蒙藥利咽消顆粒藥效的實(shí)驗(yàn)分析

魏 瑋

（中國(guó)人民解放軍第八一醫(yī)院，江蘇 南京 210002）

利咽消顆粒與傳統(tǒng)煎煮方法相比有著諸多優(yōu)勢(shì)，其含甘草苷、甘草酸、龍膽苦苷含量等方面效果顯著[1]。考慮到保證這種藥物在臨床上的實(shí)際效果，本次研究針對(duì)鎮(zhèn)咳、祛痰、抗炎、鎮(zhèn)痛等方面的情況進(jìn)行實(shí)驗(yàn)分析。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 藥物與試劑

利咽消顆粒：角叉菜膠，sigma公司出廠；冰乙酸選擇的批號(hào)為200871，氨水選擇的批號(hào)為200842，出廠于沈陽(yáng)東興化學(xué)試劑。鹽酸氨溴索片：選擇的批號(hào)為081216，出廠于山東羅欣藥業(yè)股份有限公司。阿司匹林選擇的批號(hào)為090301，出廠于吉林省銀河制藥廠。枸櫞酸噴托維林片（咳必清片）選擇的批號(hào)為20090408。酚紅：選擇沈陽(yáng)試劑三廠，批號(hào)為20050701。碳酸氫鈉：選擇出廠于天津市東麗區(qū)天大化學(xué)試劑廠，批號(hào)20061208。水則選用超純水。

1.2 實(shí)驗(yàn)儀器

上海菁華科技儀器有限公司提供的755B紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)；日本制造的AUW120D型島津電子天平，型號(hào)為T(mén)TL-2C型。Tel：北京同泰聯(lián)科技發(fā)展有限公司生產(chǎn)的超純水制備儀，成都泰盟科技有限公司生產(chǎn)的PV-200足趾容積測(cè)量?jī)x，成都泰盟科技有限公司出廠的光熱尾痛儀?；幢闭A生物儀器設(shè)備有限公司生產(chǎn)的ⅥS-BA多功能誘咳引喘儀。北京松源華興科技發(fā)展有限公司提供的LGJ-30原位冷凍干燥機(jī)。

1.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

動(dòng)物均由吉林大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供，Wistar大鼠，體質(zhì)量120～140g；ICR小鼠：體質(zhì)量18～22g。根據(jù)研究實(shí)驗(yàn)的不同需要，可結(jié)合實(shí)際情況作相應(yīng)的調(diào)整。

1.4 利咽消顆粒的制備

根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)的藥方組合比例選擇利咽消組方各藥粗粉（40～60目）混合，配合30倍水、用文火煎煮1次、煎煮時(shí)間持續(xù)15min。煎煮液3000r/min離心，使用上清液，利咽消冷凍干燥粉顆粒需經(jīng)過(guò)LGJ-30原位冷凍干燥機(jī)冷凍干燥獲得。

2 實(shí)驗(yàn)方法與結(jié)果

2.1 利咽消顆粒對(duì)濃氨水誘發(fā)小鼠咳嗽反應(yīng)的影響

取40只體質(zhì)量在18～20g的小鼠，雌雄平均，根據(jù)體質(zhì)量、性別將其平均分成4組，為模型組、咳必清組、利咽消顆粒低、高劑量組，每組10只。具體情況分別jg蒸餾水、咳必清混懸液12.5mg/kg、利咽消顆?；鞈乙?.80g/kg和4.0g/kg，Jg體積為0.2mL/10g。每天堅(jiān)持用藥1次，持續(xù)7d，在最后一次用藥的lh實(shí)施試驗(yàn)。把各小鼠逐漸放在YLSBA多功能誘咳引喘儀中，然后持續(xù)噴10s的濃氨水，對(duì)小鼠4min內(nèi)咳嗽次數(shù)和咳嗽潛伏期觀察記錄，每組同數(shù)據(jù)作t檢驗(yàn)。

