影響診刮宮內(nèi)膜組織的常規(guī)制片因素分析

楊佩濃 陳漢松 張曉婷

（浙江省臺州醫(yī)院病理科，浙江 臺州 317000）

在日常的工作中，婦科刮宮送檢的宮內(nèi)膜組織在制作HE切片時，經(jīng)常會出現(xiàn)掉片，染色腺體發(fā)白等情況。我們結合多年的工作經(jīng)驗，就宮內(nèi)膜組織的制片作一下分析。

1 材料與方法

1.1 材料

臺州醫(yī)院婦產(chǎn)科刮宮送檢的宮腔內(nèi)膜組織

1.2 操作步驟

1.2.1 取材

破碎的宮內(nèi)膜組織取材時應把它包在擦鏡紙里，不能包得過多，過緊，否則影響脫水效果。取材的合格與否將直接影響組織的脫水，透明，浸蠟，切片，染色及診斷等一系列環(huán)節(jié)[1]。

1.2.2 固定

采用10%的中性福爾馬林固定液。常溫下固定時間為6～12h。在溫度降低的情況下適當?shù)匮娱L固定時間，但不超過24h。

1.2.3 脫水、透明和浸蠟

一般來說，脫水的酒精應該從低濃度的70%酒精再逐漸過度到無水酒精。透明時間應控制在40～60min，過短，起不到透明作用，過長組織過硬，發(fā)脆，影響切片。浸蠟的溫度應在58～60℃，如過高組織易收縮變硬，切不成片。浸蠟時間在3～4h。

1.2.4 包埋

破碎的宮內(nèi)膜組織在包埋時一定要將組織放在同一個平面上，否則易造成組織切不全。

1.2.5 切片和鋪片

切片刀要鋒利，切片時，要將蠟塊在切片機上固定好，各個角度調(diào)節(jié)好，以防切片厚薄不一，并且要作最大的切面。對于易碎的組織，可用干凈紗布沾點熱水，擦下組織面，一般這種情況就能解決了。但是這樣會造成組織厚度加大，需要適當?shù)卣{(diào)小切片刻度。鋪片時水溫不能太高，也不能太低，一般在40℃左右。太高的話，組織容易破裂，結構不完整。太低，片子不容易展平，易產(chǎn)生皺折，或是片子貼不牢，易掉片?？酒臏囟纫刂圃?5℃左右。

1.2.6 染色

染色時間與切片的厚度，以及室溫，染液的新舊有關，所以應該隨著不同的情況分別的對待。最好能在顯微鏡下控制染色。過深，用鹽酸酒精適當?shù)胤只?。伊紅不能太深，只作適當?shù)匾r染。

1.2.7 封片

樹膠不能滴得太多，以免溢出，也不能太少，否則蓋不住切片。最后標簽要端正，編號清晰，粘貼恰當。

2 結 果

經(jīng)過上述的方法，切出來的破碎宮內(nèi)膜組織厚薄均勻，厚度3～4μm，無皺褶，無刀痕，核槳對比分明，染色鮮艷，封固美觀。

3 討 論

在制作宮內(nèi)膜組織切片時，由于組織內(nèi)含較多的血凝塊和水分，所以從取材開始，就應該嚴格按照規(guī)范的操作規(guī)程。當然，在制片過程中，稍有一個環(huán)節(jié)出了問題，就會影響整體效果，常見的現(xiàn)象和原因有以下幾點。

3.1 染色腺體發(fā)白，組織結構不清的原因

3.1.1 固定不及時或固定量不足

組織離體后，應盡早放入固定液中，固定液的量應為組織的4～5倍。對于標本較多的應該將其分裝在幾個瓶子里以達到充分固定到組織中央。

3.1.2 染液陳舊或是室溫太低，導致染色不佳

對于量大的單位，染液的用量應盡可能的量化，對于用量較小的單位，要以染液的使用時間來確定更換時間。在室溫較低時，尤其是冬天，染液的著色力就會降低，所以在不易著色時，應把染液放在37℃的水浴箱里，以增加它的染色力。

3.1.3 脫水不良

脫水液陳舊，應定期及早更換脫水液?；蚴墙M織包得太多而影響脫水效果。

3.1.4 組織脫蠟不徹底，造成染不上色或著色很淡，鏡檢時模糊不清。

3.1.5 染色后脫水，透明不徹底，而導致切片模糊。

3.2 切片破碎，切片不完整的原因

3.2.1 組織脫水過度，由于宮內(nèi)膜組織中含有較多的水分，充分脫水后，可造成組織過脆，導致切片時破碎。尤其對于新?lián)Q的脫水液，組織要減少脫水時間，等用了一段時間再重新調(diào)整。

3.2.2 由于是破碎組織不易平整地包在一個面上，所以包埋時盡可能地將組織靠攏。

3.2.3 切片刀不鋒利。刀口上有異物或有缺口時，容易造成破碎。應該換把刀片或是清理刀片上的異物再切。

3.2.4 組織粗修后，沒經(jīng)過細修就直接切片。這樣的切片一般會成我們通常說得“開天窗”，所以一定要在粗修后，然后細修再切才可以避免。

3.3 切片污染。

3.3.1 包埋時，由于是破碎組織，鑷子上很容易沾上，而造成污染。所以，每次包埋完一個組織后應該將鑷子清理干凈。

3.3.2 切片粗修時，粉末狀的廢蠟容易粘在壓片板而造成污染。粗修完后，一定要將壓片板清掃干凈后再細修切片。

3.3.3 展片時，殘留水中的組織碎屑易粘附在組織切片上。所以在片子放入水之前，要拿報紙等物撈一下水面，以防組織污染。

3.4 掉片

宮內(nèi)膜組織含較多血凝塊，在制片過程中更容易出現(xiàn)這種情況。所以在烤片時溫度不能太高，一般不超65℃，另外就是片子粘貼在玻片上后，不能馬上將其放入烤箱，應該放在紗布上將水瀝干后再放入。

要制作出一張完美的HE切片，尤其是對于一些像宮內(nèi)膜類制片有一定難度的組織來說，需要我們平時不斷的摸索和總結經(jīng)驗，以努力提高我們的制片質(zhì)量。

[1]吳 ,吳鵬,潘曉蔚等.高質(zhì)量組織切片的制作要點與體會[J].沈陽醫(yī)學院報,2004,6(3)：164.