待宰豬鹽酸克倫特羅殘留的檢測實踐

曹祿松 李海金

江蘇省金湖縣動物檢疫站,江蘇金湖 211600

待宰豬鹽酸克倫特羅殘留的檢測實踐

曹祿松 李海金

江蘇省金湖縣動物檢疫站,江蘇金湖 211600

通過對金湖縣2009年11、12月份的待宰豬鹽酸克倫特羅的檢測與結(jié)果分析,闡述了金湖縣主要工作方法、經(jīng)驗、以及對當(dāng)前鹽酸克倫特羅檢測工作的建議。

生豬;鹽酸克倫特羅;檢測

曹祿松,男,1965年生,大專,獸醫(yī)師。

瘦肉精是一類動物用藥,有數(shù)種藥物被稱為瘦肉精,例如萊克多巴胺(Ractopamine)、克倫特羅(Clenbuterol)等。在我國,通常所說的“瘦肉精”則是指克倫特羅,將瘦肉精添加于飼料中,可以增加動物的瘦肉量,減少飼料使用,使肉品提早上市,降低成本。從1997年開始,農(nóng)業(yè)部就禁止在畜禽生產(chǎn)中使用“瘦肉精”,《飼料和飼料添加劑管理條例》和《獸藥管理條例》中明確規(guī)定,不準(zhǔn)在飼料中添加“瘦肉精”。近年來,部分生豬養(yǎng)殖場(戶)為提高養(yǎng)豬經(jīng)濟效益,在生豬飼料中添加“瘦肉精”,添加“瘦肉精”后能夠促進豬在代謝過程中蛋白質(zhì)的合成,加速脂肪的轉(zhuǎn)化和分解,提高豬的瘦肉率,在目前所添加的違禁藥品中以鹽酸克倫特羅的應(yīng)用最為廣泛。由于生豬中鹽酸克倫特羅的添加具有用量大、使用時間較長、代謝慢等特點,所以當(dāng)豬屠宰上市后殘留量一般都會很大,含有鹽酸克倫特羅的豬肉和內(nèi)臟﹙特別是肝臟、肺臟﹚,人食用后會出現(xiàn)惡心、頭暈、四肢無力、肌肉顫抖、心悸等中毒癥狀。鹽酸克倫特羅特別對心臟病、高血壓的患者以及老年人危害更大。含有鹽酸克倫特羅的生豬產(chǎn)品不斷流向市場,導(dǎo)致鹽酸克倫特羅中毒事故頻繁發(fā)生,嚴(yán)重威脅到消費者的身體健康。

豬肉是我國人民的主要肉食消費品,同時生豬生產(chǎn)又是當(dāng)前添加鹽酸克倫特羅的重災(zāi)區(qū),因此加大與普及對生豬(特別是商品豬)鹽酸克倫特羅的檢測力度刻不容緩。國家獸醫(yī)衛(wèi)生行政監(jiān)督機構(gòu)為確保人民的肉食品安全工作,加大了以生豬為重點的鹽酸克倫特羅檢測工作的檢測力度和普及程度。2009年底江蘇省金湖縣動物檢疫站就在全縣范圍內(nèi)開展了針對鹽酸克倫特羅的檢測工作,取得了較好的效果,現(xiàn)將筆者在實際工作中取得的一些經(jīng)驗與體會介紹如下。

1 檢測過程

金湖縣是豬肉消費大縣,全縣約37萬人,年消費生豬達11萬頭。金湖縣生豬飼養(yǎng)并不發(fā)達,主要為1家1戶生產(chǎn)的一種當(dāng)?shù)睾诿i,全縣土種豬生產(chǎn)量不足4萬頭,其余主要依靠從山東、河南、安徽等省調(diào)運。本地豬大部分是使用剩飯菜和農(nóng)作物副產(chǎn)品作為飼料土法飼養(yǎng),很少存在“瘦肉精”的問題,因此,檢測的重點主要集中在外調(diào)生豬上。全縣共有1個縣級生豬定點屠宰點和4個生豬交易市場,生豬交易較發(fā)達,特別是4個生豬交易市場已經(jīng)逐步形成為江蘇省黑毛豬交易的集散地,從此中轉(zhuǎn)發(fā)往南京等地,因此對外調(diào)生豬的鹽酸克倫特羅檢測工作尤為重要。

