一種新型肺癌細(xì)胞表面蛋白-CDCP1在肺癌患者中的表達(dá)及意義

劉 銳,徐保鋒,王 清,何成彥

(1.吉林大學(xué)中日聯(lián)誼醫(yī)院內(nèi)分泌科,吉林長春130033;2.吉林大學(xué)第一醫(yī)院;3.吉林大學(xué)中日聯(lián)誼醫(yī)院檢驗(yàn)科)

肺癌發(fā)病率呈逐年上升趨勢,嚴(yán)重危協(xié)著人類健康。近年來,肺癌的診斷與綜合治療取得了很大進(jìn)展,但肺癌患者的生存率并未得到明顯提高,大部分患者最終死于局部復(fù)發(fā)或遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移。改善肺癌患者結(jié)局的一個重要方法是尋找確定腫瘤干細(xì)胞表型的標(biāo)志物。腫瘤干細(xì)胞是腫瘤復(fù)發(fā)的潛在源泉,并且是治療失敗的主要原因,針對腫瘤干細(xì)胞進(jìn)行治療有助與控制和消滅肺癌中微小殘存灶。含CUB結(jié)構(gòu)域蛋白(CUB domain-containing protein 1,CDCP1)是一種細(xì)胞表面糖蛋白。在體內(nèi)多種組織中的干細(xì)胞或前體細(xì)胞檢測到CDCP1表達(dá),如造血細(xì)胞干細(xì)胞/祖細(xì)胞、神經(jīng)祖細(xì)胞等。CDCP1是跨膜糖蛋白,其胞內(nèi)段可與細(xì)胞內(nèi)多種蛋白質(zhì)相互作用。最近研究發(fā)現(xiàn),某些惡性腫瘤細(xì)胞過度表達(dá)CDCP1。本研究檢測了肺癌組織和肺良性疾病組織中CDCP1表達(dá)情況,并分析CDCP1的表達(dá)與肺癌臨床病理特征之間的關(guān)系,期待為后續(xù)研究提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 組織標(biāo)本

收集吉林大學(xué)第一、三醫(yī)院56例手術(shù)肺癌患者肺組織標(biāo)本,均經(jīng)病理學(xué)檢查證實(shí)。其中男35例,女21例;年齡36.0-81.0歲,中位年齡62.5歲。根據(jù)國際抗癌聯(lián)盟(UICC)1997年修訂的TNM分期標(biāo)準(zhǔn)[1]分為Ⅰa期 5例,Ⅰb期 3例,Ⅱa期6例,Ⅱb期4例,Ⅲa7例,Ⅲb 11例,Ⅳ期20例;按組織學(xué)類型分為鱗狀細(xì)胞癌(簡稱鱗癌)10例,腺癌29例(包括黏液腺癌2例),大細(xì)胞癌8例(腺鱗癌以其主要部分分別計算在鱗癌或腺癌內(nèi)),小細(xì)胞肺癌9例。癌旁組織取自同一患者距腫塊邊緣5 cm以上的肺組織,共13例。所有病例術(shù)前均未接受過放療或化療等任何治療。另取同期15例肺良性疾病組織(包括支氣管擴(kuò)張2例,慢性支氣管炎2例,肺炎3例,肺結(jié)核3例,肺膿腫2例,炎性假瘤2例,肺血管畸形1例)作為對照組,男性7例,女性8例,年齡37.5-78.0歲,中位年齡60.5歲。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

(1)組織標(biāo)本處理與切片制備:組織標(biāo)本取材后固定于4%多聚甲醛,常規(guī)脫水,石蠟包埋,制備成5 μ m厚連續(xù)切片。

(2)免疫組化檢測按試劑盒說明書操作。

1.3 結(jié)果觀察

光鏡下觀察細(xì)胞膜或細(xì)胞膜/胞漿出現(xiàn)棕黃色或褐色顆粒,染色明顯高于背景為陽性。根據(jù)顯色深淺及陽性細(xì)胞百分率進(jìn)行半定量積分法分級。

1.4 統(tǒng)計學(xué)分析

以百分?jǐn)?shù)表示計數(shù)資料,采用 χ2檢驗(yàn)處理;以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)誤(Mean±S.E.M)表示計量資料,均數(shù)比較采用方差分析。將 P＜0.05設(shè)為顯著性差異的標(biāo)準(zhǔn)。

2 結(jié)果

2.1 CDCP1蛋白在肺組織中的表達(dá)

正常肺組織及肺良性病變中CDCP1低表達(dá)或未檢測到表達(dá);肺癌前病變15.4%弱陽性表達(dá);肺癌組織強(qiáng)陽性表達(dá)率達(dá)26.8%、弱陽性30.3%。見表1。

表1 CDCP1蛋白在肺組織的表達(dá)

2.2 CDCP1蛋白在肺癌組織中的表達(dá)與臨床病理特征的關(guān)系

56例不同組織學(xué)類型肺癌中CDCP1表達(dá)水平差別較大。CDCP1蛋白在34.48%肺腺癌表達(dá)強(qiáng)陽性,顯著高于肺鱗癌、大細(xì)胞肺癌、小細(xì)胞肺癌,(P＜0.05)。CDCP1的表達(dá)與病例年齡、性別無相關(guān)性,但與腫瘤病理分型、TMN分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等相關(guān),見表 2。

