不同分期糖尿病腎病患者血清IL-18、CRP水平的變化及意義

唐 靈，梁志清*，劉樹嬌，蘇桂蘭，甄瑞峰

(1桂林醫(yī)學院附屬醫(yī)院，廣西 桂林 541001;2桂林醫(yī)學院)

大量研究表明，炎癥反應在糖尿病腎病(DN)的發(fā)生、發(fā)展中起重要作用［1，2］。IL-18 是活化的單核/巨噬細胞分泌的一種前炎癥因子，與其他炎癥因子一起參與炎癥的級聯(lián)反應［3］。有研究表明，IL-18與糖尿病并發(fā)癥有關［4］。C反應蛋白(CRP)是一種敏感的、非特異性的炎癥標志物，其水平的高低與炎癥反應的程度有關［5］。2009年10月 ～2010年5月，我們觀察了不同分期DN患者血清IL-18、CRP水平的變化，以期為DN的早期診斷提供一定的理論依據(jù)。現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選擇在桂林醫(yī)學院附屬醫(yī)院住院的2型糖尿病(T2DM)患者97例，均符合1999年WHO制定的糖尿病診斷標準，并排除罹患惡性腫瘤、急慢性感染、糖尿病急性并發(fā)癥、糖尿病以外的繼發(fā)性腎臟疾病及長期口服噻唑烷二酮類、調脂類藥物者。根據(jù)尿白蛋白排泄率(UAER)分為3組:正常白蛋白尿組(A組，UAER＜20 μg/min)35例，男16 例、女19 例，年齡(58.16 ±8.81)歲;微量白蛋白尿組(B 組，UAER 20～200 μg/min)30例，男17例、女13 例，年齡(57.71 ±11.43)歲;大量白蛋白尿組(C 組，UAER ＞200 μg/min)32例，男15例、女17例，年齡(54.25±8.37)歲。同期選擇該院健康體檢者35例作為對照組，男19例、女16例，年齡(56.51±9.40)歲。各組性別、年齡具有可比性。

1.2 方法

1.2 標本采集 所有受試者空腹8～12 h，晨起抽靜脈血5 ml，取2 ml采用羅氏全自動生化分析儀檢測空腹血糖(FPG)、血脂、腎功能、糖化血紅蛋白(HbA1c)、CRP。其中，F(xiàn)PG測定采用葡萄糖氧化酶法;HbA1c測定采用膠體濾過法;TG測定采用GPOPOD酶法;TC測定采用膽固醇氧化酶法;HDL-C測定采用直接一步法;LDL-C測定采用過氧化氫酶清除法;血肌酐(SCr)測定采用苦味酸法;尿素氮(BUN)測定采用脲酶紫外速率法;CRP測定采用免疫比濁法。以上試劑均采用Roche配套試劑。另取靜脈血2～3 ml靜置1 h后，3000 r/min離心5 min，分離血清，標記后貯存于－76℃低溫冰箱，采用ELISA法測定血清IL-18。試劑盒由上海西唐生物科技有限公司提供。連續(xù)3 d收集24 h尿，根據(jù)24 h尿量計算UAER，測量3次取平均值。采用高效免疫比濁法檢測尿微量白蛋白。

1.3 統(tǒng)計學方法 采用SPSS17.0統(tǒng)計軟件，計量資料以表示，各組指標比較采用單因素方差分析，兩兩比較采用LSD和SNK檢驗;相關性采用Pearson相關分析。P≤0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 各組臨床資料比較 見表1。

2.2 IL-18、CRP相關影響因素分析 Pearson相關分析顯示，IL-18、CRP均與糖尿病病程、收縮壓、HbA1c、FPG、TG、TC、LDL-C、BUN、SCr、UAER 呈正相關(rIL-18分別為 0.766、0.628、0.568、0.388、0.375、0.400、0.512、0.516、0.698、0.792;rCRP分別為 0.777、0.701、0.416、0.327、0.308、0.307、0.449、0.611、0.817、0.893，P 均 ＜ 0.01)，與 HDL-C 呈負相關(rIL-18= －0.652、rCRP= －0.546，P 均 ＜0.01)，且兩者互呈正相關(r=0.890，P ＜0.01)。

表1 各組臨床資料比較()

