腎茶膠囊對(duì)大鼠臟器長期毒性的實(shí)驗(yàn)研究﹡

侯志勇 王立強(qiáng) 韓 靜

（1.解放軍第二一一醫(yī)院，黑龍江哈爾濱150080；2.華僑大學(xué)分子藥物學(xué)研究所，福建泉州362021）

腎茶，味苦、涼，為唇形科腎茶屬植物，主要分布于福建、臺(tái)灣、海南、廣西、廣東和云南各省。民間用于治療急、慢性腎炎、膀胱炎、尿路結(jié)石、膽結(jié)石、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等。本課題組依據(jù)新藥臨床前開發(fā)研究中毒理學(xué)研究的技術(shù)指導(dǎo)原則，將腎茶膠囊灌胃給予大鼠，探索該藥長期使用對(duì)各器官的系統(tǒng)影響，發(fā)現(xiàn)毒性靶器官，為臨床試驗(yàn)的安全性提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 受試藥物

腎茶膠囊（SC），華僑大學(xué)分子藥物所提供，批號(hào)：20040510，規(guī)格：0.3g/粒。給藥劑量：腎茶膠囊內(nèi)顆粒1.62、4.86、14.58g/kg。給藥途徑：灌胃給藥，與臨床用藥途徑一致。給藥容量：1.5mL/100g。藥物配制：根據(jù)給藥劑量的不同，用0.5% CMC配制。空白對(duì)照組：給予等容量0.5% CMC。

1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

Wistar大白鼠，雌雄各半，5周齡，沈陽藥科大學(xué)動(dòng)物中心提供，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)許可證：SCXK[遼]2003-008號(hào)；大鼠符合一級(jí)標(biāo)準(zhǔn)；將購入的大鼠飼養(yǎng)1周，挑選行為體征/外觀形態(tài)無異常表現(xiàn)、健康活潑、體重（100±10）g大鼠用于正式試驗(yàn)。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 給藥期限 連續(xù)給藥24周，1次/d，早晨8：00開始給藥，恢復(fù)期4周不給藥。

1.3.2 操作方法 取Wistar大白鼠160只，體重90～110g，雌雄各半。按性別、體重均衡隨機(jī)分成4組，每組40只，即空白對(duì)照組、腎茶顆粒1.62、4.86、14.58g/kg劑量組。給藥組大鼠灌胃給予不同濃度的受試物，1次/d，連續(xù)給藥24周，空白對(duì)照組動(dòng)物灌胃等容量的0.5%CMC-Na溶液（1.5mL/100g）。每天觀察大鼠的行為體征、飲食、糞便、呼吸、自發(fā)活動(dòng)、條件反射等有無異常。

試驗(yàn)進(jìn)行至12周末，各試驗(yàn)組隨機(jī)取10只大鼠，雌雄各半，放血處死后進(jìn)行系統(tǒng)尸解，計(jì)算臟器系數(shù)，并對(duì)臟器進(jìn)行檢查。試驗(yàn)進(jìn)行至24周末，隨機(jī)從每組中取20只大鼠，雌雄各半，動(dòng)物放血處死，進(jìn)行系統(tǒng)尸解，計(jì)算臟器系數(shù)，并對(duì)臟器進(jìn)行檢查。余者停藥4周，常規(guī)飼養(yǎng)，作恢復(fù)期檢查，方法同上。

1.3.3 系統(tǒng)解剖及臟器指數(shù)的檢查 系統(tǒng)解剖后，肉眼觀察主要臟器如心臟、肝臟、脾臟、肺臟、腎臟、腦、子宮、睪丸有無粘連、水腫等異?，F(xiàn)象；并對(duì)主要臟器稱濕重，計(jì)算臟器指數(shù)，即臟器重（g）/體重（g）×100%。

