癲癇患者血清中IL-1β、TNF-α含量變化研究

江明慶

癲癇（epilepsy）是以神經(jīng)元反復過度同步異常放電為特征的中樞神經(jīng)系統(tǒng)綜合征，其發(fā)病機制尚未完全闡明。近年來國內(nèi)外學者通過體內(nèi)外實驗研究發(fā)現(xiàn)癲癇的發(fā)病機制與機體的神經(jīng)免疫系統(tǒng)功能紊亂有密切關系[1]。白細胞介素-1β（IL-1β）、腫瘤壞死因子（TNF-α）是兩種重要的細胞因子，在機體免疫調(diào)控中扮演著重要角色，眾多研究已表明其在機體炎癥反應、免疫應答、細胞調(diào)節(jié)等過程發(fā)揮了重要的作用。但目前關于IL-1β和TNF-α與癲癇的關系研究較少。本實驗通過觀察癲癇患者血清中L-1β和TNF-α變化，探討免疫學機制在癲癇發(fā)病中的作用，為將來癲癇患者的治療提供實驗依據(jù)。

1 資料和方法

1.1 臨床資料 40例癲癇患者均為2009年10月1日～2011年1月31日我院神經(jīng)內(nèi)科住院患者。根據(jù)病史、臨床特征、腦電圖、CT、MRI等輔助檢查而確診為原發(fā)性癲癇，并排除伴有感染、免疫性疾病或應用免疫抑制劑或激素者。男26例，女14例，起病年齡12～68歲。40例急性腦梗死患者均為同期內(nèi)在我院確診的急性腦梗死患者（經(jīng)顱腦CT或MRI證實），男19例，女21例，起病年齡42～68歲。正常對照組為同一時間內(nèi)在我院經(jīng)體檢健康成人及兒科保健兒童人員，共40例。

1.2 標本采取 抽取肘靜脈血3ml，2000rPm離心10min，分離血清與血細胞，留取血清lml，-20℃冰箱保存。血清IL-1β、TNF-α水平測定采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）測定，試劑盒購自北京中杉金橋生物技術有限公司，具體操作方法嚴格按說明書進行。

1.3 統(tǒng)計學方法 統(tǒng)計學處理資料以均值±標準差（±s）表示。應用SPSS13.0軟件處理，組間比較采用t檢驗。由自動Y計數(shù)器，按預定編制程序直接給出有關參數(shù)、標準曲線及樣品濃度。Pearson直線關分析IL-1β、TNF-α相關性；P＜0.05具有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 各組研究對象血清中IL-1β含量的比較，見表1。癲癇患者血清IL-1β含量較急性腦梗死患者組、正常人群組顯著增高（P＜0.01）；急性腦梗死患者IL-1β較正常人群組增高（P＜0.05）。

2.2 各組研究對象血清TNF-α含量的比較，見表1。癲癇患者血清TNF-α含量較急性腦梗死患者、正常人群組顯著增高（P＜0.01）；急性腦梗死患者TNF-α較正常人群組增高（P＜0.05）。

表1 各組血清IL-1β、TNF-α含量的比較

2.3 各組研究對象血清中IL-1β、TNF-α相關性分析。對癲癇組IL-1β、TNF-α含量進行相關性分析，二者之間的相關系數(shù)為r=0.865，（P＜0.001），表明二者之間存在高度正相關；急性腦缺血組IL-1β和TNF-α之間存在弱相關（r=0.141，P＜0.05）；正常對照組無明顯相關性。

