4種免洗手消毒劑的消毒效果及毒性的觀察

趙偉霞 胡俊明 王曉華

（1 中國(guó)疾病預(yù)防控制中心環(huán)境與健康相關(guān)產(chǎn)品安全所，北京 100021；2 鄭州煙草研究院，河南 鄭州450001）

近些年來(lái)，一些傳染性疾病的增多及臨床上醫(yī)院內(nèi)感染的嚴(yán)重性[1]，對(duì)手消毒要求也日益嚴(yán)峻。因此，一些對(duì)手消毒有效而又無(wú)毒性的消毒劑的需求旺盛。選擇安全有效的手部消毒劑是提高醫(yī)務(wù)人員手部衛(wèi)生的有效措施之一。本文對(duì)常見(jiàn)的醇類及季銨鹽類消毒劑對(duì)其殺菌效果和毒性進(jìn)行了試驗(yàn)，其結(jié)果如下。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 4 種免洗手消毒劑：第1種消毒劑主要?dú)⒕煞譃?4.1%的乙醇，第2種主要成分為65.25%的乙醇，第3種為3.08%雙氯苯雙胍己烷葡萄糖酸鹽，第4種為0.496%雙氯苯雙胍己烷葡萄糖酸鹽。4種消毒劑均為復(fù)方消毒劑。

1.1.2 實(shí)驗(yàn)菌株：金黃色葡萄球菌ATCC6538、大腸桿菌8099、銅綠假單孢菌ATCC15442、白色念珠菌ATCC10231。

1.1.3 現(xiàn)場(chǎng)受試人：隨機(jī)選定受試者30人次。

1.1.4 ICR種清潔級(jí)小鼠：由中國(guó)藥品生物制品檢定所實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。

1.1.5 新西蘭家兔：由北京科宇動(dòng)物養(yǎng)殖中心提供.

1.2 方法

1.2.1 染菌用菌懸液制備：將試驗(yàn)菌用TBS營(yíng)養(yǎng)肉湯配制成108cfu/mL，取10μL滴加于載體布片上，使其最終濃度達(dá)到5×105～5×106cfu/片。

1.2.2 手消毒劑作用液的配制：用無(wú)菌硬水配制成所需作用濃度后置于（20±1）℃水浴備用。

1.2.3 中和劑鑒定試驗(yàn)：兩種乙醇消毒劑用0.3%卵磷脂、3%吐溫80的0.03mol/L PBS作為中和劑，兩種季銨鹽類的消毒劑用1%卵磷脂、5%吐溫80的0.03mol/L PBS，試驗(yàn)菌株為金黃色葡萄球菌和白色念珠菌，試驗(yàn)用水浴溫度控制在（20±1）℃。平行試驗(yàn)6組。要求第1組無(wú)菌生長(zhǎng)或者極少數(shù)試驗(yàn)菌落生長(zhǎng)，第2組有較第1組為多但較第3、4組少，或第2組與第1組菌落數(shù)相近都無(wú)菌生長(zhǎng)，第3、4、5組有相似量試驗(yàn)菌生長(zhǎng)但組間菌落數(shù)誤差率不超過(guò)15%，第6組無(wú)菌生長(zhǎng)。連續(xù)3次試驗(yàn)合格則表明中和劑適宜。

1.2.4 載體浸泡定量殺菌試驗(yàn)：取無(wú)菌平皿，按每片5.0mL的量，吸取相應(yīng)濃度消毒劑注入平皿，置于（20±1）℃水浴中5min后，用無(wú)菌鑷子分別放入預(yù)先制備的菌片3片，使之浸透于消毒液中，作用至預(yù)定時(shí)間，用無(wú)菌鑷子將菌片取出分別移入含5.0mL中和劑試管中，用電動(dòng)混合器混合20s，使菌片上的細(xì)菌倍洗脫進(jìn)入中和液中，再放置5min以上，進(jìn)一步混勻后吸取1.0mL直接接種平皿，每管接種2個(gè)平皿，計(jì)活菌數(shù)，同時(shí)用稀釋液代替消毒液，進(jìn)行平行試驗(yàn)，作為陽(yáng)性對(duì)照。所有試驗(yàn)樣本均在37℃恒溫箱中培養(yǎng)，金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、銅綠假單孢菌培養(yǎng)48h觀察結(jié)果，白色念珠菌培養(yǎng)72h觀察結(jié)果。試驗(yàn)重復(fù)3次，計(jì)算殺滅對(duì)數(shù)值。

1.2.5 隨機(jī)選擇30人次志愿者，在受試者雙手充分搓擦后，受試者左手指并攏于曲面用無(wú)菌棉拭從指尖至指跟往返涂擦2遍，將棉拭采樣端剪入中和劑試管內(nèi)，作為陽(yáng)性對(duì)照。然后根據(jù)說(shuō)明書(shū)使用方法把消毒劑加于右手上，作用1min，以同樣的方法采樣，作為試驗(yàn)樣本。

1.2.6 急性經(jīng)口毒性試驗(yàn)：采用Horn氏法，選用ICR種小鼠，清潔級(jí)，體質(zhì)量18～22g。設(shè)2150、4640、10000和21500mg/kg體質(zhì)量4個(gè)劑量組，每個(gè)劑量組10只動(dòng)物，雌雄各半。用樣品原液經(jīng)口灌胃染毒。經(jīng)口灌胃的量0.2mL/10g體質(zhì)量。連續(xù)觀察14d，記錄動(dòng)物中毒表現(xiàn)及思維情況，計(jì)算LD50。

