微生態(tài)制劑對產(chǎn)蛋后期蛋雞飼料營養(yǎng)物質(zhì)消化率的影響

中國農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院 李笑櫻 范 彧 馬秋剛＊ 計(jì) 成動(dòng)物營養(yǎng)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室

北 京 市 畜 牧 獸 醫(yī) 總 站 陳 余 賈亞雄

首都師范大學(xué) 王曉霞

微生態(tài)制劑因其能改善畜禽胃腸道微生態(tài)平衡，提高畜禽對飼料養(yǎng)分的利用，增強(qiáng)機(jī)體免疫功能，且自身無毒、無抗藥性、無殘留、成本低，在一定程度上代替抗生素的使用已得到廣泛驗(yàn)證和認(rèn)同（辛娜等，2010）。其中，飼用芽孢桿菌和糞腸球菌，是國家允許使用的微生物飼料添加劑品種，已經(jīng)被廣泛應(yīng)用 （Cutting，2011；張民和刁其玉，2003）。本研究擬選用產(chǎn)蛋后期蛋雞作為試驗(yàn)動(dòng)物，以添加不同種類的微生態(tài)制劑作為試驗(yàn)因子，結(jié)合飼養(yǎng)試驗(yàn)，探明微生態(tài)制劑對產(chǎn)蛋后期雞飼料營養(yǎng)物質(zhì)消化率的影響，為芽孢桿菌和糞腸球菌微生態(tài)制劑在產(chǎn)蛋雞生產(chǎn)養(yǎng)殖中的實(shí)際應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料 糞腸球菌微生態(tài)制劑，由動(dòng)物營養(yǎng)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室研制，每克中糞腸球菌含量大于 1×1010個(gè)。

芽孢桿菌微生態(tài)制劑，由動(dòng)物營養(yǎng)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室研制，每克中地衣芽孢桿菌內(nèi)生芽孢大于1×1010個(gè)，枯草芽孢桿菌大于 1×1010個(gè)。

復(fù)合微生態(tài)制劑，由動(dòng)物營養(yǎng)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室研制，每克中地衣芽孢桿菌內(nèi)生芽孢大于1×1010個(gè)，枯草芽孢桿菌大于1×1010個(gè)，糞腸球菌含量大于 1×1010個(gè)。

1.2 試驗(yàn)動(dòng)物與設(shè)計(jì) 將96只50周齡左右且個(gè)體差異不顯著的健康海蘭褐產(chǎn)蛋后期蛋雞隨機(jī)分為成4個(gè)處理，每個(gè)處理8個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)3只。其中，對照組飼喂基礎(chǔ)日糧（玉米-豆粕-棉籽粕型日糧），不添加任何抗菌藥物或微生態(tài)制劑；其他3個(gè)試驗(yàn)組在基礎(chǔ)日糧基礎(chǔ)上分別添加0.01%糞腸球菌微生態(tài)制劑、0.02%芽孢桿菌微生態(tài)制劑、0.03%復(fù)合微生態(tài)制劑。試驗(yàn)預(yù)試期為30 d，預(yù)試期結(jié)束時(shí)，在雞只充分適應(yīng)日糧營養(yǎng)和表現(xiàn)最佳生產(chǎn)性能的基礎(chǔ)上，進(jìn)行代謝試驗(yàn)，用以測定各處理飼料能量、粗蛋白質(zhì)、干物質(zhì)、鈣、磷及氨基酸的利用效率。試雞自由采食和飲水。

1.3 試驗(yàn)日糧組成及營養(yǎng)水平 對照組為玉米-豆粕-棉籽粕型基礎(chǔ)日糧，其日糧組成及營養(yǎng)水平見表1。

1.4 樣品采集 采用4 mol/L鹽酸不溶灰分指示劑法，以重復(fù)為單位，連續(xù)3 d收集試雞的糞尿排泄物，去除毛、皮屑和雜物，每天的排泄物滴加4 mol/L鹽酸混勻，收好后立即置于-20℃下保存。將糞樣倒入平皿中在65℃烘箱干燥至恒重，置室內(nèi)回潮24 h，稱重、記錄，作為風(fēng)干糞重；粉碎、過40目篩；再將排泄物混合均勻，裝瓶封存并立即取樣，在100～105℃下測定其絕干糞重。

1.5 測定指標(biāo)

1.5.1 飼料和糞尿排泄物的總能 能量由中國農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物營養(yǎng)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室分析測試中心用全自動(dòng)氧彈測熱儀測定（國產(chǎn)）。

表1 試驗(yàn)日糧組成及營養(yǎng)水平

1.5.2 飼料和糞尿排泄物中粗蛋白質(zhì)含量 粗蛋白質(zhì)根據(jù)GB/T 6432-1994方法用凱氏定氮儀進(jìn)行測定。

1.5.3 飼料和糞尿排泄物酸不溶灰分和水分含量酸不溶灰分含量測定：樣品灰化后加入2 mol/L鹽酸煮沸，無灰濾紙過濾，熱水反復(fù)沖洗至無酸，試紙檢驗(yàn)，將殘?jiān)蜑V紙一并轉(zhuǎn)移到已知重量的坩堝中，再灰化稱重。水分采用GB/T 6435-2006方法測定。

