林艷青
(秦皇島市農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)督檢驗中心,河北秦皇島066000)
(一)發(fā)病情況2011年7月,秦皇島市昌黎縣城關(guān)某養(yǎng)殖戶飼養(yǎng)的800只貉暴發(fā)了一種以高燒、黃疸、呼吸困難、腹瀉為癥狀,陸續(xù)死亡的病例,3周內(nèi)死亡165只,不分大小,不分公母,通過臨床檢查和實驗室診斷等手段,確診為黃曲霉毒素中毒和附紅細胞體混合感染。
因為當時是雨期,畜主以為是普通感冒、腸炎,便采用穿心蓮、阿米卡星、頭孢拉定、慶大霉素肌肉注射,硫酸粘桿菌素飲水,菌毒敵、84消毒液等消毒和治療手段,但都不能控制病情的發(fā)展,后又懷疑飼料,檢查發(fā)現(xiàn)飼料已過期,有結(jié)塊,但由于購買的飼料較多且以前并沒有發(fā)病,所以一直未換料,根據(jù)畜主介紹檢測人員從料堆中上、中、下三層取料樣3份,新鮮死貉6只,帶回實驗室診斷。
(二)臨床癥狀及病理變化發(fā)病貉病初多數(shù)精神沉郁、厭食,行動遲緩,體溫升高,鼻鏡干燥,開始呈水樣腹瀉;不久發(fā)展為血樣粘液,精神高度沉郁,成年貉有的后軀麻痹,仔貉多數(shù)后軀麻痹,頭歪向一側(cè),繼而出現(xiàn)呼吸困難,可視黏膜黃染,發(fā)現(xiàn)癥狀后1~3 d死亡,有的4~5 d死亡。對死亡4 h內(nèi)的貉進行尸體剖檢,主要病變有:肝腫大3~4倍呈土黃色質(zhì)脆;肺充血、出血間質(zhì)增生,外觀呈大理石樣,肺門淋巴結(jié)腫大,氣管和支氣管黏膜充血;脾臟腫大發(fā)黑,有散在的出血;腎臟土黃色皮質(zhì)有出血點或出血斑;胃黏膜充血、出血有大小不等的潰瘍灶,胃內(nèi)空虛;十二指腸黏膜出血 ,有紫黑色潰瘍;大腸黏膜充血潮紅;心肌水腫增大2~3倍,冠狀溝有出血點。
(三)實驗室診斷針對病貉死前臨床表現(xiàn)和死后剖檢癥狀做如下實驗室檢查。
1.飼料霉菌總數(shù)測定。根據(jù)GB/T 13092-2006 飼料中霉菌總數(shù)的測定方法對采樣飼料3份進行培養(yǎng)檢測,結(jié)果分別為 5.2×105cfu/g、5.9×105cfu/g、6.3×105cfu/g。
2.飼料黃曲霉毒素B1的檢測。
根據(jù)對飼養(yǎng)情況的調(diào)查有針對性的檢測飼料中的黃曲霉毒素,根據(jù)GB/T17480-2008 飼料中黃曲霉毒素B1的檢測,酶聯(lián)免疫吸附法3份飼料的檢出結(jié)果分別為1.5 mg/kg、1.8 mg/kg、2.1 mg/kg。
3.細小病毒、犬瘟熱病毒排查。
刮取2 g病死貉腸道內(nèi)容物用生理鹽水做5倍稀釋,充分振蕩5 min,室溫3 000轉(zhuǎn)/min,離心5 min,取上清液,用細小病毒快速檢測卡和犬瘟熱快速檢測卡進行檢測,結(jié)果全部陰性。
4.附紅細胞體檢測。分別在4片干凈的玻片上各滴加一滴滅菌生理鹽水,用白金耳分別取心臟血、腹股溝內(nèi)側(cè)靜脈血于玻片生理鹽水中以牙簽充分混勻,蓋玻片蓋好,每個部位做2片,低倍鏡下全視野檢測,結(jié)果每個紅細胞表面均有數(shù)量不等的芒刺樣小體附著,紅細胞染蟲率100%。
5.病料涂片鏡檢。無菌,分別取肝臟、脾臟、腎臟、肺臟、心血直接進行涂片,革蘭氏染色、鏡檢,未發(fā)現(xiàn)細菌。
6.組織細菌培養(yǎng)。無菌分別取肝臟、脾臟、腎臟、肺臟、心血等組織,接種于普通瓊脂平皿,24 h37℃培養(yǎng),觀察未見細菌生長。
根據(jù)流行病學(xué)調(diào)查、臨床癥狀、剖檢變化和實驗室檢測可診斷本病例為飼料霉菌毒素中毒與附紅細胞體混合感染。
(四)防治措施
1.立即停止飼喂發(fā)霉飼料,改換新鮮富含蛋白質(zhì)的優(yōu)質(zhì)流體或半流體飼料。
2.徹底清掃貉舍,并用0.2%~0.5%硫酸銅溶液全面噴灑貉舍,飼槽等與貉接觸過的用具要徹底清洗,并用0.2%~0.5%硫酸銅溶液浸泡。
3.失去食欲的病貉用38℃~40℃ 的1:3 000硫酸銅溶液深部灌腸,每次100~200 ml,每天一次,連續(xù)5 d。
4.藍耳紅弓鏈(鹽酸多西環(huán)素)每千克體重肌注0.1 ml,每天一次,連用5 d。注射復(fù)合VB1~2 ml/只,VC注射液1~2 ml/只,每日2次,連用5 d。病貉每只10萬單位的制霉菌素片口服,每天2次。對有食欲的病貉飼料中加入制霉菌素100萬國際單位/kg飼料,氟苯尼考0.2 kg/噸飼料,強力霉素0.2 kg/噸飼料連用一周。每天供給充足的硫酸銅飲水1:3 000,連用5 d。
經(jīng)過采取以上綜合性的防治措施,貉群在7 d內(nèi)死亡現(xiàn)象明顯減少,15 d后未再出現(xiàn)死亡現(xiàn)象。20 d后貉群基本恢復(fù)正常。