1.2.7 皮膚多次刺激試驗(yàn)：選取4只新西蘭種家兔，雄性，體質(zhì)量為2.5～3.0kg。試驗(yàn)前24h把家兔脊柱兩側(cè)被毛剪掉，去毛范圍左右各約3cm×3cm。正式試驗(yàn)時(shí)，將受試物原液0.5mL涂抹在側(cè)皮膚上，右側(cè)皮膚作為對(duì)照。在涂抹后4h，除去殘留受試物。每天涂抹一次連續(xù)14d。在每次涂抹24h觀察涂抹部位并進(jìn)行皮膚刺激反應(yīng)評(píng)分，評(píng)價(jià)皮膚刺激強(qiáng)度。

表1 4種消毒劑中和劑鑒定試驗(yàn)結(jié)果

表2 4種消毒劑中和劑鑒定（和原液稀釋后）試驗(yàn)結(jié)果

表3 4種消毒劑對(duì)細(xì)菌的殺滅效果及陽(yáng)性對(duì)照結(jié)果

2 結(jié) 果

2.1 中和劑試驗(yàn)結(jié)果

經(jīng)試驗(yàn)篩選，各組中和劑可有效中和手消毒劑對(duì)試驗(yàn)菌的殘留作用，并且中和劑對(duì)培養(yǎng)基和相應(yīng)作用細(xì)菌均無(wú)不良影響（表1）。4種消毒劑中和劑鑒定（和原液稀釋后）試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表2。

2.2 殺菌試驗(yàn)結(jié)果

結(jié)果表明，這幾種手消毒劑樣品原液的作用液在0.5、1.0、1.5min的作用時(shí)間下，殺滅對(duì)數(shù)值均達(dá)到了3以上，符合殺菌要求（表3）。

2.3 手現(xiàn)場(chǎng)試驗(yàn)

每種消毒劑進(jìn)行30人次的手現(xiàn)場(chǎng)試驗(yàn)，其自然菌的降低對(duì)數(shù)值均＞1。結(jié)果見(jiàn)表4。

表4 4種手消毒劑的手現(xiàn)場(chǎng)試驗(yàn)結(jié)果

2.4 急性經(jīng)口毒性試驗(yàn)結(jié)果

在觀察期內(nèi)，各計(jì)量組均未出現(xiàn)出現(xiàn)明顯的中毒癥狀，無(wú)動(dòng)物死亡。該4種消毒劑對(duì)雌雄性小鼠經(jīng)口毒性LD50＞5000mg/kg體質(zhì)量，屬于實(shí)際無(wú)毒級(jí)。

2.5 皮膚多次刺激試驗(yàn)結(jié)果

受試動(dòng)物局部皮膚在觀察期內(nèi)無(wú)紅斑、水腫出現(xiàn)，對(duì)動(dòng)物皮膚刺激指數(shù)為0，刺激強(qiáng)度級(jí)別為無(wú)刺激性。

3 討 論

大量流行病學(xué)調(diào)查證實(shí)，手是醫(yī)院感染的重要途徑[2]。據(jù)調(diào)查顯示，醫(yī)務(wù)人員因洗手不徹底，導(dǎo)致細(xì)菌傳播而造成感染者占醫(yī)院感染發(fā)生率的30%[3]。因此，醫(yī)務(wù)人員的手在預(yù)防醫(yī)院內(nèi)感染的地位已越來(lái)越受業(yè)內(nèi)人士的關(guān)注，若不注意手部衛(wèi)生會(huì)造成醫(yī)院內(nèi)感染[1]。如醫(yī)務(wù)人員每天堅(jiān)持高質(zhì)量的洗手則可使手部的細(xì)菌減少60%～90%[4]，并使醫(yī)院感染發(fā)生率降低25%～50%[5]。雖然多數(shù)護(hù)理人員知道洗手指征和原則，但能始終堅(jiān)持正確洗手的較少，常常在完成整個(gè)病區(qū)護(hù)理操作后才洗手，經(jīng)常忽略在兩名患者治療護(hù)理之間洗手，原因可能是工作緊張、洗手設(shè)施不足或不方便、對(duì)洗手的意義認(rèn)識(shí)不足，也存在怕?lián)p傷皮膚的問(wèn)題。

調(diào)查發(fā)現(xiàn)，含植物殺菌成分的洗手液抑菌效果比較差，現(xiàn)場(chǎng)洗手消毒試驗(yàn)結(jié)果對(duì)手上自然菌平均消除對(duì)數(shù)指僅為0.84，達(dá)不到消毒效果。本次研究的免洗手消毒劑，消毒效果好，殺滅速度快，可用在無(wú)水的情況下直接涂擦起到洗手和手部消毒的效果，動(dòng)物試驗(yàn)屬無(wú)毒并且無(wú)刺激性。上述消毒劑更適合無(wú)水情況下洗手消毒，為洗手不便或設(shè)施不健全的醫(yī)療機(jī)構(gòu)的首選。

[1] 任淑華.手部衛(wèi)生與醫(yī)院內(nèi)感染的預(yù)防[J].中國(guó)預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志,2006,7(5):487-489.

[2] 姜樸,桑海軍,唐非.醫(yī)院抗菌洗手液使用狀況及抑菌效果觀察[J].中國(guó)消毒學(xué)雜志,2008,25(5):479.

[3] 田小風(fēng),雷國(guó)華,趙希鵬,等.醫(yī)院感染管理的調(diào)查及對(duì)策[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志,1995,5(2):108.

[4] 尚少梅,王宜芝,鄭修霞,等.促進(jìn)護(hù)理人員洗手行為一次性研究[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志,2003,13(6):507-510.

[5] 尚少梅,黃慶,府偉靈,等.手衛(wèi)生所致醫(yī)院感染的預(yù)防和控制措施的探討[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志,2005,15(4):426-428.