香連膠囊的制備與質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究

王 薇 ，劉祖雄 ，覃 貝 ，張連鳳

(1.中國人民解放軍廣州軍區(qū)武漢總醫(yī)院藥劑科，湖北 武漢 430070;2.南昌大學(xué)醫(yī)學(xué)院實(shí)習(xí)生，江西 南昌 330038)

香連膠囊由黃連、木香2味中藥組方，是由2005年版《中國藥典(一部)》收載的香連丸經(jīng)劑型改變而成的膠囊劑，具有清熱化濕、行氣止痛之功效，主治濕熱痢疾里急后重、腹痛泄瀉、細(xì)菌性痢疾、腸炎，對消化性潰瘍、淺表性胃炎也有一定的療效[1-2]。本品較丸劑具有雜質(zhì)少、劑量準(zhǔn)確、易于吞服、能掩蓋藥物的不適味道而改善口感等優(yōu)點(diǎn)?，F(xiàn)將其制備方法及質(zhì)量控制方法研究報道如下。

1 儀器與試藥

高效液相色譜儀(美國Agilent公司);CQ-25型超聲波清洗器(上海必能信超聲有限公司);硅膠G薄層板(德國Merck公司)。鹽酸小檗堿對照品(中國藥品生物制品檢定所，含量為99.75%，批號為111950-200406);黃連、木香對照中藥材(神草中藥飲片公司，批號分別為080418，080409);香連膠囊(自制，批號為080902);其他試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 處方與制備

2.1.1 處方

黃連(吳茱萸制)1 300 g，木香330 g。

2.1.2 制備

取木香，置揮發(fā)油提取器中提取揮發(fā)油，蒸餾后的水溶液另器收集。取黃連(吳茱萸制)，用70%乙醇加熱回流提取3次，提取時間分別為3，2，1 h，合并提取液，濾過，回收乙醇并濃縮成稠膏。將木香與黃連藥渣加水煎煮2次，每次1.5 h，合并煎煮液和木香水溶液，濾過，濾液濃縮至適量，與黃連濃縮液合并，混勻，濃縮成稠膏，噴霧干燥，粉碎，過篩，加入適量糊精，揮發(fā)油用乙醇溶解噴入，混勻，過篩，裝于膠囊，制成1 000粒，每粒裝0.3 g，即得。

2.2 一般質(zhì)量控制

2.2.1 性狀

本品為硬膠囊，內(nèi)容物為淡黃色至褐黃色的粉末;氣微，味苦。

2.2.2 其他檢查

應(yīng)符合2005年版《中國藥典(一部)》膠囊劑項(xiàng)下的有關(guān)規(guī)定[1]。

2.3 薄層色譜鑒別

2.3.1 黃連

分別稱取本品膠囊內(nèi)容物0.4 g、黃連對照藥材粉末1.0 g和不含黃連的陰性對照品0.4 g，加甲醇10 mL，置水浴中加熱回流20 min，濾過，即得供試品溶液、對照藥材溶液和不含黃連的陰性對照品溶液。另取鹽酸小檗堿對照品，加甲醇制成1 g/L的對照品溶液。照薄層色譜法[1]進(jìn)行試驗(yàn)，吸取上述4種溶液各2 μL，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以正丁醇-冰醋酸-水(7∶2∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365 nm)下檢視。供試品溶液色譜中，在與對照藥材溶液和對照品溶液色譜相應(yīng)位置上顯相同的熒光斑點(diǎn)，陰性對照品溶液色譜則無此班點(diǎn)(圖1 A)。

2.3.2 木香

分別稱取本膠囊內(nèi)容物1.0 g、木香對照藥材粉末0.5 g和不含木香的陰性對照品1.0 g，加三氯甲烷10 mL，超聲處理30 min，濾過，濾液蒸干，殘渣加乙醇2 mL使溶解，即得供試品溶液、木香對照藥材溶液和不含木香的陰性對照品溶液。照薄層色譜法[1]試驗(yàn)，吸取上述3種溶液各5 μL，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯(8∶2)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品溶液色譜中，在與對照藥材溶液色譜相應(yīng)位置上顯相同顏色的斑點(diǎn)，陰性對照品溶液色譜中則無斑點(diǎn)(圖1 B)。

圖1 薄層色譜圖

2.4 鹽酸小檗堿含量測定(高效液相色譜法)

2.4.1 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)