3 討論

自1985年以來,在世界范圍內(nèi),肺癌一直是癌癥死亡的最主要原因。非小細(xì)胞肺癌占所有肺癌病例的74%-85%,大約三分之二非小細(xì)胞肺癌病人在診斷時已是晚期。盡管肺癌的診斷和治療方法取得一定進(jìn)展,但肺癌的預(yù)后仍不樂觀,5年存活率為8%-16%。因此進(jìn)一步深入探討腫瘤發(fā)生、發(fā)展相關(guān)分子機(jī)制、建立有效的診斷、治療方法對促進(jìn)肺癌的預(yù)后是重要的。有研究認(rèn)為腫瘤由來源于單一克隆的異質(zhì)性細(xì)胞群體組成。最近研究表明一些細(xì)胞群體表達(dá)與腫瘤源性和腫瘤惡性程度有關(guān)的干細(xì)胞標(biāo)志物。到目前為止在癌癥病人僅證實(shí)幾種前體細(xì)胞/干細(xì)胞標(biāo)志物。其中CDCP1是一種新的受體型干細(xì)胞標(biāo)志物。CDCP1是一種跨膜糖蛋白,其胞外段在細(xì)胞與細(xì)胞相互作用中起重要作用,細(xì)胞內(nèi)酪氨酸殘基一旦磷酸化即被活化[2-7]。CDCP1也是骨髓和間充質(zhì)干/祖細(xì)胞和神經(jīng)祖細(xì)胞的獨(dú)立標(biāo)志物[8,9]。正常外周血中包括B和T細(xì)胞、單核細(xì)胞、粒細(xì)胞和紅細(xì)胞,未檢測到CDCP1表達(dá)[8]。

表2 肺癌中CDCP1表達(dá)與臨床病理生理特征關(guān)系

以往研究發(fā)現(xiàn),在多種惡性腫瘤中檢測到CDCP1過度表達(dá),其與癌細(xì)胞的增殖活性相關(guān)[10]。CDCP1保護(hù)細(xì)胞免于失巢凋亡現(xiàn)象的發(fā)生[11]。在腎細(xì)胞癌(RCC)檢測到CDCP1表達(dá)率達(dá)33.5%,CDCP1的表達(dá)與腫瘤分期、組織學(xué)等級和轉(zhuǎn)移等進(jìn)展性疾病指標(biāo)顯著相關(guān)。局限性腫瘤患者如果CDCP1表達(dá)增加,則其遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移發(fā)生率顯著增加,且存活期較短[12]。CDCP1高表達(dá)者總體存活率明顯降低。在幾種實(shí)體瘤包括結(jié)腸癌、腎癌、胰腺癌和乳腺癌中檢測到CDCP1 mRNA水平升高的[13、14]。但目前對于肺癌的研究進(jìn)行得較少。

我們通過免疫組織化學(xué)法分析了56例肺癌患者腫瘤組織中CDCP1的表達(dá),發(fā)現(xiàn)腫瘤組織中CDCP1表達(dá)陽性率明顯高于癌旁組織和癌前病變。這與已報道的CDCP1在乳腺癌、前列腺癌、結(jié)腸癌等惡性腫瘤中的表達(dá)情況基本一致。

鑒于現(xiàn)有研究尚無CDCP1與肺癌病理分型等臨床特征相關(guān)性的報道,本研究首先系統(tǒng)研究了CDCP1在不同臨床病理分型中表達(dá)情況及與其他臨床特征的相關(guān)性。實(shí)驗(yàn)中我們觀察到,56例不同組織學(xué)類型肺癌中CDCP1表達(dá)水平差別較大。CDCP1蛋白在34.48%肺腺癌表達(dá)強(qiáng)陽性,顯著高于肺鱗癌、大細(xì)胞肺癌、小細(xì)胞肺癌,(P＜0.05)。CDCP1的表達(dá)水平與表達(dá)率與病例年齡、性別無相關(guān)性,但與TMN分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等相關(guān)。此外,CDCP1在癌變中晚期的陽性率顯著高于癌癥早期,可能提示中晚期標(biāo)本中CDCP1陽性細(xì)胞占腫瘤細(xì)胞的比率增加。由于TMN分期是影響患者預(yù)后的主要因素,因此推測CDCP1表達(dá)增加,意味著腫瘤惡性程度高,提示患者預(yù)后不良。本研究結(jié)果也將為臨床尋找、建立新的預(yù)后因子提供有價值的線索。根據(jù)CDCP1的表達(dá)與臨床分期和組織學(xué)分型的相關(guān)性,我們推測CDCP1的過表達(dá)可能與肺癌癌變的病理變化有關(guān)。本研究中我們也發(fā)現(xiàn)部分肺良性病變、癌前病變存在低水平CDCP1表達(dá)。提示CDCP1為一種腫瘤相關(guān)抗原。但CDCP1能否作為肺癌腫瘤干細(xì)胞標(biāo)志物并具有臨床應(yīng)用價值還需進(jìn)一步研究和探討。

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