CD40-CD40L在兒童過敏性紫癜發(fā)病機制中的作用研究

崔麗霞

（鄭州市婦幼保健院兒科，河南鄭州450012）

過敏性紫癜（HSP）是兒童時期常見的皮膚或其他器官過敏所致血管炎性疾病，表現(xiàn)為皮膚瘀點、瘀斑、關節(jié)酸痛、腹部癥狀和腎臟損害等的綜合征,其病因和發(fā)病機制尚未完全明確。大量研究結果表明，HSP患兒存在免疫調節(jié)功能紊亂，表現(xiàn)為血漿中IgA、IgE水平的異常增高。本研究通過測定HSP患兒治療前后外周血單個核細胞中CD40-CD40L的表達情況，探討其與HSP患兒免疫紊亂發(fā)生的關系，進一步研究HSP的發(fā)病機制，為尋找新的免疫治療手段提供實驗依據。

1 資料與方法

1.1 一般資料

2008年3月～2010年12月收住院的30例HSP患兒均符合HSP的診斷標準[1]。其中男16例，女14例，年齡5～12歲，平均10.4歲，分別于治療前及治療后（潘生丁、維生素C、鈣劑、有感染者加抗感染藥物，有腹痛或尿異常者給予強的松治療）病情緩解時采集靜脈血；對照組30例，選取自門診體檢的健康兒童，年齡4～12歲，男17例，女13例，平均10.1歲。各組年齡、性別比較差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。

1.2 主要試劑

單克隆熒光標記抗體CD40-FITC、CD40L-PE均購自eBioscience公司。

1.3 實驗方法

用密度梯度離心法提取外周血單個核細胞，取100μL單個核細胞懸液分別加入含CD40-FITC、CD40L-PE各10μL的試驗管中，混勻后20～25℃避光孵育20～30min，PBS液洗滌后用流式細胞儀（FACScan，BD公司）檢測。每份標本均設有陰性對照。

1.4 統(tǒng)計學處理

2 結果

與對照組比較，CD40L在治療前和治療后的表達均增高（分別為P＜0.01，P＜0.05），CD40在兩組的表達增高，但差異無統(tǒng)計學定義（P＞0.05）；

CD40L在治療前表達高于治療后（P＜0.05），CD40在治療前表達高于治療后，但差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。見表1。

表1 HSP患兒治療前后外周血單個核細胞CD40、CD40L的表達情況（%）

3 討論

過敏性紫癜是兒童時期最常見的一種由免疫復合物介導的系統(tǒng)性血管炎。血管壁因免疫損傷而導致通透性增高，血液和淋巴液滲出，引起皮膚、黏膜、關節(jié)、胃腸道、腎臟等多部位病變。其臨床特點是血小板不減少性紫癜，常伴關節(jié)腫痛、腹痛、血便、血尿和蛋白尿等，病因尚不明確。有研究指出，病毒、細菌感染或動物性食物蛋白過敏是其最主要的誘因[2]。腎臟受累程度是決定HSP預后的主要因素。Davin等[3]發(fā)現(xiàn)，超過20%的紫癜性腎炎患兒最終發(fā)展為慢性腎衰竭，給患兒及其家屬帶來了極大的經濟和心理負擔?；純杭毙云谘獫{炎癥性細胞因子增高以及淋巴細胞凋亡延遲等均表明該病為免疫反應異常所致的血管炎癥性疾病。實驗證明，過敏性紫癜患者外周血淋巴細胞CD23高表達，且和血清中IgE濃度呈正相關，表明過敏性紫癜患者體內的B淋巴細胞處于高激活狀態(tài)[4]。多項研究表明，HSP患兒急性期存在T細胞功能紊亂，在抗原物刺激下導致B 細胞多克隆活化，在HSP發(fā)病機制中可能具有重要作用。

CD40-CD40L為體內特異性免疫系統(tǒng)重要的一對共刺激分子，其相互作用可以降低抗原活化靜止B細胞的閾值，誘導B細胞增殖、免疫球蛋白類型轉換及抗體的合成和分泌，在機體的體液免疫和細胞免疫反應中均起重要作用，其表達異常與某些炎癥反應、自身免疫性疾病和免疫缺陷病密切相關。本實驗結果顯示，CD40L表達與對照組相比明顯增高，與朱國際[5]研究結果一致，表明CD40L在HSP的發(fā)病過程中可能起到重要作用，由于T細胞功能紊亂，B細胞多克隆激活，CD40L表達異常增高，從而導致免疫球蛋白產生異常。實驗亦顯示治療前表達高于治療后，表明病情緩解時患兒體內免疫調節(jié)紊亂得到糾正，而應用特異性單克隆抗體治療HSP，尤其是目前尚無特效治療的紫癜性腎炎可能會取得較好療效。

[1] 胡亞美，江載芳. 實用兒科學[M].第7版. 北京：人民衛(wèi)生出版社，2002：635.

[2] Sileikiene R，Tamakauskiene E，Baksiene D. Henoch-Schonlein purpuraone of the most common types of systemic vasculitis in childhood[J]. Medicine，2003，39（5）：476-479.

[3] Davin JC，Weening JJ. Henoch-Schonlein purpura nephritis：an update[J]. Eur J Pediatr，2001，160（12）：689-695.

[4] 許天友，羅芳. 過敏性紫癜小兒CD23的表達及意義[J]. 中國當代兒科雜志，2010，12（1）：69-70.

[5] 朱國際. 兒童過敏性紫癜CD40-CD40L的表達[J]. 中國血液流變學雜志，2005，15（1）：115-116.