飼糧添加L－精氨酸或N－氨甲酰谷氨酸對感染PRRSV妊娠母豬繁殖性能及免疫功能的影響

楊 平 吳 德* 車煉強(qiáng) 方正鋒 林 燕譙仕彥 李 勇 曾 毅 蘇 祥

(1.四川農(nóng)業(yè)大學(xué)動物營養(yǎng)研究所，動物抗病營養(yǎng)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，雅安 625014;2.中國農(nóng)業(yè)大學(xué)國家飼料工程技術(shù)研究中心，北京 100193;3.廣西商大科技有限公司，南寧 530105)

飼糧添加L－精氨酸或N－氨甲酰谷氨酸對感染PRRSV妊娠母豬繁殖性能及免疫功能的影響

楊 平1吳 德1*車煉強(qiáng)1方正鋒1林 燕1譙仕彥2李 勇3曾 毅3蘇 祥3

(1.四川農(nóng)業(yè)大學(xué)動物營養(yǎng)研究所，動物抗病營養(yǎng)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，雅安 625014;2.中國農(nóng)業(yè)大學(xué)國家飼料工程技術(shù)研究中心，北京 100193;3.廣西商大科技有限公司，南寧 530105)

本文旨在研究飼糧添加L－精氨酸或N－氨甲酰谷氨酸(N-carbamyl glutamate，NCG)對感染豬繁殖與呼吸綜合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus，PRRSV)妊娠母豬繁殖性能及免疫功能的影響。選用3～5胎感染PRRSV的母豬(長白×大約克)60頭，隨機(jī)分為3組，每組20頭，單欄飼養(yǎng)。試驗(yàn)豬妊娠第30～90天分別飼喂含1.7%L－丙氨酸(對照組)、1.0%L－精氨酸和0.1%NCG的等氮飼糧，妊娠第91天至分娩飼喂對照組飼糧。妊娠第30、90和110天早上采食后2 h收集母豬血樣。試驗(yàn)結(jié)果表明:與對照組相比，1%L－ 精氨酸添加組窩產(chǎn)活仔數(shù)提高0.89 頭(P＜0.05)，窩活仔重提高1.02 kg(P＞0.05)，0.1%NCG添加組窩產(chǎn)活仔數(shù)提高0.33頭(P＞0.05);1.0%L－精氨酸添加組和0.1%NCG添加組妊娠第90天母豬血清免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白M(IgM)和PRRSV抗體水平顯著升高(P＜0.05)，血漿尿素濃度顯著降低(P＜0.05);1.0%L－精氨酸添加組妊娠第90天母豬血漿蛋氨酸、精氨酸、鳥氨酸、脯氨酸濃度顯著升高(P＜0.05)，妊娠第110天母豬血清IgG水平顯著升高(P＜0.05);1.0%L－精氨酸添加組和0.1%NCG添加組母豬繁殖性能無顯著差異(P＞0.05)，但1.0%L－精氨酸添加組妊娠第90天母豬血漿蛋氨酸、精氨酸、鳥氨酸濃度及血清IgG水平顯著高于0.1%NCG添加組(P＜0.05)。結(jié)果提示:飼糧添加L－精氨酸或NCG能改善妊娠母豬繁殖性能，其作用途徑可能與飼糧中L－精氨酸或NCG可以提高母豬體內(nèi)部分氨基酸利用率及免疫力有關(guān)。

