黃 振,李 楠,崔 月
厄貝沙坦片是市場上常見的抗高血壓藥物,價格較高,假劣藥品較多。筆者采用化學方法快速鑒別厄貝沙坦片,現(xiàn)報道如下。
1.1 儀器 薄層板,展開缸。
1.2 藥品與試劑 厄貝沙坦片(安博維,杭州賽諾菲安萬特民生制藥有限公司,批號:06121041512,0.15 g)、安博維(制藥公司同上,批號:07041171535,0.15 g)、安博維(制藥公司同上,批號:06121051512,0.15 g)、甘悅喜(南京長澳制藥有限公司,批號:070404,75 mg)、格平(修正藥業(yè)集團股份有限公司,批號:070302,150 mg)。
1.3 試劑 三氯甲烷、甲醇、無水乙醇、濃氨等均為市售分析純。
2.1 溶解度 本品在甲醇或乙醇中易溶,在水中略溶[1]。
2.2 化學反應機理 ①與碘化鉀-碘試液發(fā)生生物堿的沉淀反應(棕色沉淀);②肼結構與硝酸銀反應(白色沉淀)[2]。
2.3 化學反應鑒別 供試品溶液的制備:取本品細粉適量,加無水乙醇適量,制成約20 mg/mL的溶液,搖勻,濾過,取濾液即得。對照品溶液的制備:取厄貝沙坦對照品適量,加無水乙醇適量,制成約20 mg/mL的溶液,振搖使溶解,即得??瞻兹芤旱闹苽?以淀粉代替樣品,按照供試品溶液的制備方法操作。①取供試品溶液1 mL,加稀鹽酸1滴,逐滴滴加碘化鉀-碘試液,生成紅棕色沉淀,振搖即消失,加至1 mL后,振搖沉淀不消失。見圖1。②取供試品溶液1 mL,加硝酸銀試液2滴,生成白色沉淀。見圖2。
2.4 薄層色譜鑒別 供試品溶液的制備:取本品細粉適量,加無水乙醇適量,制成約20 mg/mL的溶液,搖勻,濾過,取濾液即得。對照品溶液的制備:取厄貝沙坦對照品適量,加無水乙醇適量,制成約20 mg/mL的溶液,振搖使溶解,即得。參比物溶液的制備:3 mg/mL的氫氯噻嗪熱乙醇溶液(取氫氯噻嗪對照品3 mg,加熱乙醇1 mL,振搖溶解,即得)。
圖1 供試品溶液化學反應鑒別
圖2 供試品溶液化學反應鑒別
操作方法:取參比物溶液及供試品溶液各2 μL,點樣于硅膠 GF254板(快檢專用薄層板)。將三氯甲烷∶甲醇∶氨水(20∶7∶0.7)混合液5 mL 倒入層吸缸中,將點樣完畢的薄層板放入,待展開前沿至距原點約8 cm處,將板取出,待展開劑揮盡,在254 nm紫外燈下觀察。見圖3。
圖3 薄層色譜圖
結果判斷:參比氫氯噻嗪 Rf值為0.26~0.46;供試品中顯示主斑點的絕對Rf值為0.43~0.69;與氫氯噻嗪的相對Rf值為1.28~1.72。若超出該范圍,則樣品為可疑品種。
日內(nèi)(3 次/d)、日間(3 d)、溫度(20、30 ℃)及展距(6、8 cm)的樣品Rf值。見表1。
表1 樣品的Rf值考察
本文的快檢方法均采用溶液反應,即采用合適的溶劑溶解并提取樣品,使之成為該樣品的溶液,避免了不同廠家、不同劑型中各種輔料的干擾,使官能團反應更具專屬性,并結合薄層色譜法的Rf值和相對參比樣品的Rf值,加以驗證,使鑒別結果更加準確。
由于考慮到全國各地區(qū)溫、濕度的差異,本文考察了不同溫度(20~30℃)和不同濕度(56% ~65%)及展距對薄層結果的影響,結果中的絕對Rf值有一定的差異,但相對Rf值比較穩(wěn)定,再結合顏色反應的結果綜合判斷,符合快檢的基本要求。
在薄層色譜法中,展距分別選用了6 cm、8 cm進行展開,并進行了3次/d,連續(xù)3 d的系統(tǒng)實驗方法,進行了相對標準偏差的運算。
滴加碘化鉀-碘試液時,應逐滴滴加,并注意觀察反應現(xiàn)象。
本研究以反應機理明確、快速、簡便、通用、低毒、環(huán)保為原則,經(jīng)過多次實驗及篩選,確定了厄貝沙坦片的化學快速鑒別方法,便于推廣和使用。
[1] 李端,殷明.藥學類專業(yè)藥理學[M].第5版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2003:5.
[2] 中國藥典[S].2005年版.