中國紅參化學(xué)成分的研究(Ⅱ)

王久粉，劉 丹，錢士輝，濮社班，方 陣

(1.南京臣功藥業(yè)有限公司江蘇 南京210038;2.江蘇省中醫(yī)藥研究院，江蘇南京210028;3.中國藥科大學(xué)生藥學(xué)研究室，江蘇南京211198;4.三九現(xiàn)代中藥開發(fā)有限公司，河北安國071200)

紅參是由五加科植物人參(Panax ginseng C.A.Meyer)的栽培品經(jīng)蒸制后的干燥根和根莖［1］?，F(xiàn)代研究表明紅參的化學(xué)成分以皂苷和揮發(fā)油為主，另外還有脂肪酸，氨基酸，甾醇，黃酮類化合物等［2］。魏均嫻從朝鮮紅參中分到了麥芽酚(3－羥基－2－甲基－4－吡喃酮)［3］。徐綏緒等從中國紅參中分到了麥芽酚葡萄糖苷(2－甲基－4－吡喃酮－3－O－β－D葡萄糖苷)［4］。人參經(jīng)炮制成紅參后部分化學(xué)成分發(fā)生了變化，為進(jìn)一步研究其化學(xué)成分，開發(fā)利用該資源，作者從紅參的乙醇提取物中總共分離得到5個化合物。經(jīng)理化和波譜鑒定，并與文獻(xiàn)對照，確定這5個化合物分別為異麥芽酚甘露糖苷 (isomaltol－3－α－D－O－mannopyranoside1)，人參皂苷Rc(2)，麥芽酚(maltol 3)，β－谷甾醇(β－sitosterol 4)，棕櫚酸(palmitic acid 5)。化合物1為首次從五加科中分離到。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 藥材 紅參購于河北安國藥材市場，經(jīng)江蘇省中醫(yī)藥研究院錢士輝研究員鑒定為五加科人參屬人參的炮制品，藥材標(biāo)本保存于江蘇省中醫(yī)藥研究院中藥化學(xué)研究室。

1.2 試劑與儀器 XT24數(shù)字顯示顯微熔點(diǎn)測定儀(溫度未校正);Brucker AV－300，500型核磁共振儀(TMS內(nèi)標(biāo));Micromass Qauttro micro ES－CL質(zhì)譜儀;Buchi型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(瑞士 Buchi公司);D101大孔樹脂(天津市海光化工有限公司)，Sephadex LH－20和 RP－C18(12×10－10m，50 μm)為Merck公司產(chǎn)品，MDS－5－300反相制備色譜填料(200～300目)為北京麥迪生新技術(shù)開發(fā)中心產(chǎn)品，薄層色譜及柱色譜硅膠(青島海洋化工廠)，反相板(Merck公司);Waters600液相色譜儀，Waters2487檢測器，Kromasil?C18色譜柱，制備色譜試劑為甲醇(色譜純);其他試劑均為分析純。

1.3 提取和分離 紅參4.0 kg，分別以75%乙醇(10倍量)，回流提取2次(每次2h)，40%乙醇(10倍量)，回流提取1次(2 h)，合并提取液減壓濃縮至無醇味，用水溶解上 D101大孔樹脂，依次用水，30%，50%，70%，95%的乙醇洗脫，分別得到30%的乙醇部位(48 g)，50%的乙醇部位(78 g)，70%的乙醇部位(57 g)，90%的乙醇部位(35 g)。本文報(bào)道30%和90%的乙醇部位分到的化合物。

30%的乙醇部位經(jīng)MDS柱色譜，甲醇:水(5%～50%)梯度洗脫得 Fr.1 ～ Fr.2;Fr.1 經(jīng)硅膠柱色譜，氯仿－甲醇－水(100∶13∶0.5)洗脫，再經(jīng)反復(fù)Sephadex LH－20柱色譜純化，甲醇重結(jié)晶得化合物1(25 mg)。Fr.2經(jīng)ODS柱色譜，50%甲醇水洗脫，再經(jīng)半制備液相色譜，流速 1.5 mL·min－1，檢測波長203 nm，柱溫30℃，73%甲醇水洗脫得化合物2(20 mg)。90%的乙醇部位經(jīng)硅膠柱色譜分離，石油醚－乙酸乙酯(100∶1～50∶50)梯度洗脫，再經(jīng)反復(fù)重結(jié)晶和Sephadex LH－20柱色譜純化得化合物3(10 mg)，化合物4(60 mg)，化合物5(35 mg)。

2 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物 1白色柱狀晶體(甲醇)，mp.202～204℃。UV 254 nm有暗斑，TLC展開后噴以5%香草醛－硫酸溶液，加熱后顯黃色斑點(diǎn)。ESI－MS m/z:323［M+Cl］－。1H－NMR(Py－d5，500 MHz)，δ:2.40(CH3，s)，6.80(1H，d，J=2.0Hz，H－4)，7.83(1H，d，J=2.0Hz，H－5)，5.53(1H，d，J=3.5，anomeric H of Man)。13C－NMR(Py－d5，125 MHz)，27.4(CH3)，104.8(C－4)，137.5(C－2)，147.2(C－5)，152.5(C－3)，183.3(CO)，100.0(C－1')，71.2(C－2')，73.0(C－3')，69.7(C－4')，74.7(C－5')，60.7(C－6')，與文獻(xiàn)［5］報(bào)道一致，故鑒定為異麥芽酚甘露糖苷。