L－精氨酸;NCG;PRRSV;妊娠母豬;繁殖性能;免疫

母豬產(chǎn)仔數(shù)的增加將有助于提高母豬繁殖效率和經(jīng)濟(jì)效益。妊娠母豬感染豬繁殖與呼吸綜合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus，PRRSV)會引起母豬早產(chǎn)、死胎、流產(chǎn)及產(chǎn)弱仔等繁殖障礙，帶來巨大的經(jīng)濟(jì)損失［1］。近年來國內(nèi)外許多研究證實(shí)通過飼糧添加精氨酸可顯著提高母豬窩產(chǎn)活仔數(shù)和窩活仔重［2－3］，然而，Li等［4］研究發(fā)現(xiàn)精氨酸有降低妊娠早期母豬胚胎存活的作用。因此，精氨酸對妊娠母豬繁殖成績的提高作用可能發(fā)生在妊娠中后期。同時研究還發(fā)現(xiàn)，精氨酸對改善機(jī)體免疫功能起著重要作用［5－6］。N － 氨甲酰谷氨酸(N-carbamyl gluta-mate，NCG)作為尿素循環(huán)中鳥氨酸生成瓜氨酸的中間體N－乙酰谷氨酸(NAG)的代謝穩(wěn)定類似物，是精氨酸內(nèi)源合成限速酶——氨甲酰磷酸合成酶－1(CPS-1)的激活劑，能促進(jìn)精氨酸的合成。不過，飼糧添加精氨酸或NCG對感染PRRSV母豬弱仔率、死胎率、窩產(chǎn)活仔數(shù)的影響未見報道。因此，本試驗(yàn)旨在探討飼糧添加L－精氨酸或NCG是否會通過影響母豬體內(nèi)代謝過程和提高免疫力進(jìn)而影響感染PRRSV母豬的繁殖性能。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

L－精氨酸鹽酸鹽和L－丙氨酸，純度≥98.5%(購于北京嘉康源科技有限公司);NCG純度為50%，由國家飼料工程技術(shù)研究中心提供。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計與分組

選用3～5胎感染 PRRSV(檢測方法:RTPCR，見圖1)的母豬(長白×大約克)60頭，妊娠第1～29天飼喂相同的對照組飼糧，妊娠第30天，按體況將母豬隨機(jī)分為3組，每組20頭，單欄飼養(yǎng)。妊娠第30～90天分別飼喂含1.7%L－丙氨酸(對照組)、1.0%L－ 精氨酸和0.1%NCG 的飼糧，妊娠第91天至分娩飼喂對照組飼糧，對照組飼糧添加1.7%L－丙氨酸以滿足等氮平衡需要，試驗(yàn)共計84 d。

1.3 試驗(yàn)飼糧

試驗(yàn)飼糧參照美國NRC(1998)妊娠母豬營養(yǎng)需要進(jìn)行配制。飼糧配方氨基酸平衡參考Dourmad等［7］。對照組和0.1%NCG 添加組飼糧精氨酸水平為0.73%，1.0%L－精氨酸添加組為1.54%(計算值)。飼糧組成及營養(yǎng)水平見表1。

1.4 飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)在廣西某豬場進(jìn)行，妊娠母豬采用限位欄飼養(yǎng)，妊娠第1～29天根據(jù)母豬體況進(jìn)行飼喂［(1.8 ～2.0)kg/d］;妊娠第 30 天按試驗(yàn)設(shè)計給母豬分別飼喂各組飼糧，試驗(yàn)期間每頭母豬平均日采食量為 2.5 kg/d，分 2次飼喂(07:00和18:00)，母豬在分娩前1周由妊娠舍進(jìn)入分娩舍，試驗(yàn)過程中因繁殖失敗(返情、流產(chǎn)、空懷)、疾病問題的母豬將會被淘汰。飼養(yǎng)管理遵循規(guī)模化豬場管理制度進(jìn)行，每天記錄溫度、濕度，觀察母豬采食情況及健康狀況。

1.5 血樣收集

每組選擇10頭母豬，妊娠第30、90和110天采食后2 h［8］用2種滅菌真空采血管(無任何添加劑的血清收集管和含肝素鈉的血漿收集管)耳緣靜脈采血各5 m L，血樣靜置10～15 m in，即刻3 000 r/m in離心4～5 m in，將分離得到的血清和血漿分裝于0.2 m L EP管中，于－20℃冷凍保存待測血漿氨基酸、尿素和總蛋白濃度及血清免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白M(IgM)和PRRSV抗體水平。

1.6 指標(biāo)測定及方法

1.6.1 血清PRRSV 檢測

1.6.1.1 材料 每個組隨機(jī)抽取6頭母豬血樣(共計30%試驗(yàn)豬);PRRSV株、陽性及陰性病料均由四川農(nóng)業(yè)大學(xué)生物技術(shù)中心提供。

1.6.1.2 試劑 主要試劑 RNAiso、RT(反轉(zhuǎn)錄)試劑盒、2×Tap PCR Master Mix、DNA 分子質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)DL 2000等PCR反應(yīng)試劑均購于大連寶生物公司。

