高效液相色譜法測定替米沙坦膠囊中替米沙坦含量

林杭娟

(浙江省寧波市中醫(yī)院藥劑科，浙江 寧波 315010)

替米沙坦(telmisartan)屬血管緊張素Ⅱ受體(AT1)拮抗劑，可選擇性地、難以逆轉(zhuǎn)地阻滯AT1受體，而對其他受體尤其是心血管系統(tǒng)的受體無影響，從而阻斷血管緊張素Ⅱ引起的血管收縮和醛固酮分泌[1-3]。替米沙坦膠囊原由德國Boe-hringer Ingelheim公司開發(fā)，我國自行研制的替米沙坦膠囊屬于國家Ⅱ類新藥。為了對該制劑進(jìn)行質(zhì)量控制，筆者采用反相高效液相色譜法測定其中替米沙坦含量，效果滿意，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 儀器與試藥

Aglient 1200型高效液相色譜系統(tǒng)(美國安捷倫科技有限公司)，配備G1322A在線脫氣機(jī)、G1311A四元梯度泵、G1329A自動(dòng)進(jìn)樣儀、G1316A柱溫箱、Aglient色譜工作站。替米沙坦對照品(天津一方科技有限公司，含量98%以上，批號為713-200908);替米沙坦膠囊(江蘇康緣藥業(yè)股份有限公司，批號為20100713);乙腈(色譜純)，其他試劑為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)

色譜柱:依利特 C18柱(200 mm×4.6 mm，5 μm);流動(dòng)相:乙腈 -水 -冰醋酸(45∶55 ∶0.1)混合液;柱溫:30℃;流速:1.0 mL/min;檢測波長:242 nm;進(jìn)樣量:20 μL。在此條件下，色譜圖見圖1。

圖1 高效液相色譜圖

2.2 溶液制備

精密稱取替米沙坦對照品適量，以流動(dòng)相配制成含替米沙坦0.5 g/L的對照品溶液。精密稱取替米沙坦膠囊內(nèi)容物適量(約相當(dāng)于替米沙坦10 mg)，置100 mL容量瓶中，加流動(dòng)相適量，超聲使溶解，定容，搖勻，濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液。按處方比例稱取除主藥外的輔料，照供試品溶液同法制備陰性對照品溶液。

2.3 方法學(xué)考察

線性關(guān)系考察:精密吸取對照品溶液 0.2，0.4，0.8，1.0，1.2，1.4，1.6 mL，分別置5 mL容量瓶中，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻。取每個(gè)質(zhì)量濃度的稀釋液20 μL進(jìn)樣，記錄色譜圖。以峰面積(A)為縱坐標(biāo)、質(zhì)量濃度(C)為橫坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸，回歸方程為 A=7.15×105C-2.17×104，r=0.999 8(n=7)。結(jié)果表明，替米沙坦質(zhì)量濃度在20～160 μg/mL范圍內(nèi)與峰面積呈良好的線性關(guān)系。

精密度試驗(yàn):配置低、中、高 3 種質(zhì)量濃度(60，100，140 μg/mL)的對照品溶液，于同日內(nèi)測定3次，結(jié)果低、中、高3種質(zhì)量濃度的日內(nèi) RSD分別為0.41%，0.35%，0.47%(n=3);連續(xù)測定3 d，結(jié)果低、中、高3種質(zhì)量濃度的日間 RSD分別為0.56%，0.76%，0.81%(n=3)。結(jié)果表明，方法精密度良好。

穩(wěn)定性試驗(yàn):取同一供試品溶液，分別于 0，2，4，8，12，16，24 h時(shí)進(jìn)樣測定峰面積。結(jié)果的 RSD為0.71%(n=7)，表明供試品溶液在24 h內(nèi)穩(wěn)定，符合樣品檢測要求。

加樣回收試驗(yàn):取已知含量的樣品內(nèi)容物適量，精密稱定5份，分別加入對照品溶液適量，按供試品溶液制備方法制備溶液，按擬訂的色譜條件進(jìn)行含量測定，并計(jì)算回收率。結(jié)果見表1。

表1 替米沙坦加樣回收試驗(yàn)結(jié)果(n=5)

2.4 樣品含量測定

取樣品20粒，精密稱定，傾出內(nèi)容物，混勻，研細(xì)，精密稱取適量(約相當(dāng)于替米沙坦10 mg)，置50 mL量瓶中，加甲醇至刻度，超聲溶解10 min，濾過，精密量取續(xù)濾液1 mL，置10 mL量瓶中，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。另取替米沙坦對照品，依法制成質(zhì)量濃度為30 μg/mL的對照品溶液。對6批樣品進(jìn)行含量測 定 ，結(jié) 果 批 號 為 100516，100518，100520，100522，100524，100526的樣品中替米沙坦含量分別為標(biāo)示量的100.1%，100.4%，100.8%，99.8% ，101.2% ，102.3% 。

3 討論

替米沙坦的生物樣本分析方法主要有液相色譜-質(zhì)譜法、紫外法和高效液相色譜法[4-6]。曾采用2005年版《中國藥典(二部)》中吲達(dá)帕胺片含量測定項(xiàng)下的流動(dòng)相甲醇-水-冰醋酸(45∶55∶0.1)，但替米沙坦在此條件下30 min內(nèi)不出峰?？紤]到乙腈有較強(qiáng)的洗脫能力，將甲醇換為乙腈，條件為乙腈-水-冰醋酸(45∶55∶0.1)，結(jié)果制劑中替米沙坦的出峰時(shí)間約為9.5 min，能達(dá)到基線分離，且保留時(shí)間適中、峰形對稱，輔料和溶出介質(zhì)不干擾測定。

所建立的高效液相色譜法用于測定替米沙坦膠囊的含量，方法簡單、快捷、專一性強(qiáng)、重復(fù)性好，為該產(chǎn)品的含量測定及質(zhì)量控制提供了一種高效、可靠的方法。

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