銀花口服液的澄明度研究

謝慶鳳， 黎玉翠， 暴梅佳， 易宇陽， 陳志維， 武 文， 蘇子仁

(廣州中醫(yī)藥大學(xué)，廣東廣州 510006)

銀花口服液由金銀花和忍冬藤經(jīng)水提濃縮而成，具有清熱解毒、清風(fēng)散熱、抗病毒、保肝利膽的功效，臨床用于發(fā)熱口渴，咽喉腫痛，熱癤瘡瘍，小兒熱毒等癥，療效較佳。但銀花口服液的澄明度穩(wěn)定性較差，在貯藏期間會產(chǎn)生沉淀，同時與藥效相關(guān)的指標(biāo)成分綠原酸的含量也有下降。本文以保證綠原酸含量合格為基本要求，研究探討pH及抗氧劑對銀花口服液澄明度穩(wěn)定性的影響。

1 儀器和試藥

1.1 儀器

高效液相色譜儀:DIONEX SUMMIT高效液相色譜儀，配有PDA-100紫外檢測器;PHB-3 pH計(上海三信儀表廠);Sartorius CP225D十萬分之一電子天平(德國Sartorius公司);SHZ-CB予華循環(huán)水真空泵;TC-15套式恒溫器(海寧市新華醫(yī)療器械廠)。

1.2 試藥

金銀花、忍冬藤(購于杏園春藥店，經(jīng)廣州中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院藥劑科曾惠芳主任中藥師鑒定為忍冬科忍冬屬植物干燥花蕾及莖枝);乙腈(色譜純，德國Merck公司);磷酸、NaOH、鹽酸(均為分析純，廣東光華化學(xué)廠有限公司);綠原酸標(biāo)準(zhǔn)品(批號:110753-200413，供含量測定用，中國藥品生物制品檢定所提供);維生素C(廣東光華化學(xué)廠有限公司);D—異維生素C鈉(鄭州脫氧實業(yè)有限公司 );茶多酚(鄭州英晨化工產(chǎn)品有限公司)。

2 方法與結(jié)果

2.1 銀花口服液原工藝制備

取金銀花75 g、忍冬藤175 g一份，金銀花加10倍水用蒸餾法蒸餾，收集蒸餾液100 mL，加入防腐劑，備用。藥液濾過，濾液備用。藥渣與忍冬藤加水在80℃浸漬二次，第1次加水10倍，第2次加水8倍，每次1 h，濾過，合并濾液，濃縮至約250 mL，靜置，傾取上清液，濾過。另取蔗糖100 g，加水煮沸，濾過，與上述溶液合并，加水至約900 mL，加入防腐劑，再加入上述蒸餾液，混勻，加水至1 000 mL，濾過，灌裝(每支15 mL)，100℃加熱處理30 min滅菌，即得。

2.2 綠原酸含量測定

色譜條件:色譜柱:Alltima C18柱(250 mm×4.6 mm，5 μm);流動相:0.3%磷酸溶液－乙腈(90∶10);進樣量5 μL;流速:1.0 mL/min;柱溫:室溫(25℃);檢測波長327 nm。理論板數(shù)按綠原酸計算應(yīng)不低于1 000。

對照品溶液的制備:取綠原酸對照品適量，精密稱定，加50%甲醇溶液制成每1 mL含40 μg的溶液，即得。

供試品溶液的制備:精密量取銀花口服液1 mL，置25 mL棕色量瓶中，加50%甲醇溶液至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。

標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定:國家食品藥品監(jiān)督管理局YBZ25052005號標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定，本品每支含金銀花以綠原酸(C16H18O9)計，不得少于9.0 mg。

2.3 口服液pH值的篩選

取處方量藥材8份，按銀花口服液原生產(chǎn)工藝平行制備，得8份藥液，測得pH為5.1。用10%氫氧化鈉溶液或10%鹽酸溶液將8份藥液分別調(diào)節(jié)pH值至3.0、3.5、4.0、4.5、5.0、5.5、6.0、6.5 后，加水至 1 000 mL，混勻，濾過，灌裝，滅菌，放置過夜，考察pH值對銀花口服液澄明度的影響，同時測定滅菌后綠原酸含量，結(jié)果見表1。

表1 pH值對澄明度和綠原酸含量的影響

結(jié)果顯示，隨著pH值的增高，澄明度穩(wěn)定性增加，但綠原酸含量有下降趨勢。當(dāng)pH調(diào)節(jié)至6.0時，口服液不產(chǎn)生沉淀，但綠原酸含量不符合規(guī)定的要求。