1.6.1.3 引物設(shè)計與合成 參照曹洪志等［9］建立的三聯(lián)PCR診斷豬3種繁殖障礙疾病的方法對PRRSV檢測的引物進(jìn)行RT-PCR檢測，擴(kuò)增基因片段為363 bp。對GenBank中已經(jīng)發(fā)表的10株P(guān)RRSV的M基因序列進(jìn)行同源性分析，利用Prem ier 5.0和Oligo 6.0軟件進(jìn)行PCR引物設(shè)計，上游引物為:5'-CCGACTGCTAGGGCTTCT-3'，下游引物為:5'-TATCTGCCACCCAACACG-3'。該引物由上海英俊生物技術(shù)有限公司合成。

1.6.1.4 病毒 RNA的提取及反轉(zhuǎn)錄 按照RNAiso Regent試劑盒說明書提取血清樣品中病毒RNA，置于－20℃保存?zhèn)溆?。按照RT(反轉(zhuǎn)錄)試劑盒說明合成cDNA，采用10μL體系進(jìn)行:5 ×PrimeScriptTMBuffer 2 μL，PrimeScriptTMRT Enzyme Mix 0.5 μL，random 6 mers 0.5 μL;反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)程序:37℃ 20 m in，85℃ 5 s，4℃保存。

1.6.1.5 PCR反應(yīng) 反轉(zhuǎn)錄完成后，采用20μL的反應(yīng)體系進(jìn)行PCR擴(kuò)增，反應(yīng)體系為:10μL 2×Tap PCR Master Mix，3μL反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物cDNA，上、下游引物各 0.5 μL，6μL ddH2O。按照下列條件進(jìn)行擴(kuò)增:95.5℃預(yù)變性5 m in;95℃循環(huán)變性30 s，55 ℃退火復(fù)性30 s，72 ℃延伸30 s，30個循環(huán)，72℃末延伸10 m in，4℃保存。取擴(kuò)增產(chǎn)物于10 g/L瓊脂糖凝膠中電泳30 m in后在凝膠成像系統(tǒng)中進(jìn)行觀察。

表1 飼糧組成及營養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))Table 1 Composition and nutrient levels of diets(air-dry basis) %

1.6.2 繁殖性能

在母豬分娩當(dāng)日，詳細(xì)記錄每頭母豬產(chǎn)仔數(shù)、活仔數(shù)、弱仔數(shù)(初生體重＜900 g)、木乃伊數(shù)(早期死胎未形成完整胎兒的不作產(chǎn)仔數(shù)記錄)、死胎數(shù)、初生個體重［在母豬分娩完1 h內(nèi)完成仔豬單個逐一稱重(木乃伊不記重，死胎和活仔均記重)］、初生窩重。

1.6.3 血液指標(biāo)

血漿游離氨基酸濃度采用四川農(nóng)業(yè)大學(xué)動物營養(yǎng)研究所日立L－8800氨基酸全自動分析儀(日本日立公司)進(jìn)行測定(共檢測15種氨基酸);血漿尿素和總蛋白濃度采用TMS1024i全自動生化分析儀(日本東京貿(mào)易公司)測定，所用試劑購于邁瑞生化試劑有限公司;采用豬酶聯(lián)免疫吸附測定法(enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA)測定血清PRRSV抗體水平，試劑盒由南京建成生物研究所提供;采用免疫透射比濁法測定血清IgG、IgM水平，試劑盒由浙江伊利康生物技術(shù)有限公司提供。

1.7 數(shù)據(jù)處理

由于試驗(yàn)過程中有9頭母豬被淘汰，最終進(jìn)入數(shù)據(jù)統(tǒng)計的共計51頭:對照組、1.0%L－精氨酸添加組和0.1%NCG添加組分別為18、17和16頭。試驗(yàn)數(shù)據(jù)用Excel 2010初步整理后，采用SPSS 16.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行重復(fù)數(shù)不等的單因素方差分析，并采用Duncan氏檢驗(yàn)進(jìn)行多重比較和顯著性分析，弱仔率和死胎率采用χ2檢驗(yàn)。除χ2檢驗(yàn)指標(biāo)外，所有數(shù)據(jù)均以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，將P＜0.05作為顯著性評判標(biāo)準(zhǔn)。

