人參、西洋參和三七提取物抗凝血活性的研究

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(吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)中藥材學(xué)院，吉林 長春 130118)

人參(RadixetRhizomaGinseng)、西洋參(RadixPanacisQuinquefolii)和三七(RadixetRhizomaNotoginseng)為五加科人參屬植物人參、西洋參和三七的干燥根或根莖。其活性成分雖相似，但確有著不同的性味和功能主治。中醫(yī)認(rèn)為人參性微溫，西洋參性涼，二者多被用作扶正固本的“氣分藥”，其次才是“血分藥”，而三七性溫，多用作“血分藥”，有散瘀止血和消腫定痛的功效[1]。

有研究表明，人參總皂苷表現(xiàn)出較強的抑制血小板活性，三七次之，西洋參最差，抗血栓活性順序為三七、人參和西洋參。并且人參皂苷Rg1表現(xiàn)出強烈的抗血小板活性,甚至超過傳統(tǒng)抗血小板藥物阿司匹林[2]。三七中含有大量的人參皂苷Rg1,西洋參含量最少。并且Rg2等多種皂苷也表現(xiàn)出了一定的抗血小板活性[3]。人參、西洋參和三七的Rg1和Rg2含量[4]如表1所示。

表1 人參、西洋參和三七的Rg1和Rg2含量

血小板參與了全血的凝血過程和血栓的形成，血漿內(nèi)的各種凝血因子也參與了整個過程[5]。因此,本實驗測定了人參、西洋參和三七水總提物和人參皂苷Rg1和Rg2對血漿APTT、PT和TT的影響。

1 材料與方法

1.1 材料 實驗用藥材人參、西洋參和三七由吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)中藥材學(xué)院提供，經(jīng)李長田副教授鑒定。全血和0.109 mol/L的枸櫞酸鈉按9∶1的比例混勻，3 000 r/min離心處理10 min,上清即為乏血小板血漿(PPP)。凝血指標(biāo)檢測單位為吉林大學(xué)中日聯(lián)誼醫(yī)院血液室，凝血儀型號為BECKMAN ACL 9000。

1.2 方法

1.2.1 人參、西洋參和三七水提物的制備 分別取10 g人參、西洋參和三七粉末,加入10倍蒸餾水煎煮30 min，離心取上清液，藥渣重復(fù)煎煮2次，合并提取液并將其濃縮至浸膏。按1、0.5 mg/mL分別配置上述提取物的水溶液。

1.2.2 人參皂苷Rg1和Rg2的制備 人參皂苷Rg1和Rg2由本實驗室制備,并經(jīng)檢測純度超過98%。按1、0.5 mg/mL分別配置Rg1和Rg2的DMSO溶液。

1.2.3 人參、西洋參和三七水總提物及人參皂苷Rg1和Rg2抗凝血活性的測定 樣品組共分5組：1 mg/mL人參、西洋參和三七水提物溶液；0.5 mg/mL人參、西洋參和三七水提物溶液；1 mg/mL Rg1和Rg2 DMSO溶液；0.5 mg/mL Rg1和Rg2 DMSO溶液;水和DMSO。健康志愿者25例，分為5組,每組分別測定含有上述組別組分的抗凝血活性。每人取全血3 mL，制備成乏血小板血漿。0.45 mL血漿和0.05 mL相應(yīng)提取物溶液混勻，30 min內(nèi)測定含有提取物血漿APTT、PT、TT值[6]。

2 結(jié)果

含人參、西洋參和三七水總提物有提取物血漿的APTT、PT、TT值如表1所示。含有不同濃度人參、西洋參和三七水總提物血漿的APTT、PT值均為人參水提物>三七水提物>西洋參水提物,且含量0.05 mg/mL值高于0.1 mg/mL，0.1 mg/mL的APTT值低于空白對照。提取物濃度0.05 mg/mL時，含提取物血漿的TT值為人參水提物>三七水提物≈西洋參水提物;提取物濃度0.1 mg/mL時，含提取物血漿的TT值為人參水提物<三七水提物≈西洋參水提物。含0.1 mg/mL人參水提物血漿的TT值低于0.05 mg/mL的值，西洋參和三七相反。

含人參皂苷Rg1和Rg2血漿的APTT、PT、TT值如表2所示。含有不同濃度人參皂苷Rg1和Rg2血漿的APTT、PT值均為Rg2>Rg1，且含量0.05 mg/mL的值高于0.1 mg/mL。濃度為0.05 mg/mL時，含人參皂苷Rg1和Rg2血漿的TT值為Rg2>Rg1；濃度0.1 mg/mL時，Rg2

表2 人參、西洋參和三七水提物抗凝血活性

表3 人參皂苷Rg1和Rg2抗凝血活性

3 討論

人參、三七均表現(xiàn)出較強的抗血小板活性和抗血栓活性，西洋參最弱，并且在3項凝血指標(biāo)的測定中發(fā)現(xiàn)，除提取物終濃度為0.1 mg/mL血漿的TT值西洋參最大外，其它含同濃度提取物血漿的APTT、PT和TT均為西洋參最短。另外，人參皂苷Rg1和Rg23項指標(biāo)中均表現(xiàn)出較強的抗凝血活性。三七在3項凝血指標(biāo)的測定中，表現(xiàn)出較強的抗凝血活性，雖然多項指標(biāo)次于人參,但三七中2種單體皂苷特別是Rg1的含量最高，加之Rg1表現(xiàn)出強烈的抗血小板和抗血栓活性，甚至超過了阿司匹林，因此通常被用于“血分藥”。西洋參表現(xiàn)出的抗凝血活性最弱，Rg1的含量也最少。人參2種皂苷的含量遠(yuǎn)不及三七，但在抗血小板和3項凝血指標(biāo)測試中，人參多表現(xiàn)出了最強的活性[8-9]。因此，雖然人參和西洋參同被用作扶正固本的“氣分藥”，但在用藥方式和適用范圍上也不完全相同，西洋參比人參更寬泛，且較少出現(xiàn)不良反應(yīng)[10]。

在3項凝血指標(biāo)的測試中含人參、西洋參和三七水總提物和人參皂苷Rg1和Rg2血漿的APTT和PT值均為終濃度0.05 mg/mL高于0.1 mg/mL，而含人參水提物和Rg2血漿的TT值為終濃度0.05 mg/mL低于0.1 mg/mL。這是由于3種藥材中人參的Rg2含量是最低的，因此，Rg2的這種性質(zhì)對人參TT值影響更小。

由于本實驗為體外實驗，筆者認(rèn)為，僅通過體外實驗判定某種物質(zhì)的藥理活性是不全面的。關(guān)于人參、西洋參和三七的體內(nèi)抗凝血活性還有待進(jìn)一步研究。

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