不同生長階段泰和烏骨雞體內(nèi)黑色素含量比較測定

潘 珂 黎觀紅 朱年華 瞿明仁 宋小珍

泰和烏骨雞又名中國泰和烏骨雞（Chinese Taihe Chicken),是江西省的一個珍貴地方品種。它因具有保健、美容、防癌三大功效，是我國傳統(tǒng)意義上公認的天然藥用雞種，且因具有特殊的藥用、營養(yǎng)及觀賞價值而受到中外學者所重視。2001年農(nóng)業(yè)部把泰和烏骨雞列為首批公布確定的11個國家級地方家禽保護品種之一，并曾搭乘“神州3號”宇宙飛船進行空間試驗。

烏骨雞在表型性狀上和普通雞最明顯的差異是體內(nèi)含有大量的黑色素。20世紀80年代以來，我國逐漸開展了對烏骨雞體內(nèi)化學成分的分析研究工作。徐幸蓮等(2000)和胡泗才等(1999)研究表明，泰和烏骨雞能夠顯著延長果蠅的平均壽命，并提高果蠅的性活力，顯著降低脂褐素的含量，具有一定的延緩衰老的作用。大量研究表明，泰和烏骨雞體內(nèi)的黑色素是滋補、強身健體、抗衰防老的物質(zhì)基礎，具有抗疲勞、調(diào)節(jié)機體平衡及抑制流感病毒誘導細胞凋亡的作用。烏骨雞黑色素大量沉積在皮膚、肌肉、骨膜及部分內(nèi)臟中。據(jù)《本草綱目》中記載：泰和烏雞的入藥效果與烏雞皮、骨、肉中的黑色素的深淺有關(guān)，“其顏色愈黑者，入藥愈佳”。因此研究泰和烏骨雞不同部位體內(nèi)黑色素含量有重要意義。

黑色素的形成是酪氨酸經(jīng)酪氨酸酶的作用，經(jīng)過一系列復雜的生物轉(zhuǎn)化反應而形成的，分真黑素、脫黑素和異黑素三大類。

隨著我國經(jīng)濟的發(fā)展，人民生活水平和需求的提高，泰和烏骨雞的藥用價值進一步凸顯。本試驗測定了相同營養(yǎng)水平下3個生長階段的泰和烏骨雞胸肌、腿肌和皮膚中黑色素含量，皆在為今后的生產(chǎn)實踐提供一定的理論參考數(shù)據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗動物及試驗設計

選用健康，無病，初生重相近的1日齡泰和烏骨雞 45 只，隨機分為 3 組，每組 15 只。試驗分 0～4、5～8、9～12周3個階段飼養(yǎng)。

1.2 日糧組成及營養(yǎng)水平

試驗日糧分 0～4、5～8、9～12 周齡 3 個階段。飼料原料營養(yǎng)價值參照《中國飼料數(shù)據(jù)庫》，基礎日糧營養(yǎng)水平參照前人研究結(jié)果設計。日糧組成及營養(yǎng)水平見表1。

1.3 飼養(yǎng)管理

試驗雞采取隨機分組,分3個階段飼養(yǎng)。讓雞自由飲水（前3 d飲水中加入0.01%高錳酸鉀）,自由采食，0～4周齡時用紅外燈24 h保溫，第1周育雛室室溫控制在34～35℃，以后每周下降2℃，5周后保持22～24℃ 。濕度保持在55%～65%。0～2周每日光照24 h，以后每周縮短2 h，6周齡以后改為正常日照時間。按照正常免疫程序進行免疫。飼養(yǎng)期內(nèi)對試驗雞添加抗蟲病的藥物。定期清理打掃雞舍衛(wèi)生并消毒，保持舍室衛(wèi)生。