目前應(yīng)用于鹽酸克倫特羅的檢測方法主要有以下3種。一是金標(biāo)檢測卡定性檢測,主要用于對可疑生豬的初步檢測,該方法成本較低、檢測速度快、操作簡便,但結(jié)果不易保存。二是酶聯(lián)免疫法定量檢測,用于金標(biāo)卡測試后的確認(rèn),該方法檢測靈敏度高,可保存結(jié)果,但易受到交叉反映干擾。三是氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法定量確證檢測,該方法用于終審,但投入大,檢測成本高,適用于專業(yè)實驗室。筆者所在的基層動物檢疫檢驗單位主要采用按一定比例隨機抽檢和根據(jù)經(jīng)驗定向抽檢相結(jié)合的方法選擇測試生豬,主要采用鹽酸克倫特羅快速檢測卡(廣州景同生物科技有限公司)進行檢測,該檢測方法具有簡單快速、無需特殊儀器設(shè)備的特點,既可在實驗室進行,也可在生豬交易市場、屠宰場、養(yǎng)豬場等進行實地檢測,適用于對大量檢測生豬的初步抽檢。

1.1 樣本的采集

1)宰前采集。當(dāng)外調(diào)生豬抵達交易市場或屠宰場后,先讓生豬下車并休息20～30min后。通過仔細(xì)觀察,一般飼喂鹽酸克倫特羅的生豬都具有皮毛異常光亮、皮膚白里透紅、被毛少而松軟,后臀部飽滿突出,背部體表驅(qū)打后容易留下持久傷痕,呼吸急促,個別會出現(xiàn)腿抽搐、站立不穩(wěn)、爬坡困難、行走不靈活、容易發(fā)生蹄損傷和跛行或非外因倒地不起等特征,根據(jù)以上特征可以對可疑豬設(shè)法采集尿液作為樣本進行檢測,采尿的方法主要有蹲守接尿法(比較適合母豬)和使用簡易的接尿器接尿法(比較適合公豬)。

2)宰后采集。根據(jù)對宰后生豬的感官檢驗選擇可疑生豬,含有鹽酸克倫特羅的豬肉色澤比普通豬肉深,肌肉特別鮮紅,后臀較大且肌肉飽滿,肌纖維比較松軟,瘦肉與脂肪間有黃色液體流出,脂肪非常薄,腹股溝的脂肪層內(nèi)毛細(xì)血管分布較密,甚至呈充血狀態(tài)。對可疑豬在其開膛后,用一次性注射器從膀胱中抽取尿液作為樣本,組織的采樣一般以無菌采取肝組織較好。

1.2 抽取樣品

1)抽樣數(shù)量的確定。在抽樣前,要準(zhǔn)備好接尿用具、一次性注射器、采樣瓶、以及抽樣文書等。樣本量一般按照10%的比例采取,對出現(xiàn)肌肉震顫、站立不穩(wěn)、異常豐滿的可疑生豬,要加大抽檢比例;每頭豬采取尿液量約100mL,平均分成3份,每份約30mL,分別裝入采樣瓶并編號后密封,抽樣用具在每次使用前要徹底清洗;組織樣品一般以采取肝組織為好。

2)抽樣記錄。抽樣時,要如實填寫抽樣單,注明生豬來源、抽樣時間、同群數(shù)量等內(nèi)容,并由抽樣人和畜主共同簽名確認(rèn),一式三聯(lián)分別貼在3個重復(fù)的樣品瓶上。3份抽樣樣品中,2份由抽樣人員帶回用于檢驗和留樣用,另1份封存于被抽檢單位,作為對檢驗結(jié)果有爭議時復(fù)檢用。

