兩個(gè)不同廠家試劑盒檢測(cè)EB病毒EA-IgA、VCA-IgA的比較

羅玲 曾樺 羅曉紅

EB病毒(Epstein-Barr)感染與鼻咽癌等人類惡性疾病的發(fā)生密切相關(guān)，對(duì)診斷鼻咽癌有較高的特異性。定性檢測(cè)血清中EB病毒抗體已成為早期診斷鼻咽癌的有力工具。近年來隨著免疫分析技術(shù)的發(fā)展，國(guó)內(nèi)外已廣泛采用ELISA法檢測(cè)EB病毒抗體用于鼻咽癌的診斷和篩查。本文就兩個(gè)不同廠家的試劑盒在檢測(cè)EB病毒EA-IgA、VCA-IgA的臨床價(jià)值進(jìn)行比較。

1 資料與方法

1.1 標(biāo)本來源 收集本院2010年1月1日至2010年12月31日在門診和住院部經(jīng)病理檢查確診為鼻咽癌的患者的血清標(biāo)本184例，另外本院同期健康體檢者的血清標(biāo)本184例，年齡為25～65歲。

1.2 試劑

1.2.1 國(guó)內(nèi)IBL公司生產(chǎn)的EB病毒EA-IgA試劑，批號(hào):EAA-158;VCA-IgA試劑，批號(hào):EBA-193。

1.2.2 德國(guó)歐蒙公司生產(chǎn)的EB病毒EA-IgA試劑，批號(hào):E100708BO;VCA-IgA試劑，批號(hào):E100909AR。兩個(gè)廠家的試劑均在有效期內(nèi)使用。

1.3 儀器 MULTISKAN MK3酶標(biāo)儀(芬蘭雷勃)，HHB型電熱恒溫溫育箱(廣州)等。

1.4 方法 實(shí)驗(yàn)操作嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行，常規(guī)條件下進(jìn)行測(cè)定。對(duì)于檢測(cè)結(jié)果不一致的樣本，則需要結(jié)合留樣樣本原來的病理及臨床診斷結(jié)果作為金標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行判斷，如果臨床留樣前病理檢測(cè)結(jié)果為陽性，或者臨床診斷為鼻咽癌，則樣本判為真陽性(實(shí)驗(yàn)試劑陽性時(shí))，或者假陰性(實(shí)驗(yàn)試劑陰性時(shí));如果臨床留樣前病理檢測(cè)結(jié)果為陰性，則判為真陰性(實(shí)驗(yàn)試劑陰性時(shí))，或者假陽性(實(shí)驗(yàn)試劑陽性時(shí))。對(duì)比兩個(gè)廠家試劑的檢測(cè)結(jié)果，比較分析兩種試劑的陽性符合率，陰性符合率以及總體符合率，采用卡帕檢驗(yàn)，驗(yàn)證方法的一致性。卡帕檢驗(yàn)采用Cohen氏法。當(dāng)卡帕值為0.4～0.7 h，兩種方法具有高度一致性;當(dāng)卡帕＞0.75時(shí)，兩種方法具有極端的一致性。

2 結(jié)果

2.1 兩個(gè)試劑盒檢測(cè)結(jié)果與臨床病理檢測(cè)結(jié)果比較 歐蒙試劑檢測(cè)EA-IgA的診斷效率為73.91%，IBL試劑檢測(cè)EAIgA的診斷效率為74.18%。歐蒙試劑檢測(cè)VCA-IgA的診斷效率為76.09%，IBL試劑檢測(cè) VCA-IgA的診斷效率為81.25%。兩者比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，見表1和表2。

表1 歐蒙試劑與IBL試劑對(duì)EA-IgA的檢測(cè)結(jié)果(例，%)

表2 歐蒙試劑與IBL試劑對(duì)VCA-IgA的檢測(cè)結(jié)果

2.2 IBL試劑與歐蒙試劑的符合率統(tǒng)計(jì)

2.2.1 IBL試劑與歐蒙試劑檢測(cè)EA-IgA的對(duì)比陽性符合率為66.07%;陰性符合率為89.45%;總符合率為82.34%。Kappa值=0.57，說明此兩個(gè)試劑盒在驗(yàn)證EA-IgA時(shí)，具有高度一致性。見表3

表3 IBL試劑與歐蒙試劑檢測(cè)EA-IgA的對(duì)比

2.2.2 IBL試劑與歐蒙試劑檢測(cè)VCA-IgA的對(duì)比 陽性符合率為67.57%;陰性符合率為99.32%;總符合率為80.16%。Kappa值=0.62，說明此兩個(gè)試劑盒在驗(yàn)證VCA-IgA時(shí)，具有高度一致性。見表4

