高效液相色譜法測(cè)定氨咖黃敏膠囊的含量

(亞寶藥業(yè)太原制藥有限公司，山西 太原 030032)

氨咖黃敏膠囊是治療感冒的非處方藥，屬于國(guó)家基本藥物，國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)采用滴定法檢測(cè)其對(duì)乙酰氨基酚、咖啡因含量，操作煩瑣，影響因素多。筆者采用高效液相色譜(HPLC)法同時(shí)測(cè)定產(chǎn)品中2種組分的含量，方法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 儀器與試藥

島津LC-2010型高效液相色譜儀;島津UV-2550型紫外可見分光光度計(jì)。對(duì)乙酰氨基酚對(duì)照品、咖啡因?qū)φ掌?中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)分別為100018-200408，171215-200406);氨咖黃敏膠囊(亞寶藥業(yè)太原制藥有限公司，批號(hào)為091109);甲醇為色譜純，其他試劑為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

色譜柱:AgilentC18柱(250 mm ×4.6 mm，0.5 μm);流動(dòng)相:1%醋酸溶液(用乙二胺調(diào)pH至3.7)-甲醇(60∶40);流速:1.0 mL/min;檢測(cè)波長(zhǎng):272 nm[1-2];柱溫:30℃。

2.2 溶液制備

分別精密稱取對(duì)乙酰氨基酚對(duì)照品0.310 3 g、咖啡因?qū)φ掌?7.41 mg，分別置50 mL量瓶中，用流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為對(duì)照品貯備液。再分別精密量取對(duì)乙酰氨基酚對(duì)照品貯備液2 mL、咖啡因?qū)φ掌焚A備液1 mL，置同一100 mL量瓶中，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，即得對(duì)照品溶液。取本品0.24 g，精密稱定，置50 mL量瓶中，加流動(dòng)相適量，振搖溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取2.0 mL，置25 mL量瓶中，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，用0.45 μm的微孔濾膜濾過(guò)，即得供試品溶液。按照處方比例制備不含對(duì)乙酰氨基酚、咖啡因的陰性樣品，同供試品溶液的制備方法制備，即得陰性對(duì)照品溶液。

2.3 方法學(xué)考察

專屬性試驗(yàn):分別取對(duì)照品溶液、供試品溶液、陰性對(duì)照品溶液各10 μL，注入液相色譜儀，按上述色譜條件進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果陰性對(duì)照品溶液色譜中，在與對(duì)乙酰氨基酚、咖啡因色譜峰相同的保留時(shí)間處無(wú)干擾峰出現(xiàn)，說(shuō)明處方中其他成分對(duì)測(cè)定結(jié)果無(wú)影響。色譜圖見圖1。

圖1 高效液相色譜圖

線性關(guān)系考察:分別精密量取對(duì)乙酰氨基酚對(duì)照品貯備液(含對(duì)乙酰氨基酚1.222 g/L)、咖啡因?qū)φ掌焚A備液(含咖啡因 74.82 μg/mL)1.0，5.0，10.0，15.0，20.0，25.0 mL，置同一100 mL量瓶中，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻。精密量取10 μL注入液相色譜儀，記錄色譜峰面積。以峰面積為縱坐標(biāo)、進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸，得回歸方程，對(duì)乙酰氨基酚為 Y=1484746.01X-1091.71，r=1.0000;咖啡因?yàn)?Y=3564619.60 X-961.56，r=1.000 0。結(jié)果表明對(duì)乙酰氨基酚和咖啡因進(jìn)樣量分別在0.122 2～3.055 5 μg和 0.007 482 ～0.187 1 μg 范圍內(nèi)與峰面積積分值線性關(guān)系良好。

精密度試驗(yàn):取同一對(duì)照品溶液10 μL，連續(xù)進(jìn)樣5次，記錄峰面積。結(jié)果對(duì)乙酰氨基酚和咖啡因 RSD分別為0.34%，0.20%(n=5)，表明進(jìn)樣精密度良好。

重復(fù)性試驗(yàn):取同一批(批號(hào)為091109)樣品6份，依法制備供試品溶液并測(cè)定。結(jié)果對(duì)乙酰氨基酚平均含量為160.85 mg/g(RSD=0.06%)，咖啡因平均含量為 9.499 mg/g(RSD=0.70%)，表明方法重復(fù)性良好。

穩(wěn)定性試驗(yàn):取同一供試品溶液，分別在 0，2，4，5，6 h 時(shí)測(cè)定峰面積。結(jié)果對(duì)乙酰氨基酚 RSD=0.24%(n=5)，咖啡因 RSD=0.09%(n=5)，表明供試品溶液在6 h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

加樣回收試驗(yàn):分別精密稱取已知含量的樣品(批號(hào)為091109)0.120 g，共6份，精密稱定，分別置50 mL量瓶中，再分別精密加入對(duì)照品溶液(含對(duì)乙酰氨基酚 40.54 μg/mL，咖啡因 2.368 μg/mL)0.8，1.0，1.2 mL，每個(gè)質(zhì)量濃度 3 份，按供試品溶液制備方法制備溶液并測(cè)定，結(jié)果見表1。

表1 加樣回收試驗(yàn)結(jié)果(n=9)

2.4 樣品含量測(cè)定

精密稱取樣品，按2.2項(xiàng)下方法制備供試品溶液，按外標(biāo)法計(jì)算含量。結(jié)果見表2。

表2 樣品含量測(cè)定結(jié)果

3 討論

以上結(jié)果表明，采用高效液相色譜法測(cè)定本品的含量，專屬性強(qiáng)、準(zhǔn)確、快速、簡(jiǎn)便。為了保證結(jié)果的準(zhǔn)確性，更好控制藥品質(zhì)量，保證患者用藥安全，建議對(duì)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中本品的含量測(cè)定方法進(jìn)行改進(jìn)。

[1]WS-10001-(HD-1021)-2002，國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)·化學(xué)藥品地標(biāo)升國(guó)標(biāo)(第 16 冊(cè))[S].

[2]楊學(xué)軍.HPLC法同時(shí)測(cè)定阿咖酚膠囊中三種成份的含量[J].中國(guó)藥品標(biāo)準(zhǔn)，2009，10(5):369-371.