化合物2白色粉末(甲醇)，mp.199～201℃。Liebermann－Burchard呈陽性，Molish反應(yīng)為陽性，TLC展開后噴以5%香草醛－硫酸溶液，加熱后顯紫紅色斑點(diǎn)。1H－NMR(Py－d5，500 MHz)，δ:0.81，0.94，0.95，1.09，1.28，1.62，1.63，1.66，(8 ×CH3，s)，3.26(1H，dd，J=12.0，4.5 Hz，H－3)，5.31(1H，m，H－24)，4.90(1H，d，J=8.0Hz，anomeric H of Glc1)，5.35(1H，d，J=7.5Hz，anomeric H of Glc2)，5.12(1H，d，J=7.5Hz，anomeric H of Glc3)，5.64［(1H，d，J=1.5Hz，anomeric H of Ara(f))］。13C－NMR(Py－d5，125 MHz)，δ:39.7(C－1)，26.8(C－2)，89.0(C－3)，39.2(C－4)，56.4(C－5)，18.4(C－6)，35.1(C－7)，40.0(C－8)，50.2(C－9)，36.9(C－10)，30.7(C－11)，70.2(C－12)，49.4(C－13)，51.4(C－14)，30.8(C－15)，26.6(C－16)，51.7(C－17)，16.6(C－18)，16.0(C－19)，83.4(C－20)，22.4(C－21)，36.2(C－22)，23.2(C－23)，126.0(C－24)，131.0(C－25)，25.8(C－26)，17.8(C－27)，28.1(C－28)，16.3(C－29)，17.4(C－30)，105.1(C－1')，83.3(C－2')，76.5(C－3')，71.7(C－4')，78.0(C－5')，62.7(C－6')，106.1(C－1″)，77.1(C－2″)，78.8(C－3″)，72.1(C－4″)，78.3(C－5″)，62.8(C－6″)，98.1(C－1'″)，75.0(C－2'″)，78.2(C－3'″)，71.7(C－4'″)，78.1(C－5'″)，68.5(C－6'″)，110.1(C－1'″')，83.5(C－2'″')，79.2(C－3'″')，86.1(C－4'″')，62.9(C－5'″')，與文獻(xiàn)［6］報(bào)道一致，故鑒定為ginsenoside Rc。

化合物3 無色針晶(乙醇)，mp.158 ～160。1H－NMR(CDCl3，500 MHz)，δ:2.36(3H，s，CH3)，6.41(1H，d，J=5.5Hz，H－5)，7.70(1H，d，J=5.5Hz，H－6)，6.6(1H，s，OH)。13C－NMR(CDCl3，500 MHZ)，δ:154.3(C－2)，149.3(C－3)，172.8(C－4)，112.8(C－5)，143.0(C－6)，14.3(CH3)，與文獻(xiàn)［3］報(bào)道一致，故鑒定為麥芽酚。

化合物 4白色針狀結(jié)晶(甲醇)，mp.140～141℃。與對照品對照，混合熔點(diǎn)不下降，TLC檢查，與對照品混合點(diǎn)樣，多種展開劑展開，斑點(diǎn)顏色與比移值均指示為同一化合物，故鑒定化合物為β－谷甾醇。

化合物5白色片狀結(jié)晶(甲醇)，mp.53～54℃。ESI－MS m/z:255(M－H)－。1H－NMR(Py－d5，300MHz)，δ:0.86(3H，t，H－16)，1.26［24H，m，(CH2)12］，1.97(2H，m，H－15)，2.52(2H，t，H－2)，5.8(1H，OH)，13C－NMR(Py－d5，300 MHz)，δ:176.0(C－1)，34.9(C－2)，25.6(C－3)，29.6 ～29.9(C－10，C－4 ～C－13)，32.1(C－14)，22.9(C－15)，14.2(C－16)，與文獻(xiàn)對照［7］，波譜數(shù)據(jù)基本一致，故鑒定為棕櫚酸。

［1］國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(一部)［S］.北京:中國醫(yī)藥科技出版社，2010:143.

［2］楊秀偉.紅參的化學(xué)、藥理和臨床研究進(jìn)展［J］.中成藥研究，1984，28:30－33.

［3］魏均嫻.朝鮮紅參成分的研究—3－羥基－2－甲基－4－吡喃酮的分離及鑒定［J］.藥學(xué)學(xué)報(bào)，1982，17(7):449－550.

［4］徐綏緒，王乃利，李英輝.中國紅參中2－甲基－4－吡喃酮－3－O－β－D葡萄糖苷的分離及鑒定［J］.藥學(xué)學(xué)報(bào)，1986，21(1):71－72.

［5］鄭春輝.土貝母化學(xué)成分研究［D］.沈陽:沈陽藥科大學(xué)，2005.

［6］鐘方麗.林下參化學(xué)成分及其生物活性的研究［D］吉林:吉林大學(xué)，2008.

［7］安士影，錢士輝，蔣建勤，等.細(xì)柱五加化學(xué)成分的研究［J］.中草藥，2009，40(10):1528－1534.