我國(guó)藥品微生物檢驗(yàn)的特點(diǎn)與質(zhì)控

魏常梅

（甘南州藥品檢驗(yàn)所，甘肅 甘南 747000）

1 藥品微生物檢驗(yàn)特點(diǎn)概述

1.1 藥品微生物質(zhì)控過(guò)程

藥品微生物檢驗(yàn)主要有6個(gè)方面，包括藥品因素、環(huán)境影響、培養(yǎng)觀察、抽樣檢查和破壞試驗(yàn)，其中藥品因素屬于方法驗(yàn)證，而環(huán)境影響、培養(yǎng)觀察、抽樣檢查和破壞試驗(yàn)則屬于過(guò)程控制。微生物檢查的過(guò)程控制主要有以下3個(gè)方面：①實(shí)驗(yàn)設(shè)施，即硬件部分，是進(jìn)行微生物檢查的物質(zhì)保障；②檢驗(yàn)程序，即軟件部分，是藥品微生物檢驗(yàn)有效的結(jié)果；③結(jié)果判斷部分，即調(diào)查，最后得出可要的結(jié)論。在物質(zhì)保障方面，主要存在4個(gè)部分，①實(shí)驗(yàn)室系統(tǒng)；②操作環(huán)境；③關(guān)鍵設(shè)備；④對(duì)照培養(yǎng)基。對(duì)于實(shí)驗(yàn)室系統(tǒng)的要求，必須有潔凈的實(shí)驗(yàn)條件，具體體現(xiàn)在以下3個(gè)方面：①有效性，即整體10000級(jí)，局部100級(jí)；②體現(xiàn)在安全性方面，要注意保護(hù)樣品、人員和環(huán)境；③體現(xiàn)在可操作性方面，其中要求操作盡可能方便、快捷、順暢，另外，干凈的實(shí)驗(yàn)條件需要專人維護(hù)和驗(yàn)證，對(duì)于陽(yáng)性菌實(shí)驗(yàn)室，必須達(dá)到P2生物安排標(biāo)準(zhǔn)。

如果要對(duì)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行改造，則首先需要起草布局圖，然后通過(guò)至少兩輪的討論，確定最終的納入方案。對(duì)于實(shí)驗(yàn)室系統(tǒng)的管理和維護(hù)，則主要重大放在屏障系統(tǒng)的有效性方面，包括對(duì)壓差、風(fēng)速、微粒和照度的管理，對(duì)于環(huán)境菌庫(kù)，則需要注意酒精棉球分離微生物和新潔爾滅分離微生物。環(huán)境菌庫(kù)中，潔凈環(huán)境常見菌（浮游菌）主要有頭狀葡萄球菌（Staphylococcus capitis）、溶血葡萄球菌（Staphylococcus haemolyticus）、緩癥鏈球菌（Streptococcus mitis）、科氏葡萄球菌（Staphylococcus cohnii）、藤黃微球菌（Micrococcus luteus）等。對(duì)于操作環(huán)境的要求，主要有隔離器，生物安全柜和超凈工作臺(tái)。下面主要介紹一下生物安全柜的相關(guān)特點(diǎn)和分類[1]。

1.2 生物安全柜的作用與分類

生物安全柜是為操作原代培養(yǎng)物、菌毒株以及診斷性標(biāo)本等具有感染性的實(shí)驗(yàn)材料時(shí)，用來(lái)保護(hù)操作者本人、實(shí)驗(yàn)室環(huán)境以及實(shí)驗(yàn)材料，使其避免暴露于上述操作過(guò)程中可能產(chǎn)生的感染性氣溶膠和濺出物而設(shè)計(jì)的。WHO《實(shí)驗(yàn)室生物安全手冊(cè)》提出，生物安全柜可以有效減少由于氣溶膠暴露所造成的實(shí)驗(yàn)室感染以及培養(yǎng)物交叉污染。生物安全柜同時(shí)也能保護(hù)工作環(huán)境。事實(shí)上，生物安全柜更側(cè)重于保護(hù)操作人員和環(huán)境，防止操作的病原微生物擴(kuò)散造成人員傷害和環(huán)境污染。