表1 腎茶顆粒對(duì)大鼠臟器系數(shù)的影響（±s）

表1 腎茶顆粒對(duì)大鼠臟器系數(shù)的影響（±s）

組別 性別 時(shí)間 心 肝 脾 肺 腎 腦 睪丸/子宮對(duì)照組 雄性 第12周 0.401±0.043 4.987±0.836 0.594±0.056 0.852±0.113 0.835±0.060 0.484±0.029 1.176±0.126第24周 0.399±0.042 4.181±0.569 0.343±0.070 0.820±0.137 0.735±0.100 0.577±0.055 1.121±0.147恢復(fù)期 0.351±0.061 3.869±0.500 0.440±0.136 0.772±0.093 0.774±0.085 0.435±0.036 0.974±0.119雌性 第12周 0.443±0.050 4.920±0.724 0.430±0.076 0.933±0.233 0.732±0.170 0.587±0.037 0.234±0.055第24周 0.404±0.028 4.587±0.683 0.553±0.136 0.850±0.100 0.805±0.084 0.468±0.046 0.252±0.043恢復(fù)期 0.436±0.034 4.092±0.607 0.427±0.063 0.897±0.184 0.812±0.077 0.559±0.044 0.254±0.140高劑量組 雄性 第12周 0.379±0.019 4.248±0.496 0.643±0.066 0.756±0.136 0.758±0.056 0.464±0.036 1.049±0.161第24周 0.391±0.040 4.367±0.516 0.533±0.127 0.775±0.164 0.752±0.074 0.463±0.045 1.112±0.105恢復(fù)期 0.424±0.090 4.209±0.492 0.571±0.167 0.885±0.278 0.986±0.379 0.487±0.119 0.986±0.148雌性 第12周 0.402±0.027 4.859±0.435 0.478±0.051 0.833±0.106 0.724±0.044 0.574±0.040 0.205±0.104第24周 0.405±0.053 4.443±0.316 0.468±0.183 0.873±0.063 0.732±0.067 0.599±0.039 0.186±0.026恢復(fù)期 0.399±0.042 4.181±0.569 0.343±0.070 0.820±0.137 0.735±0.100 0.577±0.055 0.252±0.043中劑量組 雄性 第12周 0.391±0.040 4.367±0.516 0.533±0.127 0.775±0.164 0.752±0.074 0.463±0.045 1.112±0.105第24周 0.379±0.019 4.248±0.496 0.643±0.066 0.756±0.136 0.758±0.056 0.464±0.036 1.049±0.161恢復(fù)期 0.364±0.036 3.915±0.518 0.528±0.154 0.777±0.202 0.794±0.057 0.415±0.033 0.960±0.055雌性 第12周 0.386±0.065 5.019±0.516 0.459±0.181 0.884±0.250 0.763±0.098 0.566±0.038 0.230±0.074第24周 0.436±0.034 4.092±0.607 0.427±0.063 0.897±0.184 0.812±0.077 0.559±0.044 0.254±0.140恢復(fù)期 0.395±0.048 4.103±0.336 0.326±0.080 0.714±0.110 0.704±0.048 0.560±0.022 0.259±0.048低劑量組雄性 第12周 0.404±0.028 4.587±0.683 0.553±0.136 0.850±0.100 0.805±0.084 0.468±0.046 1.121±0.147第24周 0.399±0.042 4.181±0.569 0.343±0.070 0.820±0.137 0.735±0.100 0.577±0.055 1.049±0.161恢復(fù)期 0.361±0.057 3.901±0.587 0.414±0.159 0.705±0.155 0.806±0.067 0.441±0.083 1.027±0.120雌性 第12周 0.405±0.053 4.443±0.316 0.468±0.183 0.873±0.063 0.732±0.067 0.599±0.039 0.186±0.026第24周 0.379±0.019 4.248±0.496 0.643±0.066 0.756±0.136 0.758±0.056 0.464±0.036 0.252±0.043恢復(fù)期 0.390±0.029 4.398±0.261 0.355±0.047 0.788±0.057 0.738±0.088 0.512±0.035 0.275±0.073

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

全部采用組間t檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

將主要臟器稱其濕重并計(jì)算臟器指數(shù)，各給藥組及恢復(fù)期各組主要臟器系數(shù)與對(duì)照組比較無顯著性差異（P＞0.05），結(jié)果見表1。

3 討論

大鼠灌胃給腎茶膠囊，高劑量組14.58g/kg（約相當(dāng)于人擬臨床等效劑量的90倍），中劑量組4.86g/kg（約相當(dāng)于人擬臨床等效劑量的30倍），低劑量組腎茶顆粒1.62g/kg（約相當(dāng)于人擬臨床等效劑量的10倍），連續(xù)24周。給藥期間，系統(tǒng)尸解、臟器系數(shù)等均無有毒理學(xué)意義的發(fā)現(xiàn)。

各劑量組試驗(yàn)大鼠停藥4周，進(jìn)行恢復(fù)期觀察及檢測，結(jié)果未見延遲性毒副反應(yīng)。

綜上所述，依據(jù)本試驗(yàn)可以認(rèn)為大鼠連續(xù)24周經(jīng)口給予腎茶膠囊的無毒副反應(yīng)的劑量為4.86g/kg（相當(dāng)于生藥量48.6g/kg），約相當(dāng)于腎茶顆粒人擬臨床等效劑量的30倍，可以初步推斷腎茶顆粒擬臨床用量“成人0.3～0.6g/次，3次/d”為安全劑量。

[1] 喻陸，吳凡. 欣腎膠囊延緩大鼠慢性腎功能衰竭實(shí)驗(yàn)研究[J].中國中藥雜志，2006，31（24）：2058-2060.

[2] 王北嬰. 中藥新藥研制與申報(bào)[M]. 北京：中國中醫(yī)藥出版社，2001：255.