色譜柱:Hyporsil ODS C18柱(125 mm ×4.0 mm，5 μm);流動相:乙腈-0.1%磷酸溶液-十二烷基硫酸鈉(45∶54∶1.0);檢測波長:265 nm;流速:1.0 mL/min;柱溫:25 ℃;進(jìn)樣量:10 μL。在該色譜條件下，對照品溶液及供試品溶液色譜峰良好，陰性對照對測定無干擾，色譜圖見圖2。

圖2 高效液相色譜圖

2.4.2 溶液制備

精密稱取鹽酸小檗堿對照品4 mg，置100 mL容量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得每1 mL含40 μg鹽酸小檗堿的對照品溶液。準(zhǔn)確稱取本品膠囊內(nèi)容物0.3 g，置具塞錐形瓶中，加甲醇25 mL，超聲處理30 min，濾過，濾液轉(zhuǎn)移至100 mL容量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液1 mL，置10 mL容量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得供試品溶液。另取不含黃連的陰性對照品，同法制成陰性對照品溶液。

2.4.3 方法學(xué)考察

線性關(guān)系考察:稱取鹽酸小檗堿對照品10 mg，精密稱定，置100 mL容量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻。分別精密量取該溶液 0.2，0.5，1.5，3.0，5.0，8.0 mL，置 10 mL 容量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻。分別精密吸取上述溶液10 μL，進(jìn)樣測定，以鹽酸小檗堿峰面積(A)對質(zhì)量濃度(C)進(jìn)行線性回歸，得回歸方程A=2.519×104 C-4.281×103，r=0.999 9(n=6)。結(jié)果表明，鹽酸小檗堿質(zhì)量濃度在2.0～80.0 μg/mL范圍內(nèi)與峰面積線性關(guān)系良好。

精密度試驗(yàn):取同一對照品溶液，連續(xù)重復(fù)進(jìn)樣6次，測定峰面積。結(jié)果的 RSD為1.25%(n=6)，表明儀器精密度良好。

重復(fù)性試驗(yàn):取同一批號樣品5份，依法制備供試品溶液并測定含量。結(jié)果的 RSD為0.68%(n=5)，表明方法重復(fù)性良好。

穩(wěn)定性試驗(yàn):取同一供試品溶液，分別于 0，1，2，4，8，12 h 時進(jìn)樣，依法測定含量。結(jié)果的 RSD為1.12%(n=6)，表明供試品溶液在12 h內(nèi)穩(wěn)定。

加樣回收試驗(yàn):精密稱取已知含量的樣品內(nèi)容物9份，每份0.3 g，分別添加一定量的鹽酸小檗堿對照品，按供試品溶液制備方法制備溶液，依法測定，計算回收率。結(jié)果見表1。

表1 鹽酸小檗堿加樣回收試驗(yàn)結(jié)果(n=6)

2.4.4 樣品含量測定

取本品膠囊內(nèi)容物，依法制成供試品溶液，分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10 μL，注入高效液相色譜儀，記錄色譜圖，按外標(biāo)法計算。結(jié)果批號為080924，080918，080924的3批樣品中鹽酸小檗堿含量分別為40.08，39.85，40.11 mg/粒。

3 討論

處方中的黃連、木香采用薄層色譜法鑒別，可操作性強(qiáng)，重復(fù)性好，斑點(diǎn)清晰易于識別，陰性對照無干擾。

黃連為本方君藥，主要有效成分為鹽酸小檗堿。黃連藥材和含黃連的中藥復(fù)方制劑，選擇鹽酸小檗堿為檢測成分進(jìn)行含量測定已有文獻(xiàn)[3-6]報道。筆者采用高效液相色譜法測定制劑中鹽酸小檗堿含量，具有專屬性強(qiáng)、分離效果好、方法簡便快速等優(yōu)點(diǎn)，可用于香連膠囊的質(zhì)量控制。

[1]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(一部)[M].北京:化學(xué)工業(yè)出版社，2005:522，附錄ⅥB.

[2]陳仁壽.國家藥典成方實(shí)用手冊[M].南京:江蘇科學(xué)技術(shù)出版社，2007:132.

[3]張乃浩，易以木.高效液相色譜法測定鹽酸小檗堿分散片的有關(guān)物質(zhì)[J]. 醫(yī)藥導(dǎo)報，2007，26(10):1 209-1 210.

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