1.5.4 鈣磷測定 鈣用GB/T 6436-2002中的乙胺四乙酸二鈉絡(luò)合滴定測定；磷用GB/T 6437-2002鉬黃分光光度法測定。

1.5.5 氨基酸測定 樣品經(jīng)過酸水解（6 mol/L鹽酸在110℃水解24 h）和氧化水解（蛋氨酸使用過氧甲酸進(jìn)行氧化）處理，使用氨基酸自動(dòng)分析儀（美國，HP）測定排泄物氨基酸 （色氨酸除外）含量。

以重復(fù)為單位計(jì)算微生態(tài)制劑芽孢桿菌和糞腸球菌對產(chǎn)蛋后期雞飼料表觀代謝能、干物質(zhì)表觀消化率、蛋白質(zhì)、鈣、磷及氨基酸的利用效率。各養(yǎng)分消化率計(jì)算公式如下：

養(yǎng) 分 表 觀 消 化 率/%＝100-（糞中養(yǎng)分含量×飼料中指示劑含量）/飼料中養(yǎng)分含量×糞中指示劑含量×100。

1.6 數(shù)據(jù)分析 運(yùn)用SAS 8.0軟件中GLM過程進(jìn)行方差分析，以P＜0.05為顯著水平，方差分析顯著者采用LSMEANS過程進(jìn)行多重比較，試驗(yàn)結(jié)果用平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 微生態(tài)制劑對蛋雞飼料中能量、蛋白質(zhì)、干物質(zhì)、鈣、磷表觀消化率的影響

由表2可知，0.02%芽孢桿菌組和0.03%復(fù)合微生態(tài)組表觀代謝能顯著高于對照組 （P＜0.05），分別提高 11.8%、13.6%。由此可知，0.02%芽孢桿菌組和0.03%復(fù)合微生態(tài)組可以顯著提高產(chǎn)蛋后期蛋雞飼料表觀代謝能。

表2 不同添加水平的微生態(tài)制劑對蛋雞營養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率的影響

0.02 %芽孢桿菌組和0.03%復(fù)合微生態(tài)組干物質(zhì)表觀消化率顯著高于對照組（P＜0.05），分別提高14.7%、17.7%；由此可知，0.02%芽孢桿菌組和0.03%復(fù)合微生態(tài)組可以顯著提高產(chǎn)蛋后期蛋雞飼料干物質(zhì)表觀消化率。

0.02 %芽孢桿菌組和0.03%復(fù)合微生態(tài)組蛋白質(zhì)表觀消化率顯著高于對照組（P＜0.05），分別提高35%、42.5%；試驗(yàn)組之間蛋白質(zhì)表觀消化率差異不顯著（P＞0.05）。

0.01 %糞腸球菌組、0.02%芽孢桿菌組和0.03%復(fù)合微生態(tài)組蛋雞鈣、磷表觀消化率均顯著高于對照組（P＜0.05）。與對照組相比，各試驗(yàn)組鈣表觀消化率分別提高19%、29.2%和30%，試驗(yàn)組之間差異不顯著（P>0.05）；試驗(yàn)組磷表觀消化率分別提高20.7%、28.0%和29.2%，試驗(yàn)組之間差異不顯著（P>0.05）。

2.2 微生態(tài)制劑對蛋雞飼料中氨基酸表觀消化率的影響 由表3可知，與對照組相比，0.03%復(fù)合微生態(tài)制劑組可以顯著提高天冬氨酸、絲氨酸、谷氨酸、蘇氨酸、精氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸、組氨酸、蛋氨酸、和半胱氨酸的表觀消化率（P＜0.05）；0.02%芽孢桿菌組可以顯著提高絲氨酸、谷氨酸、精氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸和半胱氨酸的表觀消化率（P＜0.05）；0.01%糞腸球菌組可以顯著提高精氨酸消化率、亮氨酸和半胱氨酸的表觀消化率（P ＜ 0.05）。

表3 不同添加水平的微生態(tài)制劑對氨基酸表觀消化率的影響 %

3 討論

在現(xiàn)代集約化飼養(yǎng)條件下，產(chǎn)蛋后期蛋雞日糧的主要成分是玉米、豆粕等。植物細(xì)胞壁中的植酸和纖維素等抗?fàn)I養(yǎng)物質(zhì)與蛋白質(zhì)和礦物元素等形成不溶復(fù)合物或絡(luò)合物，從而影響營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收?？?fàn)I養(yǎng)大分子物質(zhì)較難溶解于產(chǎn)蛋后期蛋雞分泌的消化液中，增加了消化道內(nèi)容物的粘稠度，縮短了飼料通過消化道的時(shí)間，同時(shí)使日糧中的營養(yǎng)物質(zhì)和機(jī)體分泌的內(nèi)源酶難以擴(kuò)散，并與消化酶作用降低酶活，導(dǎo)致營養(yǎng)物質(zhì)的利用率降低。而微生態(tài)制劑可通過提高固有的消化過程的效率或通過促進(jìn)原本不能消化的物質(zhì)的消化來改善食物利用率，從而提高動(dòng)物的生產(chǎn)性能（杜德偉，2006）。