2 結(jié)果

2.1 血清PRRSV檢測結(jié)果

由圖1可知，對編號1～6的對照組母豬血清進(jìn)行PRRSV抗原RT-PCR檢測，結(jié)果顯示均為陽性，剩余樣品檢測結(jié)果與圖1結(jié)果一致。由于該場爆發(fā)過豬繁殖與呼吸綜合征(PRRS)，定期對母豬血樣收集進(jìn)行RT-PCR檢測，發(fā)現(xiàn)抽樣母豬均為感染PRRSV。本試驗(yàn)中每組隨機(jī)抽取30%試驗(yàn)?zāi)肛i血樣進(jìn)行血清PRRSV抗原分析，抽樣母豬陽性率達(dá)到100%，抽樣結(jié)果提示所有試驗(yàn)?zāi)肛i均為感染PRRSV。

圖1 母豬血清PRRSV PCR檢測代表圖Fig.1 Representative picture of PRRSV PCR detection in serum of sows

2.2 飼糧添加L－精氨酸或NCG對妊娠母豬繁殖性能的影響

由表2可知，與對照組相比，1.0%L－精氨酸添加組窩產(chǎn)活仔數(shù)提高0.89頭(P＜0.05)，窩活仔重提高1.02 kg(P=0.065)，死胎率有所降低，但差異不顯著(P＞0.05);0.1%NCG添加組窩產(chǎn)活仔數(shù)提高0.33頭(P＞0.05)，弱仔率和死胎率均降低，但差異不顯著(P＞0.05)。1.0%L－精氨酸添加組與0.1%NCG添加組之間均無顯著差異(P＞0.05)，但前者窩產(chǎn)活仔數(shù)、初生窩活仔重、弱仔率均高于后者，死胎率低于后者。

2.3 飼糧添加L－精氨酸或NCG對妊娠母豬血漿游離氨基酸濃度的影響

由表3可知，與對照組相比，1.0%L－精氨酸添加組和0.1%NCG添加組妊娠第30天和第110天母豬血漿游離丙氨酸、蛋氨酸、精氨酸、鳥氨酸、脯氨酸濃度無顯著差異(P＞0.05);1.0%L－精氨酸添加組妊娠第90天母豬血漿游離蛋氨酸、精氨酸、鳥氨酸、脯氨酸濃度顯著升高(P＜0.05)，丙氨酸濃度顯著降低(P＜0.05);0.1%NCG添加組妊娠第90天母豬血漿游離精氨酸、鳥氨酸、脯氨酸濃度有增加趨勢，但差異不顯著(P＞0.05);1.0%L－ 精氨酸添加組較 0.1%NCG 添加組妊娠第90天母豬血漿游離蛋氨酸、精氨酸、鳥氨酸濃度顯著升高(P＜0.05)，丙氨酸濃度顯著降低(P＜0.05)，脯氨酸濃度有增加趨勢，但差異不顯著(P＞0.05)。除此之外，3個組之間其他血漿游離氨基酸濃度之間均無顯著差異(P＞0.05)。

表2 飼糧添加L－精氨酸或NCG對妊娠母豬繁殖性能的影響Table 2 Effects of dietary supplementation with L-arginine or N-carbamylglutamate on reproductive performance of pregnant sows

表3 飼糧添加L－精氨酸或NCG對對妊娠第30、90和110天母豬血漿游離氨基酸濃度的影響Table 3 Effects of dietary supplementation with L-arginine or N-carbamylglutamate on plasma concentrations of free am ino acids in sow s at day 30，90 and 110 of gestation μmol/L

2.4 飼糧添加L－精氨酸或NCG對妊娠母豬血漿總蛋白和尿素濃度的影響

由表4可知，與對照相比，1.0%L－精氨酸添加組和0.1%NCG添加組妊娠第30天和第110天母豬血漿尿素濃度無顯著差異(P＞0.05)，妊娠第90天母豬血漿尿素濃度顯著降低(P＜0.05);1.0%L－精氨酸添加組較0.1%NCG添加組母豬血漿尿素濃度無顯著差異(P＞0.05)。另外，3個組之間血漿總蛋白濃度無顯著差異(P＞0.05)。

表4 飼糧添加L－精氨酸或NCG對妊娠第30、90和110天母豬血漿總蛋白和尿素濃度的影響Table 4 Effects of dietary supplementation with L-arginine or N-carbam ylglutamate on plasma concentrations of total protein and urea in sows at day 30，90 and 110 of gestation