表1 基礎日糧組成及營養(yǎng)水平

1.4 測定指標與方法

1.4.1 生長性能指標

平均日增重：正式試驗后，分別于第 0、2、4、6、8、10、12周末清晨喂料前空腹稱重，計算體增重。由末重與始重之差計算各組泰和烏骨雞的平均日增重。

平均日采食量：分別于試驗的第 2、4、6、8、10、12 周末早晨，稱量各組的飼料消耗量，計算各組試雞的日采食量。用投料量減去剩料量即得采食量，算出平均日采食量。

料重比：采食量/體增重。

1.4.2 樣本的采集與制備

試驗進行至第4、8和12周齡時，分別從每組中選2只平均體重接近的健康烏骨雞，于清晨空腹稱量后，立即放血宰殺，分別取胸肌、腿肌、全身皮膚，置－20℃冰箱中冷藏，待測。

1.4.3 黑色素含量的測定

黑色素的測定根據(jù)袁纓等鹽酸水解蛋白質(zhì)法并稍加改進。取出冰凍的胸肌，剔除其肌腱組織、雞毛及脂肪等，稱取一定重量，先用小剪刀剪碎，然后用組織搗碎機搗爛。稱取烏骨雞肌肉50.0 g,先用6 mol/l鹽酸溶液200 ml浸泡12 h，將浸泡過肌肉的200 ml鹽酸溶液棄去，將肉放入500 ml圓底燒瓶中再加6 mol/l HCl溶液400 ml,裝上冷凝管于100℃的水浴中加熱1 h，加熱完畢后，將圓底燒瓶內(nèi)的肌肉浸泡液用布氏漏斗抽濾，棄去濾液，保留濾渣。將濾渣用濾紙包好，置于索氏脂肪提取器中，用乙醚在42℃左右的水浴中脫脂，待索氏管中乙醚呈現(xiàn)出澄清狀態(tài)后，脫脂結(jié)束，再將濾紙包取出，在抽濾裝置上用蒸餾水反復洗滌多次，最后在80℃恒溫干燥箱中烘干,取出黑色素，稱重。

腿肌、皮膚黑色素含量的測定方法同上（皮膚在脫脂后，除用蒸餾水沖洗外還要用石油醚或氯仿反復洗脫2～3次）。

烏骨雞胸肌、腿肌、皮膚黑色素含量（占組織鮮重的百分比）計算公式如下：

黑色素含量(%)=黑色素重量(g)/樣本重量(g)×100

1.5 數(shù)據(jù)處理

對體重、平均日增重、平均日采食量結(jié)果以X±S.D.表示，試驗采用單因素方差分析法，利用SAS 8.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計分析。對黑色素結(jié)果采用F檢驗有重復的交叉二因子分析法，并用SSR法進行多重比較。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同生長階段泰和烏骨雞體重測定(見表2)

表2 泰和烏骨雞各生長階段體重測定（g）

從表2看出，泰和烏骨雞的體重隨著日齡的增加而增加，2周齡前生長緩慢，2周以后開始加速，8周齡后生長速度逐漸減慢，生長曲線呈現(xiàn)出先慢—后快—再慢的“S”型趨勢。其體重的增長趨勢符合泰和烏骨雞的生長規(guī)律。

2.2 平均日增重、平均日采食量、料重比(見表3)

表3 泰和烏骨雞日增重、日采食量及料重比

從表3看出，在8周齡以后雖然平均日采食量在增加但平均日增重卻逐漸減少，因此料重比明顯增加，這也進一步說明了它符合先慢—后快—再慢的生長規(guī)律。

2.3 同階段泰和烏骨雞不同組織黑色素含量的測定

從表4看出，同一生長階段，泰和烏骨雞體內(nèi)不同組織黑色素含量各不相同。在4周齡和8周齡時，泰和烏骨雞腿肌與皮膚中黑色素含量基本相同，要明顯高于胸肌中黑色素的含量。但在12周齡時皮膚中黑色素含量顯著下降，胸肌中黑色素含量與8周齡的黑色素含量基本保持不變，同周齡不同組織泰和烏骨雞黑色素含量差異不顯著（P＞0.05）。