實(shí)驗(yàn)表明，咳必清組、利咽消低劑量、高劑量組與空白對(duì)照組相比咳嗽潛伏期有顯著性差異（P＜0.05）；咳必清組、利咽消高劑量組與空白對(duì)照組比咳嗽次數(shù)有顯著性差異（P＜0.05）。見(jiàn)表1。

表1 利咽消對(duì)小鼠鎮(zhèn)咳作用的影響（±s，n=10）

表1 利咽消對(duì)小鼠鎮(zhèn)咳作用的影響（±s，n=10）

組別給藥量（g/kg）潛伏期（s）咳嗽次數(shù)空白對(duì)照組36.5±19.5311.5±5.14咳必清組0.0125119.43±102.984.43±4.08低劑量組0.890.88±59.0310.77±6.73底高劑量組4.0135.43±69.632.43±2.02

2.2 利咽消對(duì)小鼠酚紅祛痰實(shí)驗(yàn)

取40只體質(zhì)量在18～20g的小鼠，雌雄平均，根據(jù)性別、體質(zhì)量平均分成4組，每組10只，為對(duì)照組、利咽消顆粒低劑量組、利咽消顆粒高劑量組、鹽酸氨溴索組，逐漸采取jg蒸餾水，0.8g/kg利咽消顆?；鞈乙?、4.0g/kg利咽消混懸液、0.03g/kg鹽酸氨溴索混懸液，Jg體積為0.2m/10g，每天用1次藥，持續(xù)7d。實(shí)驗(yàn)之前對(duì)小鼠采取的措施主要是持續(xù)12h的禁食不禁水，最后一次用藥的1h后，在腹腔注射2.5%酚紅溶液0.25mL/10g，30min后脫頸殺死小鼠。找準(zhǔn)具體的位置后，將氣管實(shí)施分離，再把氣管周?chē)慕M織剝?nèi)?，把自甲狀軟骨下緣至支氣管分叉處的一段氣管剪下，將其裝置在3mL生理鹽水的試管里，接著配合0.1mL 5%碳酸氫鈉溶液，持續(xù)10min的超聲處理，離心1000r/min，經(jīng)過(guò)10min獲取粉紅色上清液，用分光光度計(jì)對(duì)吸光度測(cè)定，具體位置為546nm波長(zhǎng)處。祛痰指數(shù)=（給藥組0D-空白對(duì)照組OD）/空白對(duì)照組0D×100%。

實(shí)驗(yàn)表明，鹽酸氨溴索、利咽消低劑量組、利咽消高劑量組與空白對(duì)照組相比OD值有顯著性差異（P＜0.05）。鹽酸氨溴索組與利咽消低、高劑量組相比無(wú)顯著性差異（P＞0.05）。見(jiàn)表2。

表2 利咽消對(duì)小鼠的祛痰作用（氣管酚紅法） （±s，n=10）

表2 利咽消對(duì)小鼠的祛痰作用（氣管酚紅法） （±s，n=10）

組別給藥量（g/kg）OD值祛痰指數(shù)（%）空白對(duì)照組0.1025±0.043-鹽酸氨溴索組0.030.1455±0.03442低劑量組0.80.1534±0.05149.62高劑量組4.00.1623±0.02658.29

