市售6種阿奇霉素制劑的人體生物等效性研究

汪華蓉，余蕾，易發(fā)紅，何海霞（.重慶三峽中心醫(yī)院藥劑科，重慶市 404000；2.重慶醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院臨床藥理室，重慶市 40006）

阿奇霉素（Azihromycin，AZ）[1]是大環(huán)內酯類抗生素，抗菌譜廣、半衰期長、組織濃度高，在臨床上可用于治療多種細菌、支原體、衣原體感染，且其具療效顯著、安全性和耐受性好等特點，受到患者的青睞。臨床上應用有片劑、顆粒劑、膠囊和注射劑，國內有多家藥廠生產(chǎn)膠囊或片劑。鑒于市售品牌較多，筆者選擇了市售國產(chǎn)5種阿奇霉素膠囊或片劑，以QLAZ廠生產(chǎn)的阿奇霉素膠囊為參比制劑，采用同一檢測方法，從人體血藥濃度和藥動學參數(shù)角度進行了分析比較，考察其人體生物等效性，現(xiàn)報道如下。

1 材料

參比制劑:阿奇霉素膠囊（QLAZ廠，規(guī)格:每粒250 mg，批號:040400，批準文號:國藥準字H10970061）；受試制劑:阿奇霉素膠囊A（SCAZ廠，規(guī)格:每粒250 mg，批號:020301，批準文號:（97）衛(wèi)藥準字X-275-5號）、阿奇霉素膠囊B（HZAZ廠，規(guī)格:每粒250 mg，批號:040611，批準文號:國藥準字H10970148）、阿奇霉素膠囊C（BJAZ廠，規(guī)格:每粒250 mg，批號:040205，批準文號:國藥準字H10950065）、阿奇霉素片D（SHAZ廠，規(guī)格:每片250 mg，批號:050304，批準文號:國藥準字H20000477）、阿奇霉素片E（SJZAZ廠，規(guī)格:每片250 mg，批號:031103，批準文號:國藥準字H10980218）；阿奇霉素標準品（中國藥品生物制品檢定所出品，購于重慶市藥檢所，批號:130352-200203，規(guī)格:946 IU·mg－1）。

藤黃微球菌（編號28001，重慶醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院感染科提供）[2，3]；蛋白胨（上海東海制藥廠）；牛肉浸膏（上?；瘜W試劑站）；酵母浸膏（上?；瘜W試劑站）；葡萄糖（重慶北碚化學試劑廠，分析純，批號:900905）；瓊脂（日本進口分裝，上?；瘜W試劑站分裝廠，批號:20518）；水為蒸餾水。

2 方法

2.1 研究對象

男性健康志愿者，漢族，平均年齡（22.7±1.81）歲，平均體重（59.9±3.02）kg，平均身高（170.5±1.66）cm。試驗前所有受試者經(jīng)肝腎功能、血壓、心電圖檢查均正常。于充分了解試驗內容后自愿簽署知情同意書。實施方案經(jīng)重慶醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院醫(yī)學倫理委員會審批通過。

2.2 給藥方案及血樣采集

試驗前禁食12 h后，于次日晨8∶00時空腹吞服500 mg[2]前述QLAZ廠和其余5廠家生產(chǎn)的阿奇霉素膠囊或片劑（200 mL溫開水服藥）。服藥當日統(tǒng)一進標準餐。受試期間禁止大量活動，禁止吸煙、飲酒及含酒精、咖啡因類飲料，試驗期間禁止一切非試驗藥物。于給藥后 0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、6.0、8.0、12.0、24.0、48.0、72、96.0、144 h時，抽取前臂靜脈血3.0 mL，分離血清，低溫（－20 ℃）保存，待測。文獻報道[2，3]，本品tmax≈2 h，t1/2≈48 h，根據(jù)2000年版《中國藥典》“藥物制劑生物利用度和生物等效性試驗指導原則”的要求，筆者在達峰時間前取樣3～4個點，在峰時間后取樣8～10個點，取樣持續(xù)到5個半衰期以上。

2.3 血清樣品檢測（微生物杯碟法）

2.3.1 標準液的配制:準確稱取阿奇霉素標準品，用無水乙醇溶解后加緩沖液（pH7.8）稀釋成1 mg·mL－1標準貯備液，置－40 ℃儲存?zhèn)溆谩?/p>

2.3.2 指示菌:選用藤黃微球菌[編號28001][2，3]。

2.3.3 培養(yǎng)基Ⅱ號[4]:蛋白胨6 g，牛肉浸膏1.5 g，酵母浸膏6 g，葡萄糖1 g，瓊脂20 g，蒸餾水1000 mL，調pH 7.8～8.0，在115℃滅菌30 min后備用。

2.3.4 測定方法:參照文獻[5]，將培養(yǎng)基Ⅱ號熔化后冷至約50℃，加入適量藤黃微球菌菌液，混勻，于超凈工作臺上倒入經(jīng)高壓滅菌的平皿中（12 mL/皿），冷凝后放入不銹鋼小杯，每個血樣分別加入2個小杯，同時另放2個小杯，內加標準液。靜置相同時間后，置37℃孵育14～16 h，取出，以游標卡尺測量抑菌圈直徑，按標準曲線計算血液標本中的藥物濃度。