2.4 不同階段泰和烏骨雞組織的黑色素含量的測定

從表4看出，無論是胸肌、腿肌還是皮膚，隨著日齡的增加黑色素含量都逐漸減少，但差異不顯著（P＞0.05）。

表4 泰和烏骨雞不同階段組織中黑色素含量測定（%）

3 討論

3.1 泰和烏骨雞的生產(chǎn)性能

泰和烏骨雞作為江西地方特色品種，成雞對環(huán)境的適應性較強，患病較少，但幼雛體小，體質(zhì)弱，抗逆性差。其生長速度相對較慢，但從不同生長階段的體重、日增重、日采食量、料重比的測定結(jié)果來看其生長符合先慢—后快—再慢的規(guī)律。

泰和烏骨雞內(nèi)含豐富的黑色素、蛋白質(zhì)、B族維生素等18種氨基酸和18種微量元素。其中維生素E、煙酸、磷、鉀、鐵的含量均高于普通雞肉。膽固醇和脂肪含量卻很低，是營養(yǎng)價值極高的滋補品。

3.2 同階段的泰和烏骨雞各組織中黑色素的影響

從試驗結(jié)果來看，同階段的泰和烏骨雞各組織中黑色素的含量為腿?。酒つw＞胸肌，這與耿拓宇等(2000)和Muroya等(2000)的研究結(jié)果一致，耿拓宇等研究發(fā)現(xiàn)，就個體而言，胸肌黑度明顯淡于腿肌。

黑色素的生成是黑素細胞的一個復雜生化過程,由酪氨酸經(jīng)酪氨酸酶的作用，經(jīng)過一系列復雜的生物轉(zhuǎn)化反應而形成。有許多因素影響其生成速度及種類，如體內(nèi)的各種激素、細胞因子、黑素細胞周圍環(huán)境的物理化學性質(zhì)改變均明顯影響黑色素的生物合成。

3.3 不同生長階段同組織中烏骨雞黑色素含量的變化

從試驗結(jié)果來看，隨著周齡的增加，泰和烏骨雞體內(nèi)黑色素含量逐漸減少，這也與耿拓宇等的研究結(jié)果一致，即隨著日齡的增大泰和烏骨雞體內(nèi)烏度變淺。這可能是黑色素轉(zhuǎn)氨酶的活性隨著日齡的增加而減弱造成的。同時，劉向萍等在對烏骨雞黑色素在體內(nèi)的沉積中發(fā)現(xiàn)：黑色素的沉積因年齡、性別有差異，不同日齡之間肝臟、頸部肌肉中黑色素差異極顯著（P＜0.01），腓骨、肌骨、龍骨、肉垂、皮膚羽區(qū)和氣管上沉積差異顯著（P＜0.05）。

試驗結(jié)果還顯示，對不同周齡的泰和烏骨雞黑色素含量的測定，腿肌中的黑色素含量均要高于皮膚，與胡泗才等的骨膜＞皮膚＞肌肉＞內(nèi)臟測定結(jié)果不盡相同。這是否是因品種差異造成了黑色素沉積部位的改變還需進一步探討。

總的來說，本試驗中得出同階段的泰和烏骨雞各組織中黑色素含量不同，同組織中不同生長階段泰和烏骨雞黑色素含量也不同，但它們差異都不顯著。但劉向萍等對泰和烏骨雞各組織器官黑色素沉積的研究發(fā)現(xiàn)泰和烏骨雞各組織器官黑色素沉積含量差異都顯著（P＜0.05）或極顯著（P＜0.01）。這可能是因為雞的品種不同和試驗誤差等造成的。

4 小結(jié)

隨著日齡的增加，無論是腿肌,還是皮膚和胸肌，泰和烏骨雞組織黑色素的含量逐漸減少。不同周齡的泰和烏骨雞各組織中黑色素含量不同，腿肌中的黑色素含量最高，皮膚次之，胸肌最少，但差異不顯著。

17篇，刊略，需者可函索）