3 討論

癲癇是一種常見的神經(jīng)系統(tǒng)慢性發(fā)作性疾病，是一組由不同病因所引起，腦部神經(jīng)元高度同步化，且常具有自限性的異常放電所導致的以發(fā)作性、短暫性、重復性及刻板性的中樞神經(jīng)系統(tǒng)功能失常為特征的綜合征。有關癲癇的發(fā)病機制目前有多種學說，包括鈣離子、興奮性氨基酸及多條信號轉(zhuǎn)導通路參與。自從有學者提出的免疫-神經(jīng)-內(nèi)分泌網(wǎng)絡學說以來，國內(nèi)外許多學者在體內(nèi)外癲癇模型及臨床研究中證實了癲癇模型及癲癇患者在給予癲癇藥治療前后存在免疫異?，F(xiàn)象[1-3]。近年來隨著國內(nèi)外學者對癲癇的免疫學機制不斷深入研究，發(fā)現(xiàn)細胞因子在癲癇免疫學機制中起了重要的作用，這些因子主要集中在IL-1β、IL-6和TNF-α等[4-5]。IL-1β和TNF-α主要由單核-巨噬細胞產(chǎn)生，具有多種生物學效應的細胞調(diào)節(jié)因子，其異常表達和分泌失控與一些自身免疫性疾病的發(fā)生密切相關。研究發(fā)現(xiàn)癲癇發(fā)作時，IL-1β，TNF-α可誘導IL-8的表達，IL-8分泌增加，引起免疫細胞在受累組織內(nèi)浸潤、積聚和釋放多種生物活性物質(zhì)，造成局部組織的炎癥反應[4-6]，其參與癲癇病理生理過程的機制可能與以下機制有關：抑制膠質(zhì)細胞內(nèi)谷氨酰合成酶的活性，使興奮性氨基酸（谷氨酸）活性增強；刺激膠質(zhì)細胞增生，并誘導膠質(zhì)細胞產(chǎn)生其他細胞因子；對海馬CA3錐體細胞產(chǎn)生興奮性影響，并減弱抑制性突觸后電位致異常癇樣放電等機制。

IL-1β、TNF-α作為兩種重要的炎性因子在多種疾病病理生理過程中發(fā)揮了重要的作用，但其在癲癇發(fā)病中的作用研究較少，本研究結(jié)果顯示癲癇患者血清IL-1β、TNF-α含量顯著高于急性腦梗死組及正常人群對照組患者（P＜0.05）。說明癲癇患者血清IL-1β、TNF-α異常升高為自身表現(xiàn)所致,繼而異常升高的IL-1β、TNF-α等細胞因子又參與了癲癇的病理生理過程，提示早期抑制癲癇患者細胞因子升高可減弱癲癇患者神經(jīng)元細胞損傷。另有學者在癲癇動物模型及癲癇患者研究發(fā)現(xiàn)，抗癲癇藥物可顯著降低癲癇動物模型及癲癇患者血清中IL-1β、TNF-α含量。

本實驗對IL-1β與TNF-α進行了相關性分析，發(fā)現(xiàn)癲癇組患者中二者的相關系數(shù)為r=0.865，說明二者高度相關?？赡芏咴诎d癇的發(fā)病過程中相互影響，共同參與癲癇發(fā)病的免疫機制。

[1]Friedman A, Dingledine R.Molecular cascades that mediate the influence of inflammation on epilepsy[J].Epilepsia,2011,Suppl 3:33-39.

[2]Bauer S, Cepok S, Todorova-Rudolph A, et al.Etiology and site of temporal lobe epilepsy influence postictal cytokine release[J].Epilepsy Res,2009,86(1):82-88.

[3]Li G, Bauer S, Nowak M,et al.Cytokines and epilepsy [J].Seizure,2011,20(3):249-256.

[4]Chou IC, Lin WD, Wang CH,et al.Interleukin (IL)-1beta, IL-1 receptor antagonist, IL-6, IL-8, IL-10, and tumor necrosis factor alpha gene polymorphisms in patients with febrile seizures[J].J Clin Lab Anal,2010,24(3):154-159.

[5]Asano T, Ichiki K, Koizumi S,et al.IL-8 in cerebrospinal fluid from children with acute encephalopathy is higher than in that from children with febrile seizure[J].Scand J Immunol, 2010, 71(6): 447-451.

[6]Medhi B, Prakash A, Avti PK,et al.Intestinal inflammation and seizure susceptibility: understanding the role of tumour necrosis factor-alpha in a rat model[J].J Pharm Pharmacol,2009, 61(10):1359-1364.