三聚氰胺導(dǎo)致分化的PC12細(xì)胞凋亡

三聚氰胺是一種在合成樹(shù)脂和塑料中常見(jiàn)的化學(xué)試劑，不用于食品，2008年在中國(guó)被發(fā)現(xiàn)作為奶粉添加劑來(lái)提高蛋白質(zhì)表觀測(cè)量值水平。三聚氰胺易導(dǎo)致嬰兒腎臟功能障礙。但是目前有關(guān)其對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)（CNS）的毒性研究尚少見(jiàn)報(bào)道。因此研究三聚氰胺對(duì)CNS的可能毒性很有必要。

本研究目的是評(píng)估三聚氰胺對(duì)已分化PC12細(xì)胞（常用的神經(jīng)細(xì)胞株）的影響。以不同三聚氰胺濃度（0、33、330、990、1 980和3 300 mg/L）分別處理細(xì)胞12、24和36 h后用MTT法檢測(cè)細(xì)胞的活性，熒光顯微鏡定性觀察Hoechst 33258熒光染色后細(xì)胞核的形態(tài)，流式細(xì)胞儀檢測(cè)Annexin V/PI染色后細(xì)胞的凋亡和壞死率，最后用分光光度法檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)T-SOD水平。

MTT的結(jié)果表明三聚氰胺抑制PC12細(xì)胞的存活能力，且隨三氯氰胺濃度增大和培養(yǎng)時(shí)間延長(zhǎng)，PC12細(xì)胞的存活率逐漸下降。Hoechst 33258染色顯示，用三聚氰胺培養(yǎng)的細(xì)胞染色質(zhì)固縮，聚集于核膜，并且產(chǎn)生更多易染色顆粒，呈典型凋亡形態(tài)。流式細(xì)胞儀測(cè)試結(jié)果顯示，三聚氰胺引起早期細(xì)胞凋亡主要濃度范圍是33～3 300 mg/L，并呈濃度依賴(lài)性，在3 300 mg/L以下幾乎不會(huì)引起分化的PC12細(xì)胞壞死。SOD結(jié)果顯示T-SOD隨濃度增加而減少，SOD作為重要的抗氧化物質(zhì)，其減少使氧化應(yīng)激反應(yīng)增加。

因此，三聚氰胺通過(guò)引起細(xì)胞凋亡來(lái)抑制分化的PC12細(xì)胞的增殖，并且氧化應(yīng)激參與了這一過(guò)程。這項(xiàng)研究有助于估測(cè)三聚氰胺對(duì)神經(jīng)細(xì)胞的毒性，為研究三聚氰胺及其衍生物制品的潛在毒性提供了依據(jù)。

（馬燕燕摘 楊卓審校 譯自Cell Mol Neurobiol，2011，31:65-71）