大黃提取分離新技術(shù)的研究進展*

劉雅琴

(天津中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院，天津 300192)

大黃為蓼科植物掌葉大黃 (RheumpalmatumL)、唐古特大黃(RheumtanguticumMaxim ex Balf)或藥用大黃 (RheumofficinaleBail1)的干燥根及根莖 ，具有瀉熱通腸，涼血解毒，逐瘀通經(jīng)的功效。為了提高大黃的治療效果，降低副作用，選合理的提取工藝非常必要。大黃提取的傳統(tǒng)方法存在著有效成分損失大、周期長、工序多、提取率低等問題。近年來，一些新的提取技術(shù)被應(yīng)用于大黃提取中，現(xiàn)就該方面進行綜述。

1 微波萃取技術(shù)

微波萃取是利用微波來提高萃取率的一種新技術(shù)。微波加熱屬被提取物內(nèi)部加熱過程，經(jīng)過微波輻射后能富集藥材中有效成分，具有選擇性高、操作時間短、溶劑耗量少、有效成分得率高的特點，應(yīng)用于中藥及天然化合物的生物活性成分提取。

沈嵐等[1]在研究微波提取時，以大黃中總蒽醌的含量為評價指標 ，從提取率與提取速度兩方面對微波萃取與常用提取方法進行比較，結(jié)果表明用微波萃取大黃5 min的提取率已超過超聲提取法60 min的提取率，15 min已達到或接近索氏提取法2 h和水煎法的提取效果。胡秀麗等[2，3]比較了大黃總蒽醌的微波輔助提取、超聲提取和索氏提取方法的提取率，并利用分光光度法測定了提取液中總蒽醌的含量。結(jié)果表明微波輔助提取法的提取率最高(1.91%)，是超聲法的1.13倍 ，是索氏提取法的1.29倍。

2 超聲提取技術(shù)

超聲波是一種彈性機械振動波，能破壞植物藥材的細胞，使溶媒滲透到藥材細胞中，從而加速藥材中的有效成分溶解，以提高有效成分的提取率。

超聲技術(shù)已經(jīng)廣泛應(yīng)用于陸地及海洋植物的藥用成分的提取。張海暉等[4]采用正交試驗設(shè)計法，以水為提取溶劑，采用超聲波強化提取10 min，對游離蒽醌的提取率與水煎煮法煎煮60 min效果相當；以乙醇為提取溶劑的提取效果明顯好于水，幾種方法相比較，以乙醇作為提取溶劑超聲波萃取法對大黃蒽醌的提取效果最好，明顯優(yōu)于常規(guī)煎煮法和乙醇回流法。王佩琪[5]采用超聲提取法以大黃游離蒽醌的提出率為指標，考查了提取時間、藥材粒徑、溶劑醇濃度3個因素，并經(jīng)正交試驗進行篩選 ，結(jié)果溶劑醇濃度對提取大黃游離蒽醌影響顯著，反應(yīng)時間和顆粒徑數(shù)對提取大黃游離蒽醌的影響不顯著。經(jīng)與 45%及 95% 乙醇加熱回流法進行比較，超聲法對大黃游離葸醌的提取效率明顯優(yōu)于乙醇加熱回流提取法，說明超聲提取法對中藥活性成分的提取效率較高。李霞等[6]以游離蒽醌得率為指標，探討了超聲波強化大黃蒽醌的雙相水解工藝的主要因素。用正交實驗優(yōu)化了超聲波強化大黃蒽醌的雙相水解工藝的工藝條件，實驗表明影響游離蒽醌得率的主次因素為提取溫度>超聲功率>硫酸體積分數(shù)>提取時間。劉建華[7]采用超聲、回流、索氏和微波4種方法,提取大黃中游離蒽醌和總蒽醌, 游離蒽醌的測定中,以超聲法最高,與其他方法相比差異顯著，總蒽醌的測定中,亦以超聲為最高。趙文彬等[8]首次運用超聲技術(shù)用水提醇沉法提取天山大黃多糖，用酚-硫酸比色法測定多糖含量，多糖含量 8.756%，平均回收率為100．6% 。

3 CO2超臨界流體提取法

超臨界流體萃取 (SFE)是一種以超臨界流體代替常規(guī)有機溶劑，對中草藥有效成分進行萃取和分離的新技術(shù)。未作君等[9]對大黃游離蒽醌的超臨界萃取工藝進行了優(yōu)化 ，當采用 5 mol/L 鹽酸、2 g/L淀粉酶和 1 g/L 纖維素酶對大黃結(jié)合蒽醌進行水解時 ，大黃結(jié)合蒽醌的糖苷鍵達到最優(yōu)水解，此時總蒽醌質(zhì)量分數(shù)分別為2．46%、2．33%和 2．23%。陳衛(wèi)林等[10]通過均勻設(shè)計試驗確定了超臨界二氧化碳流體萃取掌葉大黃中蒽醌類成分的最佳提取工藝條件，萃取壓力為 38 MPa，萃取溫度為 70 ℃，萃取時間為60 min；夾帶劑用量為 300 ml。

劉玉敏等[11]引用正交設(shè)計法和方差分析考查影響超臨界流體萃取大黃蒽醌的 5個因素及最佳萃取條件，優(yōu)化SFE法提取工藝。當SFE最佳萃取溫度為70 ℃、壓力5 MPa、甲醇劑量0.6 L、靜態(tài)萃取時間8 min及動態(tài)萃取體積5 ml時，可用于大黃蒽醌的提取分離。

4 膜分離技術(shù)