表4 IBL試劑與歐蒙試劑檢測(cè)VCA-IgA的對(duì)比

3 討論

EB病毒(Eostein-Barr virus，EBV)是1964年Epstein和Barr在研究非洲兒童的惡性淋巴瘤時(shí)，從瘤細(xì)胞培養(yǎng)中發(fā)現(xiàn)的一種嗜人類B淋巴細(xì)胞的γ皰疹病毒，能夠在B淋巴細(xì)胞中建立起隱性感染，刺激細(xì)胞的增生與轉(zhuǎn)化，基因組全長(zhǎng)184 kb。目前可感染人類的EBV有兩種亞型:EBV-1和EBV-2，其區(qū)別在于編碼核抗原的基因構(gòu)成不同。EBV可引起兩種不同類型的感染，一種是增殖性感染，另一種是非增殖性感染，在一定條件下或某些誘導(dǎo)因子的作用下，潛伏的EBV基因組可被激活而轉(zhuǎn)化為增殖性感染［1］。被病毒感染的細(xì)胞可產(chǎn)生各種抗原，能刺激機(jī)體產(chǎn)生相應(yīng)的抗體，EB病毒的抗原成分有:EB病毒核抗原(EBNA)、早期抗原(EA)和晚期抗原等，病毒的晚期抗原主要有組成病毒核衣殼的病毒衣殼抗原(VCA)、淋巴細(xì)胞識(shí)別病毒靶抗原(YDMA)和病毒的晚期膜抗原(MA)。EB病毒引發(fā)了全球癌癥的1%，并占所有感染性癌癥的5.6%，根據(jù)國(guó)際癌癥研究署對(duì)致癌因子的分類標(biāo)準(zhǔn)，EB病毒被列在第一組致癌因子中。EBV感染與多種人類腫瘤發(fā)生相關(guān)，包括鼻咽癌(NPC)、伯基特淋巴瘤、霍奇金淋巴瘤、胃癌等，NPC與Burkitt淋巴瘤的發(fā)生具有明顯的地區(qū)限制，據(jù)WHO統(tǒng)計(jì)，大約80%的NPC發(fā)生在中國(guó)［2］。

大量研究已證明:EB病毒與鼻咽癌關(guān)系密切，EB病毒VCA-IgA抗體可出現(xiàn)于鼻咽癌確診前4～46個(gè)月，VCA-IgA抗體陽性鼻咽癌發(fā)生率是抗體陰性發(fā)生率的111.5倍，通過免疫酶法檢測(cè)人群血清EB病毒VCA-IgA高危人群，對(duì)鼻咽癌的早期診斷有重要意義，目前常規(guī)應(yīng)用的EB病毒血清學(xué)檢查項(xiàng)目VCA-IgA和EA-IgA仍是鼻咽癌患者臨床篩查、輔助診斷以及判斷的療效的觀察指標(biāo)［3］。對(duì)于就診的患者及時(shí)、準(zhǔn)確地作出病原學(xué)診斷，就可以為臨床醫(yī)生提供診治依據(jù)，及時(shí)采取治療措施保證患者健康。

目前很多醫(yī)院采用進(jìn)口的德國(guó)歐蒙公司生產(chǎn)的試劑來進(jìn)行EA-IgA和VCA-IgA抗體檢測(cè)，但進(jìn)口試劑價(jià)格較貴，我們用國(guó)內(nèi)IBL公司生產(chǎn)的試劑和進(jìn)口試劑比較，從實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)可知，德國(guó)歐蒙公司生產(chǎn)的EA-IgA和VCA-IgA試劑對(duì)NPC的診斷效率與國(guó)內(nèi)IBL公司生產(chǎn)的EA-IgA和VCA-IgA試劑的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。兩個(gè)廠家生產(chǎn)的試劑盒檢測(cè)的符合率比較，在分別驗(yàn)證EA-IgA和VCA-IgA時(shí)，Kappa值分別為0.57和0.62，具有高度一致性?？梢哉J(rèn)為，國(guó)內(nèi)IBL公司生產(chǎn)的EA-IgA和VCA-IgA試劑盒可以和進(jìn)口的德國(guó)歐蒙公司生產(chǎn)的試劑盒相媲美，符合臨床要求，能較好的檢測(cè)EB病毒感染者血清中的IgA抗體，起到輔助臨床診斷鼻咽癌的作用。而且國(guó)產(chǎn)試劑的價(jià)格比進(jìn)口試劑便宜，可以代替進(jìn)口試劑進(jìn)行臨床應(yīng)用。

［1］劉勇，楊海玉，路名芝.EB病毒與腫瘤的關(guān)系.江西醫(yī)藥，2007，42(4):354-355.

［2］陳莉，朱遠(yuǎn)源.腫瘤研究的新熱點(diǎn)-EB病毒.腫瘤防治研究，2008，35(10):750-754.

［3］唐國(guó)全，周向陽，陽茂春.EB病毒IgA滴度在鼻咽癌診斷的敏感性和特異性.廣西醫(yī)學(xué)，2008，30(6):831-832.