2.4 不同穩(wěn)定劑對綠原酸含量的影響

取處方量藥材8份，記為4組，每組兩份。第2組按原生產(chǎn)工藝制備，為空白組;第2組在工藝“合并濾液”后加入茶多酚1.0 g，濃縮至約250 mL;第3組在工藝“合并濾液”后加入維生素C 1.0 g，濃縮至約250 mL;第4組在工藝“合并濾液”后加入D-異維生素C鈉1.0 g，濃縮至約250 mL;其余制備按2.1項下工藝執(zhí)行，使得最終制得樣品中穩(wěn)定劑濃度均為1 mg/mL。各組藥液最終調(diào)節(jié)pH為6.0后，將藥液加水至1 000 mL，混勻，濾過，灌封，滅菌，即得。以樣品中綠原酸含量為考察指標(biāo)，選擇加入藥液中的最適穩(wěn)定劑，結(jié)果見表2。

表2 不同穩(wěn)定劑對綠原酸含量的影響

結(jié)果顯示，藥液中加入穩(wěn)定劑可顯著提高綠原酸含量。在藥液pH為6.0的環(huán)境下，D—異維生素C鈉對綠原酸含量影響最為顯著，且新制制劑無明顯可見沉淀。

2.5 D-異維生素C鈉不同濃度對綠原酸含量的影響

為進一步優(yōu)化穩(wěn)定劑的加入量，進行了以下實驗:取處方量藥材8份，記為4組，每組2份。第1組在工藝“合并濾液”后加入D—異維生素C鈉0.5 g，濃縮至250 mL;第2組在工藝“合并濾液”后加入D-異維生素C鈉1.0 g，濃縮至約250 mL;第3組在工藝“合并濾液”后加入D-異維生素C鈉2.0 g，濃縮至約250 mL;第4組在工藝“合并濾液”后加入D-異維生素C鈉3.0 g，濃縮至約250 mL，其余制備工藝按2.1項下工藝執(zhí)行，使得最終制得制劑中D-異維生素C鈉的濃度分別為0.5、1.0、2.0、3.0 mg/mL。各組藥液最終調(diào)節(jié)pH為6.0后，將藥液加水至1 000 mL，混勻，濾過，灌封，滅菌，即得。以藥液中綠原酸含量為考察指標(biāo)，選擇加入藥液中D-異維生素C鈉的最佳濃度，結(jié)果見表3。

表3 D-異維生素C鈉不同濃度時口服液中綠原酸含量

結(jié)果顯示，在一定范圍內(nèi)，隨著D-異維生素C鈉濃度增加，綠原酸含量也相應(yīng)增加。參照2005版《中國藥典》一部附錄IJ合劑項下對附加劑的規(guī)定，綜合考慮生產(chǎn)成本，可知口服液中D-異維生素C鈉的最佳濃度為2.0 mg/mL。

3 討論

3.1 本實驗采用傳統(tǒng)水提工藝制備銀花口服液，但金銀花藥材中含有揮發(fā)油成分，水提工藝可使得水蒸氣與揮發(fā)油之間的相互作用加劇，導(dǎo)致乳化［1］，故金銀花水提前需先提取蒸餾液，以保證銀花口服液的藥效。

3.2 口服液pH值的調(diào)節(jié)需同時考慮口服液中指標(biāo)成分的含量及口服液的口感。pH值低于3.0時，制得的口服液酸味過重，對胃也有一定刺激;pH值高于6.5時，制得的口服液味澀。因此本實驗選擇pH考察范圍為3.0～6.5。

3.3 參考文獻可知［2］，綠原酸是一種縮酚酸，穩(wěn)定性差。實驗表明，綠原酸標(biāo)準(zhǔn)品的50%甲醇溶液在4℃冷藏一周后，綠原酸有一定分解(圖1、2)。在酸性條件下，具有酚羥基結(jié)構(gòu)的綠原酸以分子狀態(tài)存在，在pH3.0時，綠原酸損失較?。?］。在近中性的環(huán)境下要確?？诜褐芯G原酸含量合格，應(yīng)盡可能減少加工和儲存過程中綠原酸的損失。加入合適的穩(wěn)定劑可提高產(chǎn)品中綠原酸的穩(wěn)定性。

圖1 新配制綠原酸50%甲醇溶液

圖2 4℃冷藏一周后綠原酸50%甲醇溶液

［1］何文斐，李士敏，楊鑫驥.正交試驗探討金銀花揮發(fā)油的提取條件［J］.中國中藥雜志，2003，28(2):172-173.

［2］羅 磊，郭曉園.金銀花中綠原酸的研究進展［J］.工藝探討，2008，8:60-62.

［3］劉 磊，何再安，余子川，等.大孔樹脂對金銀花中綠原酸提取純化效果的研究［J］.中國現(xiàn)代中藥，2008，10(5):24-25.