2.5 飼糧添加L－精氨酸或NCG對妊娠母豬血清免疫球蛋白和PRRSV抗體水平的影響

由表5可知，與對照組相比，1.0%L－精氨酸添加組和0.1%NCG添加組妊娠第30天和第110天母豬血清PRRSV抗體和IgM水平無顯著差異(P＞0.05)，妊娠第90天母豬血清 PRRSV抗體、IgG和IgM 水平顯著提高(P＜0.05);1.0%L－精氨酸添加組妊娠第110天母豬血清IgG水平顯著提高(P＜0.05)，0.1%NCG 添加組有提高趨勢，但無顯著差異(P＞0.05);1%L－精氨酸添加組較0.1%NCG添加組妊娠第90天母豬血清IgG水平顯著提高(P＜0.05)，但妊娠第30、90和110天PRRSV抗體和IgM水平均無顯著差異(P＞0.05)。

表5 飼糧添加L－精氨酸或NCG對妊娠第30、90和110天母豬血清IgG、IgM及PRRSV抗體水平的影響Table 5 Effects of dietary supplementation with L-arginine or N-carbamylglutamate on serum levels of IgG，IgMand PRRSV-Ab in sows at day 30，90 and 110 of gestation

3 討論

在妊娠早期母豬感染PRRSV時，胚胎對PRRSV有一定的封阻作用，妊娠中后期經(jīng)胎盤感染PRRSV的可能性增加，最終導(dǎo)致母豬產(chǎn)弱仔和死胎增加［1］。本試驗(yàn)研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)妊娠中期給感染PRRSV母豬飼糧添加精氨酸或NCG降低了死胎率，窩產(chǎn)活仔數(shù)和窩活仔重增加，且精氨酸的作用尤為明顯。精氨酸是母豬妊娠早期胎兒最豐富的氮載體和胎兒組織中沉積最豐富的氨基酸之一［10］，同時在尿囊液中含量最高［11］，這些都說明精氨酸在胎兒存活、生長及發(fā)育中的重要性。Mateo等［2］在妊娠第30～114天給母豬飼糧添加1%精氨酸顯著提高了窩產(chǎn)活仔數(shù)和窩活仔重。Ramaekers等［3］在妊娠第14～28天給母豬飼喂添加1%精氨酸飼糧，結(jié)果增加了1頭活產(chǎn)仔數(shù)。在大鼠上的研究也發(fā)現(xiàn)精氨酸可以提高窩產(chǎn)仔數(shù)［12］。以上結(jié)果都未發(fā)現(xiàn)精氨酸影響個體初生重［2－3］，但由于產(chǎn)仔數(shù)的增加，因此窩活仔重提高。由此可見，精氨酸的添加時間對妊娠母豬繁殖性能的影響起著重要作用，尤其在妊娠后期精氨酸對感染PRRSV母豬繁殖性能的影響有待進(jìn)一步研究。另外，NCG作為精氨酸內(nèi)源合成途徑中關(guān)鍵酶CPS-1的有效激活劑，能增加精氨酸的內(nèi)源合成。本試驗(yàn)研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)飼糧添加NCG窩產(chǎn)活仔數(shù)只提高0.33頭，這可能與NCG的添加時間及在體內(nèi)不能促進(jìn)大量精氨酸的合成及其代謝產(chǎn)物(鳥氨酸和脯氨酸)的增加有關(guān)。以前研究表明，子宮容積是限制妊娠早期胚胎存活的主要因素，因此影響了胎兒的生長，最終導(dǎo)致活仔數(shù)減少［2］。雖然大部分孕體的損失發(fā)生在胚胎植入期，但本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)妊娠中期飼糧添加精氨酸或NCG降低死胎率，很可能為胎兒的生長和發(fā)育提供了一個有利的子宮內(nèi)環(huán)境［13］。

