兔尾草化學(xué)成分的研究

楊小良， 思秀玲， 曲 磊， 嚴(yán)紫成， 許學(xué)健， 韋 松

(廣西中醫(yī)學(xué)院，廣西南寧530001)

兔尾草Uraria lagopodioides(Linn.)Desv.exDC.，又名貍尾草，大葉兔尾草，狐貍尾等，系豆科貍尾豆屬植物［1-2］。該屬植物約20種，我國(guó)有9種，分布于熱帶、亞熱帶地區(qū)，華南、西南和臺(tái)灣省等地均出產(chǎn)，多數(shù)在北緯25°以南地區(qū)。廣西民間將其全草用于小兒疳積、咳血、產(chǎn)后少乳、頸淋巴結(jié)核、毒蛇咬傷、痔瘡等。藥理實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明，地上部分水煎液對(duì)大鼠子宮有收縮作用，抗著床作用;對(duì)毒蛇咬傷有一定治療作用;University of Benin Niggeria的研究人員對(duì)大葉兔尾草的藥理研究證明，該植物的總提物或部位提取物具有較好的殺螨活性［3］?；瘜W(xué)成分研究 India的研究人員［4］運(yùn)用氣相色譜分析儀從大葉兔尾草根的醇提物中分離出16碳和28碳的脂肪酸;曾有報(bào)道分離出6個(gè)黃酮化合物，但均未確定其結(jié)構(gòu)［5］。同屬植物的氣相分析中發(fā)現(xiàn)正十六碳酸和正廿八碳酸。陳艷［6］得到8個(gè)化合物分別鑒定為硬脂酸(Ⅰ)，正二十四烷酸(Ⅱ)，β-谷甾醇(Ⅲ)，正三十烷醇(Ⅳ)，水楊酸(Ⅴ)，β-谷甾醇-3-O-β-D-葡萄糖苷(Ⅵ)，當(dāng)藥黃酮(Swertisin，Ⅶ)，當(dāng)藥黃酮-2″-O-α-L-鼠李糖苷(Ⅷ)。筆者在對(duì)兔尾草進(jìn)行化學(xué)成分的研究，從全草的乙醇浸出物中又分離出6個(gè)化合物，經(jīng)理化性質(zhì)和波譜數(shù)據(jù)分析，確定其中3個(gè)化合物的化學(xué)結(jié)構(gòu)，分別是皂草黃酮(Saponaretin，Ⅴ)，野漆樹(shù)苷 (Rhoifolin，Ⅵ)，3β，16β，22α-三羥基齊墩果-12-烯(Ⅰ)。

1 儀器和材料

核磁共振譜用瑞士布魯克公司AV400超導(dǎo)核磁共振儀測(cè)定;EI-MS用VG Autospec 3000有機(jī)磁質(zhì)譜儀測(cè)定，IR用EQUINOX 55型傅里葉變換紅外光譜儀(分辨率:優(yōu)于0.2 cm-1;波數(shù)范圍;7500～370 cm-1)，德國(guó)Bruker公司;UV用Agilent 8453紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)(波長(zhǎng)范圍:190～800 nm，分辨率:0.1 nm)，美國(guó)安捷倫公司;熔點(diǎn)測(cè)定儀用XT4-100A型顯微熔點(diǎn)測(cè)定儀(溫度計(jì)未校正)，北京科儀電光儀器廠。

兔尾草采自廣西天等、馬山縣，經(jīng)本院藥用植物教研室劉壽養(yǎng)教授鑒定為豆科植物大葉兔尾草［Uraria Legopodioides(L.)Desv.ex DC］。

2 提取和分離

大葉兔尾草干燥全草10 kg，粉碎，用70%乙醇提取。減壓回收乙醇，得到約20 000 mL濃縮液，后加水稀釋至澄清，趁熱抽濾，濾液趁熱上大孔樹(shù)脂，用水洗至無(wú)色后依次用20%乙醇，70%乙醇和95%乙醇洗脫。其中得到20%乙醇部分約110 g，70%乙醇部分250 g。