3)樣品貯運。取樣后,樣品應(yīng)立即在0～4℃條件下冷凍保存。運輸過程中,樣品溫度不得超過4℃,時間不超過24h。

1.3 樣本處理

樣品必須收集在潔凈、干燥不含任何防腐劑的塑料杯或玻璃容器內(nèi)。有條件的可將尿液在4℃、3000r/min以上離心,取上清液備用。肉樣或組織樣品可將樣品剪碎,裝入1.5mL離心管中,蓋緊管蓋,放在100℃水中加熱5min以上,使有液體浸出,取出離心管放至室溫,取上清液備用;也可稱5克樣品剪碎,加入25 、50mmol鹽酸溶液,振蕩3min并靜置5min后取上清液1mL,加入氫氧化鈉溶液,再振蕩3min并靜置5min后取上清液備用。

1.4 樣本的檢驗方法

取出試劑板(在室溫高于30℃,在高度潮濕的環(huán)境中應(yīng)盡快使用),將試劑板置于平坦的臺面上,用塑料吸管垂直滴加3滴尿樣或處理過的樣品(約120μL)于加樣孔內(nèi),等待紫紅色條帶的出現(xiàn),測試結(jié)果應(yīng)在3～5min時讀取。超過時間結(jié)果無效。

1.5 結(jié)果判定

陽性(+):僅質(zhì)控區(qū)(C)出現(xiàn)1條紫紅色帶,在測試區(qū)(T)內(nèi)無紫紅色條帶出現(xiàn)。此陽性結(jié)果表明尿液中含有克倫特羅殘留物。陰性(-):2條紫紅色條帶出現(xiàn)。1條位于測試區(qū)(T)內(nèi),另1條位于質(zhì)控區(qū)(C)內(nèi)。陰性結(jié)果表明尿液中不含有克倫特羅殘留物。無效:質(zhì)控區(qū)(C)不出現(xiàn)紫紅色條帶,表明不正確的操作過程或試劑盒已變質(zhì)損壞。具體示意圖見圖1。

圖1 鹽酸克倫特羅快速檢測卡結(jié)果判斷

1.6 檢后處理

將檢測結(jié)果及時通知貨主及相關(guān)人員,對經(jīng)檢測合格(陰性)的生豬允許屠宰或交易,開具鹽酸克倫特羅檢測合格的報告單;對經(jīng)檢測不合格(陽性)的生豬禁止屠宰,并就地封存,及時上報上級主管部門,按有關(guān)規(guī)定處理。

2 檢測結(jié)果

按照以上檢測方法筆者于2009年11月和12月在全縣范圍內(nèi)的1個縣級生豬定點屠宰點和4個生豬交易市場按照不同場所、不同產(chǎn)地、以整車為單位按照10%的比例共計檢測生豬227頭。檢測結(jié)果見下表1,通過共計30個批次的檢測結(jié)果匯總情況來看,其檢測結(jié)果都為陰性,陰性率為100%,沒有出現(xiàn)鹽酸克倫特羅殘留問題豬。

表1 金湖縣2009年11月和 12月份生豬鹽酸克倫特羅殘留檢測結(jié)果

3 討 論

在基層的鹽酸克倫特羅實際檢測中,多數(shù)檢測單位會選擇豬尿作為樣本,因為使用鹽酸克倫特羅快速檢測卡檢測尿樣的方法比較簡單方便。一般對豬的鹽酸克倫特羅檢測工作首先是在宰前進行,即與宰前檢疫同步實施,對每批進場生豬隨機進行抽檢,沒有問題的生豬才能待宰或交易;但是生豬宰前尿樣的采集有一定的難度,一般可在豬下車后10～20min或當(dāng)豬進圈后休息一段時間后人為驅(qū)趕,檢測人員在一旁仔細(xì)觀察,當(dāng)發(fā)現(xiàn)豬有排尿傾向后,及時用長柄集尿盆收集(此法比較適合母豬),而公豬的生殖器在腹下,一旦伸出長柄集尿盆它就會發(fā)現(xiàn),立即會停止排尿,因此對待宰前公豬尿的收集,一般使用自制的簡易接尿器接尿法,有條件的可對豬進行臥式保定,還可將豬關(guān)到小的自制隔離框(2m×2m)中進行采尿。一般生豬經(jīng)過長途運輸后,體內(nèi)的尿量已經(jīng)很少,條件許可的話,可在豬卸車后適當(dāng)補水,這樣有助于豬增加排尿次數(shù)以及宰后膀胱中的存尿量。