2.4 方法學驗證

2.4.1 標準曲線的制備:以正常人血清配制系列阿奇霉素標準液（濃度為2.4、1.2、0.6、0.3、0.15、0.075、0.038、0.019、0.009和0.005 μg·mL－1），組間距1∶2，中心濃度為0.1 μg·mL－1，用磷酸鹽緩沖液（pH7.8）和正常人血清各半作為稀釋液。測定抑菌圈，以血藥濃度的對數(shù)為縱座標（Y），抑菌圈的直徑為橫標（X），作直線回歸，得標準曲線方程Y＝0.12657X－0.30464（r＝0.9988），結果表明，阿奇霉素血藥濃度在0.005～2.4 μg·mL－1范圍內線性關系良好。本法最低檢測濃度為0.005 μg·mL－1。

2.4.2 回收率及精密度試驗:按照標準曲線制作方法，采用4種濃度的阿奇霉素標準液，各配制若干份，分別測定其抑菌圈，得出日內相對標準差（RSD）和回收率（見表1）；并于日間按上述濃度測定方法計算出日間RSD和回收率。

2.4.3 凍融試驗:將含藥血清反復冷凍（－20℃）、溶解，1周內測定4次，結果見表2。

3 結果

3.1 藥-時曲線

受試者單劑口服QLAZ廠和其余5廠家生產(chǎn)的阿奇霉素膠囊或片劑500 mg后，平均藥-時曲線見圖1。

3.2 數(shù)據(jù)處理

采用3p97計算機程序軟件，計算各個體的藥動學參數(shù)，cmax、tmax以實測值計算，AUC按梯形面積法計算。取值范圍0～144 h。6廠家生產(chǎn)的阿奇霉素制劑在人體內的藥動學參數(shù)見表3。

4 討論

藥物制劑要產(chǎn)生最佳療效，其藥物活性成分應當在預期時間段內釋放、吸收并被轉運到作用部位達到預期的有效濃度。大多數(shù)藥物是進入血液循環(huán)后產(chǎn)生全身治療效果，作用部位的藥物濃度和血液中藥物濃度存在一定的比例關系，因此可以通過測定血液循環(huán)中的藥物濃度來獲得反映藥物體內吸收程度和速度的主要藥動學參數(shù)，間接預測藥物制劑的臨床治療效果，以評價制劑的質量。本研究血藥濃度藥-時曲線如圖1所示，SCAZ、HZAZ和SJZAZ廠藥物cmax分別為（0.38±0.13）、（1.07±0.53）和（1.24±0.75）μg·mL－1，明顯低于參比制劑的（1.69±0.53）μg·mL－1（P＜0.01）。按照此血藥濃度推測，則SCAZ、HZAZ和SJZAZ廠制劑臨床治療效果是不如QLAZ廠制劑的臨床治療效果，或不能達到有效治療效果。發(fā)生原因可能是各生產(chǎn)廠家藥物的理化性質、劑型特征、所用輔料、制備工藝有所差異，值得調整制劑生產(chǎn)工藝等。

表1 精密度及回收率試驗結果（n＝6）Tab 1 Results of precision and recovery tests（n＝6）

表2 凍融穩(wěn)定性試驗結果（n＝4）Tab 2 Result of frozen-melt tests（n＝4）

圖1 健康受試者口服6種阿奇霉素制劑后的平均藥-時曲線Fig 1 Mean serum concentration-time curves of azihromycin in healthy volunteers after oral administration of azihromycin preparations

表3 6廠家生產(chǎn)的阿奇霉素制劑在人體內的藥動學參數(shù)比較Tab 3 Comparison of the pharmacokinetics parameters of azihromycin preparations from 6 manufacturers in human body

生物利用度是反映藥物活性成分吸收進入體內的程度的指標。目前，大家都認識到相同活性成分的仿制產(chǎn)品要替代其他原創(chuàng)制劑進入臨床使用時，應與原創(chuàng)制劑有生物等效性，即生物利用度相近似。本研究結果表明，各生產(chǎn)廠家的生物等效性相差較大，提示各制劑使用后被吸收的速度和程度不一，可能對使用者的治療目的造成一定影響，值得生產(chǎn)廠家在制劑進入市場前進一步驗證其生物利用度。

[1]陳新謙，金有豫，湯 光主編.新編藥物學[M].第15版.北京:人民衛(wèi)生出版社，2005:90.

[2]張 青，郭蓓寧，張嬰元.阿奇霉素臨床藥代動力學研究[J]. 中國臨床藥理學雜志，1996，12（2）:89.

[3]賈琳靜，喬海靈，張莉蓉，等.阿奇霉素顆粒劑的健康人體藥物動力學和相對生物利用度[J].河南醫(yī)科大學學報，2001，36（6）:712.

[4]國家藥典委員會編.中華人民共和國藥典（二部）[S].2000年版.北京:化學工業(yè)出版社，附錄ⅪA:81.

[5]張治錟編著.抗生素藥品檢驗[M].北京:人民衛(wèi)生出版社，1987:34.