將70%乙醇洗脫部分190 g，用氯仿:甲醇:水進(jìn)行梯度洗脫，每個(gè)流份收集250 mL，TLC點(diǎn)樣相同組分合并。9～48流份經(jīng)反復(fù)柱層析，得到化合物(Ⅴ)15 mg和(Ⅵ)20 mg。

另取大葉兔尾草干燥全草14 kg，粉碎，用70%乙醇提取。減壓回收乙醇，得到濃縮液，分別用石油醚(60～90℃)，乙酸乙酯，正丁醇進(jìn)行液-液萃取，得到石油醚部位浸膏160 g，乙酸乙酯部位浸膏110 g，正丁醇部位浸膏500 g。取正丁醇部位浸膏240 g，與280 g聚酰胺拌樣，用10%乙醇，30%乙醇和95%乙醇進(jìn)行梯度洗脫，將30%乙醇洗脫部分70 g反復(fù)柱層析，得到化合物(Ⅰ)26 mg。

3 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物Ⅴ:黃色粉末，mp 227～228℃，鹽酸-鎂粉反應(yīng)顯紅色，Molish反應(yīng)陰性，但酸水解未能檢出糖，鋯鹽-枸櫞酸反應(yīng)，黃色減退，在通過(guò)Gibb's反應(yīng)陽(yáng)性，Emerson反應(yīng)陽(yáng)性，示其8位未取代。Ⅴ在甲醇中測(cè)得UV光譜，最大吸收峰270 nm(帶Ⅱ)和333 nm(帶Ⅰ)，為典型黃酮類化合物的紫外吸收光譜。IRcm-1∶1 658(C=O)，1 499，1 450，1 138，1 076，835。FAB-MS(-，m/z):431［M-H］-，311。1H-NMR(DMSO-d6，400 MHz)δ ∶13.13(1H，S，5-OH);6.92(2H，d，J=8.5，H-3′，H-5′);7.96(2H，d，J=8.5，H-2′，H-6′);6.26(1H，S，3-H);6.78(1H，S，8-H)，10.86(1H，S，7-OH)，10.37(1H，S，4′-OH);13C-NMR(DMSO-d6)δ ∶163.99(C-2)，102.47(C-3)，182.13(C-4)，160.42(C-5)，108.90(C-6)，162.59(C-7)，93.60(C-8)，156.03(C-9)，104.63(C-10)，121.64(C-1')，128.99(C-2'，C-6')，115.84(C-3'，C-5')，161.16(C-4')。糖上碳核:73.40(C-1'')，70.88(C-2'')，78.69(C-3'').70.58(C-4'')，81.86(C-5'')，61.33(C-6'')。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［7-8］記載的 Saponare tin 相符，顧鑒定化合物Ⅴ為:5，7，4′-三羥基-黃酮-6-C-葡萄糖苷，即皂草黃酮(Saponaretin)。

化合物Ⅵ:黃色粉末，mp 234～236℃，鹽酸-鎂粉反應(yīng)顯紅色，示其為黃酮類化合物，鋯鹽-枸櫞酸反應(yīng)，黃色減退，示5-OH存在;通過(guò)Gibb's反應(yīng)陽(yáng)性，Emerson反應(yīng)陽(yáng)性，示其8位未取代。Ⅴ在甲醇中測(cè)得UV光譜，最大吸收峰270 nm(帶Ⅱ)和333 nm(帶Ⅰ)，為典型黃酮類化合物的紫外吸收光譜。IRcm-1:3 404(OH)，1 658(C=O)，1 606，1 503，1 448，1 127，1 080，835。FAB-MS m/z:577 ［M-H］-，1HNMR(CD3OD，400 MHz)δ ∶6.85(2H，d，J=6 Hz，H-3′，H-5′);7.77(2H，d，J=6Hz，H-2′，H-6′)，6.55(1H，S，3-H)，6.32(1H，S，6-H)，6.66(1H，S，8-H);3.45-3.94(m，糖基氫)，5.13(1H，d，J=7.8Hz ，C1″-H);3.68(1H，t，J=9.0 Hz，C2″-H);3.63(1H，d，J=9.0 Hz，C3″-H);3.38(1H，d，J=9.0 Hz，C4″-H);3.52(1H，t，J=6.0，9.0Hz ，C5″-H);3.71(1H，d，J=6.0 Hz，C6″-H1)，3.91(1H，br，C6″-H2);5.27(1H，br，C1?-H);3.61(1H，d，J=9.0 Hz，C2?-H);3.94(1H，br，C3?-H);3.40(1H，d，J=9.0 Hz，C4?-H);3.93(1H，br，C5?-H);1.31(3H，d，J=3.0 Hz，C6?-H)。13C-NMR(CD3OD，δ)∶167.06(C-2)，104.56(C-3)，184.39(C-4)，163.30(C-5)，101.42(C-6)，164.77(C-7)，96.34(C-8)，159.30(C-9)，107.44(C-10)，123.37(C-1′)，130.13(C-2′，C-6′)，117.50(C-3′，C-5′)，163.36(C-4′)，糖上碳核:100.18(C-1″)，79.49(C-2″)，78.48(C-3″)，71.87(C-4″)，78.76(C-5″)，62.92(C-6″)，103.01(C-1?)，72.69(C-2?，C-3?)，74.48(C-4?)，70.48(C-5?)，18.79(C-6?)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［9-10］記載的 Rhoifolin一致，故鑒定Ⅵ為:芹菜素-7-O-新橙皮糖苷，即野漆樹(shù)苷(Rhoifolin)。