本試驗(yàn)結(jié)果表明,添加0.01%糞腸球菌可以顯著提高蛋雞鈣、磷表觀消化率，與前人研究結(jié)果相同，同時(shí)可以顯著提高精氨酸、亮氨酸、半胱氨酸表觀消化率 （P＜0.05）。這可能是由于糞腸球菌屬于乳酸菌，分泌大量乳酸，降低了腸道內(nèi)容物的pH值，偏酸的環(huán)境有利于被結(jié)合或螯合的礦物元素以游離態(tài)釋放，從而提高了鈣、磷的利用率（杜晉平，2002）。同時(shí)通過產(chǎn)酸化環(huán)境，增加蛋白酶活性來參與蛋白質(zhì)代謝過程，促進(jìn)動(dòng)物生產(chǎn)和生長（張日俊等，2005）。武英等（2004）在試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，仔豬日糧中添加活菌制劑，一部分營養(yǎng)物質(zhì)消化率成分絕對值較高，但與對照組相比差異不顯著，這可能由于微生態(tài)制劑添加劑量不夠，效果不明顯。

本試驗(yàn)中，添加0.02%芽孢桿菌、0.03%復(fù)合微生態(tài)制劑可以分別顯著提高蛋雞日糧代謝能、干物質(zhì)、粗蛋白質(zhì)、鈣磷表觀消化率以及絲氨酸、谷氨酸、精氨酸等氨基酸表觀消化率 （P＜0.05）。這可能是芽孢桿菌代謝產(chǎn)生具有較強(qiáng)活性的蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶、果膠酶、葡聚糖酶、戊聚糖酶和纖維素酶等各種消化酶和促生長因子，可降解植物飼料中非淀粉多糖（Sogaard，1990），對植物性碳水化合物有較強(qiáng)的降解能力（Gomez-Gil等，1998），同時(shí)也可促進(jìn)降解動(dòng)物體內(nèi)的甘油三酯、蛋白質(zhì)、氨基酸等，增強(qiáng)對飼料養(yǎng)分的消化和吸收。同時(shí)，芽孢桿菌在其生長繁殖過程中能產(chǎn)生揮發(fā)性脂肪酸（VFA），降低動(dòng)物腸道的pH值，抑制腸內(nèi)病原菌的生長，促進(jìn)礦物質(zhì)吸收。這與他人的報(bào)道結(jié)果相一致，徐海燕等（2006）研究發(fā)現(xiàn)，芽孢桿菌發(fā)酵液中含有一定量的乙酸、丙酸、丁酸等有機(jī)酸，這些物質(zhì)可以降低腸道pH，起到促進(jìn)礦物質(zhì)吸收的作用。李俊波等（2009）的試驗(yàn)也證明，日糧中添加枯草芽孢桿菌制劑能顯著提高日糧粗蛋白質(zhì)和有機(jī)物消化率。也有研究表明，微生態(tài)制劑可以通過其產(chǎn)生糖化酶、蛋白酶、脂肪酶等的作用來促進(jìn)機(jī)體對營養(yǎng)成分的消化吸收。同時(shí)，微生態(tài)制劑可以影響小腸上皮細(xì)胞微絨毛中吸收酶的水平，調(diào)節(jié)營養(yǎng)吸收（Sogaard，1990）。 另外0.03%微生態(tài)制劑組中的主要菌種成分芽孢桿菌進(jìn)入腸道并萌發(fā)成有代謝活性的細(xì)胞，消耗腸道中的氧氣而有利于厭氧環(huán)境的形成，從而促進(jìn)糞腸球菌以及腸道內(nèi)乳酸菌的生長繁殖，降低腸道pH值，形成有利于提高消化酶活性和分泌量的腸道內(nèi)環(huán)境，同時(shí)芽孢桿菌也分泌各種酶類和生物活性物質(zhì)，共同加強(qiáng)機(jī)體對飼料中各種營養(yǎng)成分的消化吸收，提高飼料的利用率。

4 結(jié)論

本試驗(yàn)條件下，0.01%糞腸球菌、0.02%芽孢桿菌和0.03%復(fù)合微生態(tài)制劑可以顯著提高產(chǎn)蛋后期蛋雞日糧中鈣、磷表觀消化率和部分氨基酸表觀消化率；0.02%芽孢桿菌和0.03%復(fù)合微生態(tài)制劑可以顯著提高日糧代謝能和干物質(zhì)、粗蛋白質(zhì)、鈣、磷表觀消化率。

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