根據(jù)生物安全防護(hù)水平的差異，生物安全柜可分為一級(jí)、二級(jí)和三級(jí)三種類型。一級(jí)生物安全柜可保護(hù)工作人員和環(huán)境而不保護(hù)樣品。其氣流原理和實(shí)驗(yàn)室通風(fēng)櫥基本相同，不同之處在于排氣口安裝有HEPA 過(guò)濾器，將外排氣流過(guò)濾進(jìn)而防止微生物氣溶膠擴(kuò)散造成污染。一級(jí)生物安全柜本身無(wú)風(fēng)機(jī)，依賴外接通風(fēng)管中的風(fēng)機(jī)帶動(dòng)氣流，由于不能保護(hù)柜內(nèi)產(chǎn)品，目前已較少使用。二級(jí)生物安全柜是目前應(yīng)用最為廣泛的柜型。按照《中華人民共和國(guó)醫(yī)藥行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)YY0569-2005生物安全柜》中的規(guī)定，二級(jí)生物安全柜依照入口氣流風(fēng)速、排氣方式和循環(huán)方式可分為4 個(gè)級(jí)別：A1 型，A2 型，B1 型和B2 型。所有的二級(jí)生物安全柜都可提供工作人員、環(huán)境和產(chǎn)品的保護(hù)。三級(jí)生物安全柜是為生物安全防護(hù)等級(jí)為4級(jí)實(shí)驗(yàn)室而設(shè)計(jì)的，柜體完全氣密，工作人員通過(guò)連接在柜體的手套進(jìn)行操作，俗稱手套箱（Golve box），試驗(yàn)品通過(guò)雙門的傳遞箱進(jìn)出安全柜以確保不受污染，適用于高風(fēng)險(xiǎn)的生物試驗(yàn)，如進(jìn)行SARS、埃博拉病毒相關(guān)實(shí)驗(yàn)等。根據(jù)生物安全柜的強(qiáng)制性行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)《中華人民共和國(guó)醫(yī)藥行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)YY0569-2005生物安全柜》規(guī)定，只有獲得國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局頒發(fā)的三類醫(yī)療器械注冊(cè)證的產(chǎn)品才能真正保護(hù)操作人員、實(shí)驗(yàn)室環(huán)境和操作樣本[2]。

1.3 超凈工作臺(tái)的特點(diǎn)與原理

（clean bench）是為了適應(yīng)現(xiàn)代化工業(yè)、光電產(chǎn)業(yè)、生物制藥以及科研試驗(yàn)等領(lǐng)域?qū)植抗ぷ鲄^(qū)域潔凈度的需求而設(shè)計(jì)的。其工作原理為：通過(guò)風(fēng)機(jī)將空氣吸入，經(jīng)由靜壓箱通過(guò)高效過(guò)濾器過(guò)濾，將過(guò)濾后的潔凈空氣以垂直或水平氣流的狀態(tài)送出，使操作區(qū)域持續(xù)在潔凈空氣的控制下達(dá)到百級(jí)潔凈度，保證生產(chǎn)對(duì)環(huán)境潔凈度的要求。

超凈工作臺(tái)根據(jù)氣流的方向分為垂直流超凈工作臺(tái)（vertical flow clean bench）和水平流超凈工作臺(tái)（horizontal flow clean bench），根據(jù)操作結(jié)構(gòu)分為單邊操作及雙邊操作兩種形式，按其用途又可分為普通超凈工作臺(tái)和生物（醫(yī)藥）超凈工作臺(tái)。是為了適應(yīng)現(xiàn)代化工業(yè)、光電產(chǎn)業(yè)、生物制藥以及科研試驗(yàn)等領(lǐng)域?qū)植抗ぷ鲄^(qū)域潔凈度的需求而設(shè)計(jì)的。其工作原理為：通過(guò)風(fēng)機(jī)將空氣吸入，經(jīng)由靜壓箱通過(guò)高效過(guò)濾器過(guò)濾，將過(guò)濾后的潔凈空氣以垂直或水平氣流的狀態(tài)送出，使操作區(qū)域持續(xù)在潔凈空氣的控制下達(dá)到百級(jí)潔凈度，保證生產(chǎn)對(duì)環(huán)境潔凈度的要求。這是一種供單人操作的通用型局部?jī)艋O(shè)備，氣流形式為垂直層流，它可造就局部高清潔度空氣環(huán)境，是科研制藥、醫(yī)療衛(wèi)生、電子光學(xué)儀器等行業(yè)最為理想的專用設(shè)備[3-5]。