化合物Ⅰ灰色粉末mp 293～296℃，溶于甲醇，吡啶，二甲亞砜，Ⅰ在甲醇中測(cè)得UV光譜，最大吸收峰205 nm，13CNMR(C5D5N，600 MHz)δ ∶38.81(C-1)，26.45(C-2)，78.21(C-3)，39.50(C-4)，55.79(C-5)，18.47(C-6)，33.08(C-7)，39.98(C-8)，47.87(C-9)，36.76(C-10)，23.82(C-11)，122.50(C-12)，144.84(C-13)，42.33(C-14)，33.08(C-15)，77.77(C-16)，46.61(C-17)，41.86(C-18)，46.77(C-19)，30.90(C-20)，42.28(C-21)，75.55(C-22)，28.19(C-23)，15.76(C-24)，16.85(C-25)，17.13(C-26)，23.82(C-27)，28.66(C-28)，33.32(C-29)，21.21(C-30)。δ122.50(C12)，δ 144.83(C13)為典型的齊墩果酸型骨架構(gòu)型。根據(jù)以上數(shù)據(jù)［11］確定化合物Ⅰ的結(jié)構(gòu)是 3β，16β，22α-三羥基齊墩果-12-烯。

［1］中國(guó)科學(xué)院中國(guó)植物志編輯委員會(huì).中國(guó)植物志(41卷)［M］.北京:科學(xué)出版社，1995:69.

［2］江蘇新醫(yī)學(xué)院.中藥大辭典(上冊(cè))［M］.上海:上海科技出版社，1977:1417.

［3］Igboechi AC，Osazuwa EO，Igwe UE.Laboratory evaluation of the carotidal properties of extracts from Uraria picta［J］.J Ethnopharmacol，1989，26(3):293-298.

［4］Grampurohit N D，Baichwal M R.Fatty acids of Uraria Lagopodioides［J］.Indian J Nat Prod，1993，9(2):8.

［5］溫曉凡.兔尾草抗蛇毒有效部位(05)植化成分研究［J］.暨南大學(xué)理醫(yī)學(xué)報(bào)，1986，(1):85-94.

［6］陳 艷，思秀玲，韋 松，等.兔尾草化學(xué)成分的研究［J］.中成藥，2009，31(2):266-269.

［7］Prox A.Tetrahedron，1968，24(9):3697.

［8］Ghosal S Jaiswal D K.J Pharm Sci，1983，69(1):53.

［9］雷海民，孫文基.化洲橘紅的化學(xué)成分研究［J］.西北藥學(xué)雜志，2000，15(5):203-204.

［10］袁旭江，林 勵(lì)，陳志霞.化橘紅中酚性成分的研究［J］.中草藥，2004，35(5):498-500.

［11］Khong P W，Lewis K G.New Triterpenoid Extractives from Lemaireocereus chichipe［J］.Aust J Chem，1975，28，165-172.