精氨酸或NCG對窩產(chǎn)活仔數(shù)、窩活仔重的影響可能通過影響體內(nèi)代謝過程進(jìn)而影響妊娠早中期胎盤血管發(fā)生和生長，為整個妊娠期建立一個良好的子宮內(nèi)環(huán)境［14］。本試驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)妊娠第30～90天飼糧添加精氨酸顯著增加了母豬血漿精氨酸及其代謝產(chǎn)物(鳥氨酸和脯氨酸)的含量，從而滿足妊娠中期胎盤快速生長發(fā)育所需，妊娠第60～70天時胎盤達(dá)最大生長［15］。同時，飼糧中添加NCG對母豬血漿精氨酸及其代謝產(chǎn)物(鳥氨酸和脯氨酸)也有提高作用。體外試驗(yàn)也證明，在豬小腸上皮細(xì)胞培養(yǎng)液中添加2 mmol/L NCG，由谷氨酰胺和脯氨酸合成的瓜氨酸分別增加了7.7和0.6倍，也顯著增加了合成精氨酸的產(chǎn)量［16］。和成年鼠的研究相似，飼糧添加精氨酸增加了胎盤和胎兒NO、多胺、膠原合成所需要的鳥氨酸和脯氨酸［17－18］，最終結(jié)果將會增加胎盤血管的發(fā)生和生長，子宮與胎盤血流量、營養(yǎng)物質(zhì)從母體到胎兒的轉(zhuǎn)運(yùn)，從而影響胎兒存活、生長和發(fā)育［16，19］。值得注意的是，精氨酸或NCG的添加沒有影響到大部分氨基酸的吸收，這說明精氨酸或NCG并不會導(dǎo)致氨基酸的不平衡，但對照組和NCG組中丙氨酸含量較高的原因是由于其作為等氮平衡添加到飼糧中，但并不會影響母豬的繁殖性能［20］。另外，我們還發(fā)現(xiàn)飼糧精氨酸的添加顯著增加了血漿蛋氨酸的含量。但是，Mateo等［2］在妊娠母豬飼糧添加精氨酸并未發(fā)現(xiàn)血漿蛋氨酸含量發(fā)生變化，可能是由于動物生理狀態(tài)不同造成的，具體原因有待進(jìn)一步研究。飼糧添加精氨酸或NCG減少了機(jī)體內(nèi)氨基酸的降解，從而減少尿素的生成。Kim等［21］研究表明飼糧添加精氨酸降低了新生哺乳仔豬尿素水平，提高了新生仔豬飼糧蛋白質(zhì)的利用率。本試驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)精氨酸或NCG添加減少了尿素的生成，提高了氨基酸的利用率，但并沒有影響到血漿總蛋白生成，這就說明窩產(chǎn)活仔數(shù)、窩活仔重的增加可能是由于機(jī)體提高了對部分氨基酸利用率，從而為胎兒的生長發(fā)育提供了更有利的條件。

精氨酸是動物體內(nèi)NO合成的唯一前體物質(zhì)，研究表明精氨酸經(jīng)一氧化氮合酶(NOS)催化生成具有生物活性的NO［17］，從而介導(dǎo)免疫反應(yīng)，并且NCG可間接通過精氨酸代謝過程而發(fā)揮作用。因此當(dāng)母豬感染PRRSV時，妊娠中期通過飼糧添加精氨酸或NCG有助于補(bǔ)充通過NO途徑介導(dǎo)的免疫反應(yīng)。免疫球蛋白是體液免疫應(yīng)答中發(fā)揮免疫功能最主要的免疫分子，在保護(hù)胚胎的發(fā)育中起著非常重要的作用。Douillard等［22］研究發(fā)現(xiàn)精氨酸能提高手術(shù)、腫瘤等病理情況下的IgG水平，提示精氨酸能改善機(jī)體的體液免疫功能。本試驗(yàn)中血清IgG和IgM水平顯著增加，這說明母體體液免疫水平升高，有利于胚胎的生長和發(fā)育。但麻名文等［23］在兔上的研究發(fā)現(xiàn)精氨酸并沒有影響血清IgG和IgM水平，這可能與動物種屬和生理狀態(tài)有關(guān)，具體原因還有待進(jìn)一步研究。血清中PRRSV特異性抗體是抑制PRRSV的指示器［24］。本試驗(yàn)研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)精氨酸或NCG均能顯著提高母豬血清PRRSV特異性抗體水平，提示飼糧添加精氨酸或NCG抑制了PRRSV的持續(xù)感染，提高了機(jī)體免疫力。另外，當(dāng)動物感染PRRSV后，可能會通過影響與妊娠相關(guān)細(xì)胞因子水平變化［25－26］，且 TH1/TH2 型細(xì)胞因子比值增加將會導(dǎo)致妊娠失?。?7］。精氨酸可能通過降低TH1/TH2型細(xì)胞因子比值，增強(qiáng)其免疫力，為胎兒的生長和發(fā)育提供一個有利的子宮內(nèi)環(huán)境，降低死胎率，進(jìn)而提高母豬繁殖成績。