特點(diǎn)：①操作區(qū)為全不銹鋼；②外型美觀結(jié)構(gòu)合理；③采用自定們上下推拉門系統(tǒng)；④風(fēng)量可調(diào)，雙側(cè)電源插座

2 藥品微生物檢驗(yàn)程序

藥品微生物檢驗(yàn)程序一共分為八個(gè)部分，分別是接受任務(wù)、實(shí)驗(yàn)方案、實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備、樣品核對(duì)、實(shí)驗(yàn)操作、過(guò)程監(jiān)控和培養(yǎng)觀察。下面就重點(diǎn)部分進(jìn)行詳細(xì)闡述。

2.1 實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備

實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備應(yīng)堅(jiān)持“平戰(zhàn)結(jié)合”，物質(zhì)準(zhǔn)備有備無(wú)患，應(yīng)隨時(shí)保證“來(lái)之能戰(zhàn)” 。尤其注意常備有效期要求的物品：培養(yǎng)基、沖洗液、濾器、小型實(shí)驗(yàn)器材等。

2.2 樣品核對(duì)

盡快取得樣品，確保樣品傳遞過(guò)程中的完 整性、安全性、有效性；仔細(xì)核對(duì)樣品及樣品資料，高度關(guān)注媒體 公布樣品（問(wèn)題樣品），同時(shí)盡量獲取非 問(wèn)題樣品及同類樣品，進(jìn)行比較實(shí)驗(yàn)、比 較分析； 樣品外觀檢查、完整性檢查。

2.3 過(guò)程監(jiān)控和培養(yǎng)觀察

主要考慮以下問(wèn)題：是不是微生物？是什么微生物？微生物來(lái)自哪里？長(zhǎng)菌與否？渾不渾濁? 物理變化、化學(xué)變化還是生物變化？一靠經(jīng)驗(yàn)，二靠實(shí)驗(yàn)，三靠嚴(yán)格程序控制，避免干擾。尤其是需要深入認(rèn)識(shí)微生物本身，微生物變異與保守的相對(duì)性；分析方法的可變性與微生物本身的可變性等。

綜上，我國(guó)的藥品微生物檢驗(yàn)系統(tǒng)目前尚不完善，與發(fā)達(dá)國(guó)家相比，還有較大的差距，不管是在硬件建設(shè)方面，軟件建設(shè)方面還是人才培養(yǎng)方面。我們一定要清醒認(rèn)識(shí)我們的不足，也要充分挖掘我們的潛力，在新一輪的國(guó)際競(jìng)爭(zhēng)中贏得一席之地。

[1]耿敬軍,張俊.藥品微生物檢查驗(yàn)證試驗(yàn)現(xiàn)狀調(diào)查與建議[J].中國(guó)藥房,2006,17(21):22.

[2]穆玲花.對(duì)當(dāng)前藥品微生物檢查驗(yàn)證試驗(yàn)中存在的問(wèn)題及建議的綜合論述[J].健康必讀(下旬刊),2010(7):55.

[3]杜平華,陳濤.對(duì)我國(guó)現(xiàn)行藥品微生物標(biāo)準(zhǔn)限度的分析探討[J].中國(guó)藥品標(biāo)準(zhǔn),2001,2(1):16.

[4]張新妹,鮑英,胡昌勤,等.中國(guó)藥典2000年版微生物質(zhì)量檢查法中有關(guān)培養(yǎng)基的若干問(wèn)題[J].中南藥學(xué),2003,1(3):186.

[5]祝錫林.藥品微生物污染的幾起特例報(bào)告與分析[J].中國(guó)藥事,2004,18(11):661-663.