膜分離技術(shù)是近幾十年發(fā)展較快的分離技術(shù)，其以壓力為推動力實現(xiàn)溶質(zhì)與溶劑的分離。膜分離過程是在常溫下操作，沒有相變化，能耗低，分離效率高，多用于對中藥提取液的精制純化，以達到澄清、除雜的目的。劉莉等[12]采用Stirred Cell裝置超濾獲得 5個不同分子質(zhì)量片段的組分，經(jīng)聚丙烯酰胺凝膠電泳檢測，所得組分與采用凝膠柱分離所得組分無顯著差異，且工作量小、成本低、截留分子量范圍準確，適合工業(yè)化生產(chǎn) ，具有較好的推廣價值。

5 大孔樹脂提取法

大孔樹脂是20世紀60年代發(fā)展起來的一種新型吸附劑，既有物理吸附作用 ，又因多孔狀結(jié)構(gòu)而有篩選作用。在中藥有效成分分離提取的應(yīng)用中，大孔樹脂法呈現(xiàn)出良好的發(fā)展勢頭[13]。

金波等[14]以大黃總蒽醌的提取率及洗脫率為考查指標，考查大黃的提取條件及大孔吸附樹脂富集、純化大黃總蒽醌的吸附性能和洗脫參數(shù)。通過大孔吸附樹脂富集與純化，用70%乙醇洗脫，總蒽醌的洗脫收率在 80%以上。許漢林等[15]比較了 D301、AB-8、X-5、NKA-2、H1020型號的5種大孔樹脂對大黃總蒽醌的吸附性能；以大黃總蒽醌中的代表成分大黃素為考查指標 ，結(jié)果 D301樹脂對大黃總蒽醌的吸附性能最佳。劉峰群等[16]以 D101型大孔吸附樹脂分離大黃中結(jié)合型蒽醌提取物，加樣吸附 1 h，以足夠量水沖洗吸附柱，流速約 1 ml/min，至洗脫液幾乎無色。改用50%的乙醇液沖洗，采用比色法考查總提取物中結(jié)合型蒽醌類物質(zhì)的含量，總收率 87.6%。

6 傳統(tǒng)方法中的創(chuàng)新

王義潮[17]等利用氨水作為提取液替代有機溶液提取大黃酸凈化率提高40%。葉殷殷[18]等從乙醇濃度、回流時間、浸泡時間、加醇量、顆粒粒度等方面考查大黃總蒽醌的最佳提取工藝，結(jié)果顯示10目篩大黃粉末、70%乙醇12倍藥量、無浸泡、100 ℃回流提取0.5 h，提取3次效果最佳。

7 前景展望

許多研究顯示，這些新技術(shù)在大黃提取分離方面具有廣泛的應(yīng)用前景。但從目前研究來看，這些技術(shù)還存在著不同層次的局限性，特別是現(xiàn)在多為實驗室研究階段，實現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)尚需一定時間。

1 沈嵐，馮年平，韓朝陽，等．大黃微波萃取法與常用提取方法的比較研究．中成藥，2003，25(8)：615

2 胡秀麗，劉忠英，張寒琦，等．中藥大黃中蒽醌的微波輔助流動萃取研究．分子科學(xué)學(xué)報，2005，21(1)：54

3 胡秀麗，劉忠英，榮會，等．微波萃取與常規(guī)提取方法對大黃總蒽醌提取率的影響．吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報，2007，27(2)：194

4 張海暉，裘愛泳，劉軍海 ，等．超聲技術(shù)提取大黃蒽醌類成分．中成藥，2005，27(9)：1075

5 王佩琪，郭偉英，王軼晶，等．超聲提取大黃游離蒽醌的研究．中成藥，2004，26(7)：592

6 李霞，張黎明，鐵瑛，等．超聲波強化大黃蒽醌的雙相水解工藝研究．天津科技大學(xué)學(xué)報，2006，21(2)：8

7 劉建華，韓立強，苑麗，等.提取方法對大黃蒽醌類成分及抗氧化活性的影響.安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)， 2008，36(22)：9484

8 趙文彬，成玉懷．天山大黃多糖的超聲提取及含量測定．時珍國醫(yī)國藥，2006，17(2)：223

9 未作君，林立，倪晉仁．超臨界 CO2萃取大黃總葸醌工藝研究．化學(xué)工程，2007，34(8)：64

10 陳衛(wèi)林，郭玫，趙磊，等．均勻設(shè)計優(yōu)化超臨界 CO2流體萃取大黃蒽醌的研究．中醫(yī)藥導(dǎo)報，2007，13(2)：72

11 劉玉敏，陳閩軍，洪筱坤．正交實驗法優(yōu)化大黃蒽醌超臨界流體萃取的研究.中成藥，2005，27(4)：386

12 劉莉，王志鵬，梅其炳，等．大黃多糖的提取工藝對糖含量和糖醛酸含量的影響．中國藥學(xué)雜志，2003，38(10)：748

13 李平華，王興文．大孔吸附樹脂在中藥有效成分分離純化中的研究進展．云南中醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2008，26(3)：43

14 金波，李薇，蔡偉．大黃總蒽醌提取與純化工藝的研究．時珍國醫(yī)國藥，2005，16(8)：756

15 Xu Hanlin，Chen Jun，Shao Jizhen，etal．Study on separationand purlf ication of anthraquinones in Radix Et Rhizoma Rhei by D301 maeroporous resin．Zhongguo Zhong Yao Za Zhi，2006，31(14)：1163

16 劉峰群，易毛，劉麗萍，等．大孔吸附樹脂法純化大黃中結(jié)合型蒽醌總提取物的研究．中國現(xiàn)代醫(yī)藥雜志，2006，8(4)：104

17 王義潮，朱婧怡.大黃中大黃酸提取新方法研究.西北藥學(xué)雜志，2011,22(4):84

18 葉殷殷，曾元兒.大黃總蒽醌乙醇提取工藝優(yōu)化實驗.時珍國醫(yī)國藥，2010,21(10):2496