注:與對照組比較，△P ＜0.01;與 A組比較，▲P ＜0.01;與 B 組比較，★P ＜0.01

組別 n糖尿病病程(年) BMI(kg/m2) 收縮壓(mmHg)舒張壓(mmHg)FPG(mmol/L) HbA1c(%) TG(mmol/L) TC(mmol/L)HDL-C(mmol/L)對照組 35 — 23.68±1.67 125.28 ±7.03 72.88 ±6.92 4.99±0.38 4.93 ±0.38 1.20 ±0.21 2.99 ±0.43 2.55 ±0.56 A 組 35 2.34±1.19△ 23.16±1.62 127.16 ±7.40 74.63 ±5.39 7.99±1.93△ 8.32±1.29△ 2.58±0.93△ 2.58±0.94△ 2.58 ±0.95△B 組 30 6.56±2.16△▲ 23.27±1.78 130.00 ±9.37 73.88 ±4.89 8.19±2.02△ 8.24±1.58△ 2.62±1.11△ 3.99±1.19△ 1.12 ±0.36△C 組 32 17.41±2.61△▲★ 23.24±1.54 149.47 ±2.05△▲★75.63 ±5.27 8.39±1.93△ 8.37±1.02△ 2.63±0.93△ 4.22±1.05△ 0.98 ±0.33△組別 n LDL-C(mmol/L) BUN(mmol/L) SCr(μmmol/L) UAER(μg/min) IL-18(pg/ml) CRP(mg/L)對照組 35 2.34 ±0.26 5.20 ±0.93 70.27 ±10.89 8.02 ± 2.26 104.24 ±13.56 1.57 ±0.42 A 組 35 2.58 ±0.96△ 2.58 ±0.97 2.58 ± 0.98 2.58 ± 0.99 142.12 ±13.90△ 3.12 ±0.85△B 組 30 4.02 ±0.91△ 5.12 ±0.81 74.65 ± 9.57 92.99 ± 36.29△▲ 170.01 ±15.84△▲ 8.27 ±1.70△▲C 組 32 3.96 ±0.61△ 7.73 ±1.14△▲★ 254.73 ±68.17△▲★539.80 ±120.22△▲★ 212.41 ±15.88△▲★ 16.70 ±2.45△▲★

3 討論

DN是糖尿病一個重要的微血管并發(fā)癥，已成為終末期腎病最主要的原因之一。近年來，炎癥因子和脂肪細胞因子在DN發(fā)生、發(fā)展中的作用受到重視。IL-18作為一種前炎癥因子，參與了炎癥的級聯(lián)反應，可作為DN進展的一個預測因子。其參與DN發(fā)展的機制:①可促進近曲小管上皮細胞轉分化，通過NF-κB胞內信號轉導途徑誘導近端腎小管上皮細胞轉分化;②能調節(jié)腎小球系膜細胞的有絲分裂，促進其產生和釋放前列腺素，進一步引起腎小球微血管改變，在早期腎小球濾過率增高中起非常重要的作用;③可通過巨噬細胞的滲入和活化的另一途徑加重腎小球的損傷;④可導致IL-8、IL-1β、細胞間黏附分子-1等其他前炎癥因子的產生，且可上調細胞間黏附分子-1及內皮細胞的凋亡。本研究表明，IL-18隨著UAER的增加逐漸增高，提示IL-18與DN的發(fā)生、發(fā)展密切相關;糖尿病患者血清IL-18水平高于對照組，且與病程、收縮壓、HbA1c、FPG、TG、TC、LDL-C、BUN、SCr、UAER 呈正相關，與 HDLC呈負相關，這些變量均與胰島素抵抗有關，可見IL-18與糖尿病的發(fā)生及胰島素抵抗有關，與國外研究結果一致［6］。

CRP是糖尿病時參與炎癥反應最主要的蛋白之一，也是最敏感的指標之一。DN是一種低度炎癥反應性疾病，慢性炎癥反應常通過多種途徑致腎臟損傷。Mojahedi等［7］研究發(fā)現(xiàn)，DN患者的UAER隨病程的增加而升高，血清CRP水平相應升高。其CRP升高的機制可能為:①胰島素可阻斷肝臟合成CRP和纖維蛋白原，出現(xiàn)胰島素抵抗或胰島素敏感性降低后，胰島素的生理作用下降，導致血清CRP水平升高;②胰島素發(fā)生抵抗后，TNF表達和合成明顯增加，導致肝臟合成CRP增多，并通過抑制胰島素酪氨酸激酶活性而加重胰島素抵抗，進一步促進炎癥因子產生。腎臟細胞在病理狀態(tài)下可產生CRP、TNF和IL-6等多種炎癥因子，這些因子相互作用引發(fā)機體的氧化應激，使LDL氧化為ox-LDL，后者可直接損傷腎小球內皮細胞。Hotta等［8］認為，糖基化的終末產物結合于腎臟特異性細胞表面受體，誘導IL-6、TNF-α等細胞因子的生成，進而刺激肝臟合成，從而啟動慢性炎癥反應，造成腎小球系膜過度氧化、刺激細胞增殖、系膜增厚等腎功能損害，而CRP本身可直接作用于腎小球小動脈，加重腎小球高濾過高灌注狀態(tài)，引起腎臟損傷。本研究結果表明，糖尿病患者血清 CRP水平高于對照組，提示T2DM患者存在低度炎癥反應狀態(tài);且其血清濃度隨著UAER的增加而逐漸增高，提示CRP參與DN的發(fā)生、發(fā)展有關，與國內外研究結果一致。

綜上所述，我們認為血清IL-18、CRP通過促進炎癥反應，加速DN的發(fā)展，兩者聯(lián)合檢測有助于DNA的早期診斷。

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