常用的鹽酸克倫特羅檢測方法多是使用快速檢測試紙檢測尿液。國內(nèi)生產(chǎn)鹽酸克倫特羅檢測卡的廠家很多,各個廠家的檢出量和判定標(biāo)準(zhǔn)都不太一樣,在檢測試劑的選擇上應(yīng)盡量選擇權(quán)威部門推薦的生產(chǎn)廠家。測試前要將未開封的檢測卡恢復(fù)到室溫,檢測卡包裝袋打開后要立即使用,當(dāng)發(fā)現(xiàn)有疑似陽性結(jié)果的標(biāo)本時,應(yīng)對同頭樣本進行重復(fù)檢測,以增加檢測的準(zhǔn)確性?，F(xiàn)在鹽酸克倫特羅抽檢率一般為10%,在特殊時期可提高到20%,如果發(fā)現(xiàn)某批次生豬有問題,則需要進行100%的檢驗。尿液中的雜質(zhì)會導(dǎo)致假陽性結(jié)果,有條件的,應(yīng)離心后使用。

金湖縣的鹽酸克倫特羅檢測工作具有一定的長期性和艱巨性,因為金湖縣的生豬來源主要是外調(diào)生豬,原產(chǎn)地的情況筆者不了解,也不能控制,因此只有依靠加大本地的檢測力度,緊抓不懈,同時應(yīng)提高檢疫手段、加強法規(guī)宣傳以及加大對違法人員的處罰力度來加強金湖縣的瘦肉精檢測工作。目前鹽酸克倫特羅檢測的成本還很高。如果按照上級要求進行抽檢,還存在檢測經(jīng)費上的困難,還需要地方政府的大力支持。

在鹽酸克倫特羅作為一種畜牧業(yè)生產(chǎn)的違禁藥品遭到嚴(yán)厲查處的同時,就會出現(xiàn)部分鹽酸克倫特羅的替代品,目前發(fā)現(xiàn)的替代品有“鹽酸萊克多巴胺”、“沙丁胺醇”等,金湖縣在緊抓常見鹽酸克倫特羅檢測的同時,應(yīng)密切關(guān)注替代品的檢測。從檢測結(jié)果看沒有發(fā)現(xiàn)鹽酸克倫特羅問題豬,但是此結(jié)果并不能說明在金湖縣在檢測期間沒有出現(xiàn)或今后不會出現(xiàn)鹽酸克倫特羅問題生豬,這一結(jié)果準(zhǔn)確性有可能受到試劑或儀器的選擇、檢測水平、抽檢比例等因素的影響,下一步金湖縣應(yīng)加強檢疫人員的業(yè)務(wù)培訓(xùn),提高業(yè)務(wù)水平,并添置必要的檢疫設(shè)備。同時要提高抽檢率,保證采樣送檢質(zhì)量,增加檢測內(nèi)容,選用不同廠家、不同類型的快速檢測卡進行配合檢測,如選用鹽酸克倫特羅、萊克多巴胺二合一快速檢測卡,以提高檢測的準(zhǔn)確性,同時應(yīng)加強對生豬重點產(chǎn)地的監(jiān)控,對相關(guān)部門通報的陽性高發(fā)地區(qū)的生豬應(yīng)重點加以監(jiān)控,并及時加大檢測力度,提高檢測頻率和抽檢率。

2010-11-21

(責(zé)任編輯:

陸文昌)