)果見(jiàn)圖1。

圖1 對(duì)乙酰氨基酚標(biāo)準(zhǔn)曲線

由圖1可知，對(duì)乙酰氨基酚濃度與峰面積在5.84～58.4 μg · mL-1范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。其擬合回歸方程為y=20.96x+0.8787，R2=0.9998。

2.2 精密度

取同一種對(duì)照品溶液(58.4 μg · mL-1)重復(fù)進(jìn)樣6次，每次20 μL，記錄峰面積，計(jì)算其RSD值為1.19%(n=6)，表明該方法精密度良好。

圖2 對(duì)乙酰氨基酚對(duì)照品(a)與樣品(b)的HPLC圖譜

2.3 重復(fù)性

分別取3種批號(hào)的樣品溶液按色譜條件重復(fù)進(jìn)樣3 次，記錄峰面積，計(jì)算其RSD值分別為0.71%、0.15%、0.38%(n=3)，表明該方法的重復(fù)性好。

2.4 穩(wěn)定性

分別取3種批號(hào)的樣品溶液，在0 h、1 h、2 h、3 h、4 h、5 h按色譜條件進(jìn)樣，記錄峰面積，計(jì)算其RSD值分別為2.87%、2.08%、1.31%(n=6)，表明樣品在5 h內(nèi)穩(wěn)定。

2.5 樣品測(cè)定

樣品溶液的HPLC譜圖見(jiàn)圖2。

由圖2可知，對(duì)乙酰氨基酚與其它組分分離較好，保留時(shí)間約為2.15 min。含量測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 3種樣品中對(duì)乙酰氨基酚的含量測(cè)定結(jié)果

2.6 加標(biāo)回收率

取已知含量樣品，加入對(duì)乙酰氨基酚對(duì)照品，進(jìn)行回收實(shí)驗(yàn)，結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 對(duì)乙酰氨基酚回收率測(cè)定結(jié)果

由表2可知，平均加標(biāo)回收率為103.3%，RSD為3.57%。

2.7 討論

嘗試用乙腈-水、甲醇-水(40∶60)、甲醇-水(20∶80)體系為流動(dòng)相，其中甲醇-水(40∶60)體系保留時(shí)間合適、分離度高、峰形對(duì)稱，故選定甲醇-水(40∶60)為該方法的流動(dòng)相。

3 結(jié)論

利用高效液相色譜法測(cè)定小兒氨酚烷胺顆粒中對(duì)乙酰氨基酚含量。對(duì)乙酰氨基酚濃度在5.84～58.4 μg · mL-1范圍內(nèi)與峰面積線性關(guān)系良好，回歸方程為y=20.96x+0.8787，R2=0.9998，平均加標(biāo)回收率為103.3%，RSD=3.57%。該方法快速、簡(jiǎn)便、結(jié)果可靠，可用于小兒氨酚烷胺顆粒中對(duì)乙酰氨基酚含量的測(cè)定。

[1] 姜紅，周希英，賈善學(xué).HPLC 法測(cè)定小兒速效感冒顆粒中對(duì)乙酰氨基酚和咖啡因的含量[J].山東醫(yī)藥工業(yè)，2002，21(5)：9-10.

[2] 孫桂榮，盧華偉，潘舒平.HPLC測(cè)定氨咖麻敏膠囊中各組分的含量[J].中國(guó)藥學(xué)雜志，2004，39(7)：542-544.

[3] 吳衛(wèi)濤.高效液相色譜法測(cè)定對(duì)乙酰氨基酚片的含量[J].中國(guó)醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2009，6(15)：52-53.

[4] 陳瑩，莫連峰，明娜，等.高效液相色譜法測(cè)定復(fù)方對(duì)乙酰氨基酚片的含量[J].海峽藥學(xué)，2007，19(7)：41-42.