2.3 利咽消顆粒對(duì)冰乙酸致痛的影響和光照致痛的影響

取ICR 40只體質(zhì)量在18～22g的小鼠，雌雄平均，根據(jù)性別、體質(zhì)量將其分成4組。包括模型組、阿司匹林組，利咽消顆粒低、高劑量組，對(duì)各組根據(jù)實(shí)際情況采取jg蒸餾水、阿司匹林混懸液0.2g/kg、利咽消顆?；鞈乙?.8g/kg和4.0g/kg、jg體積均為0.2mL/10g，堅(jiān)持1天灌胃1次，持續(xù)jg 8d，第7天給藥30min后，腹腔注射冰乙酸，濃度0.6%，每只0.2mL致痛。對(duì)注射冰乙酸到引起扭體的時(shí)間即潛伏期以加以觀察，且對(duì)30min內(nèi)的扭體次數(shù)詳細(xì)記錄[2]。待8d后把將要接受的實(shí)驗(yàn)的老鼠放進(jìn)固定筒內(nèi)；將尾部顯示在外面，實(shí)驗(yàn)之前對(duì)鼠尾清理，通常用75%乙醇擦凈，把墨汁涂在尾部的下1/3處以作為記號(hào)。動(dòng)物在安靜狀態(tài)下把鼠尾光刺激點(diǎn)標(biāo)志賺到正對(duì)光照輻射處。再以“開(kāi)始”鍵啟動(dòng)之后完成操作，這時(shí)輻射燈則被點(diǎn)亮，利用紅外玻璃起到發(fā)熱效果；在鼠尾收到刺激后，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物則會(huì)快速甩動(dòng)尾巴，儀器自動(dòng)收集到各種不同的信息。

實(shí)驗(yàn)表明，阿司匹林組、利咽消低、高劑量組與空白對(duì)照組相比小鼠扭體的潛伏期及扭體次數(shù)有顯著性差異P＜0.05。光照甩尾時(shí)間沒(méi)有明顯變化。見(jiàn)表3。

3 討 論

表3 利咽消冰乙酸扭體和光照甩尾結(jié)果（χ±s，n=10）

對(duì)于呼吸道感染、急慢性支氣管炎來(lái)說(shuō)，咳嗽、痰多、氣喘是最為多見(jiàn)的癥狀。對(duì)鎮(zhèn)咳祛痰藥物作用的研究主要依賴(lài)于小鼠氣管酚紅排泌法、呼吸道纖毛運(yùn)動(dòng)實(shí)驗(yàn)法、毛細(xì)玻璃管排痰法等，刺激感受器和傳入神經(jīng)是主要誘咳的方法[3]。此次選擇的是濃氨水誘咳、小鼠氣管酚紅排泌法、冰乙酸扭體、光照甩尾等，從客觀地角度分析利咽消顆粒鎮(zhèn)咳、祛痰、鎮(zhèn)痛作用。

利咽消顆粒組使用的藥物為北沙參、甘草等，作用效果集中在清熱、止咳、祛痰等方面，對(duì)上呼吸道感染造成的咳嗽、咽痛、咳痰效果顯著。此次發(fā)現(xiàn)利咽消低劑量、高劑量組對(duì)濃氨水引起咳嗽潛伏期有延遲作用，高劑量組的咳嗽次數(shù)較少，與空白對(duì)照組比差異顯著。利咽消低劑量組和利咽消高劑量組可提高小鼠腹腔注射酚紅后造成的小鼠氣管酚紅排泌量，與空白對(duì)照組對(duì)比差異顯著。利咽消低、高劑量組使得冰乙酸引起小鼠扭體的潛伏期延長(zhǎng)，降低了扭體次數(shù)，與空白對(duì)照組比較差異顯著（P＜0.05）。

總之，利咽消顆粒的功效集中為鎮(zhèn)咳、祛痰、鎮(zhèn)痛作用，這就為醫(yī)藥學(xué)的研究創(chuàng)造了良好的條件。

[1] 徐叔云.藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)[M].3版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2006:882.

[2] 李國(guó)信,齊越,秦文艷,等.射干提取物止咳祛痰藥理實(shí)驗(yàn)研究[J].實(shí)用中醫(yī)內(nèi)科雜志,2008,22(2):3-4.

[3] 馬四補(bǔ),李開(kāi)斌,隋艷華,等.三拗膠囊止咳、化痰、平喘作用的實(shí)驗(yàn)研究[J].貴陽(yáng)中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2008,30(5):74-76.