血清胱抑素 2、肝細胞生長因子與新生兒窒息合并腎損傷的關(guān)系

劉雪舫

(開封市兒童醫(yī)院，河南開封 475000)

新生兒窒息是指新生兒出生后 1 min內(nèi)無自主呼吸或未能建立自主規(guī)律呼吸[1]，窒息導致的缺氧可引起炎性介質(zhì)的大量釋放，引起全身性的多臟器受損。腎臟受損往往缺乏特異性表現(xiàn)，易產(chǎn)生急性腎衰[2]。為此，本研究對窒息新生兒臍血胱抑素 2、肝細胞生長因子(HGF)的變化與腎衰的關(guān)系進行了探討。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 收集我院 2007～2010年窒息新生兒 85例 ，男 46例 、女 39例，其中產(chǎn)前窒息 15例 、產(chǎn)時窒息 20例、產(chǎn)后窒息 50例。 Apgar評分:4～7分50例、0～3分 35例。根據(jù) Apgar評分及血清肌酐、尿素氮水平，85例分為窒息合并腎損傷組 45例(除窒息外，伴血清肌酐、尿素氮水平升高)和單純窒息組 40例(除窒息外，血清肌酐、尿素氮水平正常)。

1.2 方法 收集患兒血液后，1 000 r/min離心 10 min將血清和紅細胞迅速小心地分離，應(yīng)用 ELISA法測定血清胱抑素 2、HGF水平。根據(jù)待測血清樣品數(shù)量決定所需的板條數(shù)，制定復(fù)孔，加入稀釋的標準品 50μl于反應(yīng)孔后，加入 50μl的生物素標記的抗體。37℃溫育 1 h，用洗板機洗滌，每孔加入 80 μl的親和鏈酶素-HRP。37℃溫育 30 min，甩去洗滌液。每孔加入底物 A、B各 50μl，37℃溫育 15 min。取出酶標板，迅速加入 50μl終止液，在 450 nm波長處測定各孔的 OD值。以標準物的濃度為橫坐標(對數(shù)坐標)，OD值為縱坐標(普通坐標)，在半對數(shù)坐標紙上繪出標準曲線。根據(jù)樣品的 OD值由標準曲線查出相應(yīng)的濃度，再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與 OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的 OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實際濃度。

1.3 統(tǒng)計學方法 采用 SPSS11.5軟件進行統(tǒng)計分析，計量資料以±s表示，采用t檢驗。P≤0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

新生兒窒息合并腎衰組血清胱抑素 2、HGF濃度較單純窒息組明顯升高，兩組比較差異有統(tǒng)計學意義(P均 ＜0.05)。見表1。

表1 新生兒窒息合并腎衰組與單純窒息組血清胱抑素 2、HGF濃度比較(±s)

表1 新生兒窒息合并腎衰組與單純窒息組血清胱抑素 2、HGF濃度比較(±s)

注:與單純窒息組比較，*P＜0.05

組別 n 血清胱抑素 2(mg/L)HGF(ng/ml)窒息合并腎衰新生兒組 45 1.18±0.33* 0.610±0.048*單純窒息組 40 0.61±0.06 0.230±0.030

3 討論

胱抑素 2亦稱半胱氨酸蛋白酶抑制劑 2，胱抑素 2基因在腎、肝、胰、腸、胃、肺及胎盤等組織中均有表達。胱抑素 2可以自由的通過腎小球，但腎小管不分泌胱抑素 2;雖然胱抑素 2能被近曲小管上皮細胞重吸收，但隨后即被分解，腎小球濾過的胱抑素 2也不會返回血中。腎臟是唯一能清除循環(huán)中胱抑素 2的器官，機體產(chǎn)生胱抑素 2速率也相當恒定[3]。研究表明，胱抑素 2對腎衰的診斷較血清肌酐有更高的敏感性和特異性，是較為理想的反映腎小球濾過率的內(nèi)源性標志物[4]。HGF是存在于急性肝損傷動物血漿中的蛋白因子，它能刺激肝細胞的 DNA合成，且在肝再生過程中起重要作用。研究表明，HGF不只是作用于肝再生，而且對腎組織細胞的生長、分化起重要調(diào)控作用[5]。

目前，臨床常用的腎功能檢測以血肌酐、尿素氮為主。血清尿素氮作為腎功能的評價指標在臨床應(yīng)用中存在一定的缺陷，因為當腎小球濾過率減少到正常值的 40%以前，尿素氮濃度升高緩慢，并且其血清濃度與外源性(蛋白質(zhì)攝入量)與內(nèi)源性(感染、腎上腺皮質(zhì)激素的應(yīng)用、胃腸出血等)尿素負荷的大小有關(guān)。更重要的是腎小管對尿素氮有明顯的被動重吸收，因此尿素氮不符合腎損傷內(nèi)源性標志物要求。肌酐基本符合內(nèi)源性腎損傷標志物的要求，目前國內(nèi)外仍用血清肌酐作為臨床常規(guī)評估腎小球濾過功能受損的指標。但只有當腎功能下降接近一半時，血清肌酐才有明顯的變化，且其血清含量受性別、飲食、肌肉量等因素的影響[6]。因此，腎功能損害的敏感血清學指標一直是臨床檢驗研究的熱點之一。本研究證實，血清胱抑素 2、HGF與新生兒窒息合并腎衰的關(guān)系密切，在腎衰的發(fā)展中起重要作用。但是，由于本研究病例較少，血清胱抑素 2、HGF表達能否作為新生兒窒息合并早期腎衰的檢測指標從而及早預(yù)防與治療腎衰有待進一步研究。

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