4 結(jié)論

飼糧中添加L－精氨酸或NCG能通過提高感染PRRSV母豬體內(nèi)氨基酸的利用率，增強(qiáng)機(jī)體免疫力來降低死胎率，提高窩產(chǎn)活仔數(shù)和窩活仔重，最終改善母豬繁殖性能。

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*Corresponding author，professor，E-mail:pig2pig@sina.com

(編輯 田艷明)

Effects of DietaryL-arginine or N-carbam ylglutam ate Supp lementation on Reproductive Perform ance and Immune Function of PRRSV-infected Pregnant Sows

YANG Ping1WU De1*CHE Lianqiang1FANG Zhengfeng1LIN Yan1QIAO Shiyan2LIYong3ZENG Yi3SU Xiang3
(1.Key Laboratory for Animal Disease-resistance Nutrition of China Ministry of Education，Institute of Animal Nutrition，Sichuan Agricultural University，Ya’an625014，China;2.National Feed Engineering Technology
Research Center，China Agricultural University，Beijing100193，China;3.Guangxi Shangda Technology Co.Ltd.，Nanning530105，China)

The study was conducted to investigate the effects of dietaryL-arginine(Arg)or N-carbamylglutamate(NCG)supplementation on reproductive performance and immune function of porcine productive and respiratory syndrome virus(PRRSV)-infected pregnant sows.At day 30 of gestation，sixty Yorkshire×Landracemultiparous sows with PRRSV infection were selected and random ly assigned into three groups with 20 pigs in each group.Sows in the control group were fed the diet containing 1.7%alanine，and the others in two experimental groups were fed the diets supplemented with 1.0%L-Arg or 0.1%NCG.Sows were fed the control diet from day 91 to 114 of gestation.Blood sampleswere collected after themorning feed for2 h at day 30，90 and 110 of gestation.Compared with the control group，1.0%L-Arg supplementation increased the number of piglets born alive by 0.89(P＜ 0.05)，and live litter birth weight of piglets by 1.02 kg(P＞0.05);0.1%NCG supplementation increased the number of piglets born alive by 0.33(P＞ 0.05);serum levels of IgM，IgG and PRRSV-Ab from 1.0%L-Arg or0.1%NCG supplementation groupswere significantly higher than those from the control group at day 90 of gestation(P＜0.05)，and plasma concentration of urea was significantly lower than that from the control group(P＜0.05);1.0%L-Arg supplementation increased plasma concentrations ofmethionine，arginine，ornithine and proline at day 90 of gestation，and serum level of IgG at day 110 of gestation compared to the control group(P＜0.05);plasma concentrations ofmethionine，arginine，ornithine and proline from the 1.0%L-Arg supplementation group were higher than those from the control group at day 90 of gestation(P＜0.05).However，all of themeasured indices did not differ between the 1.0%L-Arg and 0.1%NCG supplementation groups(P＞0.05)，but plasma concentrations of methionine，arginine and ornithine from the 1.0%L-Arg supplementation group were significantly higher than those from the 0.1%NCG supplementation group at day 90 of gestation(P＜0.05).The results of this study indicate that dietaryL-Arg or NCG supplementation can improve the reproductive performance of pregnant sow s by improving the utilization of am ino acids and immune function.［Chinese Journal of Animal Nutrition，2011，23(8):1351-1360］

L-Arg;NCG;PRRSV;pregnant sows;reproductive performance;immune

S 828;S816.7

A

1006-267X(2011)08-1351-10

10.3969/j.issn.1006-267x.2011.08.014

2011－03－07

楊 平(1986—)，男，四川成都人，碩士研究生，從事動物營養(yǎng)與飼料開發(fā)研究。E-mail:yp20041107@163.com

*通訊作者:吳 德，教授，博士生導(dǎo)師，E-mail:pig2pig@sina.com