中醫(yī)藥治療癲癇的實驗研究進展

李敬孝，王宮博，高傳才，石全福，馮鐵為

(1.黑龍江中醫(yī)藥大學，黑龍江 哈爾濱 150040;2.大慶市遠望中醫(yī)院，黑龍江 大慶 163114)

癲癇是神經(jīng)科常見病、多發(fā)病之一，其特點是臨床癥狀復雜，病程長，且反復發(fā)作。目前，治療癲癇的主要手段雖然仍以西藥為主，但其具有對某些患者的不敏感性，致畸形性和易產(chǎn)生耐藥性，且毒副作用較明顯，對患者行為、認知功能等有負面影響。中醫(yī)藥抗癲癇大多以緩效、作用時間長、毒性反應和副作用少而見長，因此，中醫(yī)藥防治癲癇具有很大的潛力。近年來，隨著分子生物學技術的日新月異，中醫(yī)藥治療癲癇的實驗研究也取得了重大進展，因此對近年來中醫(yī)藥治療癲癇的實驗研究進展作一綜述。

1 單味中藥的實驗研究進展

單味中藥的研究主要是用現(xiàn)代藥效學的實驗方法和現(xiàn)代的提取工藝來找出其有效成分，通過研究其藥理作用與成分之間的關系來探討其抗癇效用，抗癇機制。近年來，對于柴胡、石菖蒲、全蝎、靈芝孢子等的抗癲癇作用報導較多。

現(xiàn)代藥理研究發(fā)現(xiàn)，柴胡有鎮(zhèn)靜以及抗驚厥的功效，目前發(fā)現(xiàn)的有效成分有皂苷、揮發(fā)油、甾醇等。近年的研究顯示，皂苷成分對中樞神經(jīng)系統(tǒng)有抑制作用，能夠拮抗咖啡因、去氧麻黃堿等對于中樞的興奮作用。劉燕等［1］對柴胡萃取物抗驚厥的作用進行了探討，結果發(fā)現(xiàn)，柴胡皂苷及揮發(fā)油部分均能明顯拮抗最大電休克(MES)模型，而其水溶性部分則對戊四氮(PTZ)致驚厥模型有效，因此認為，柴胡皂苷及揮發(fā)油能夠對抗癲癇的強直－陣攣發(fā)作，而水溶性部分則可能拮抗癲癇失神發(fā)作。謝煒等［2］的研究亦證實，柴胡皂苷部分可以對PTZ慢性點燃的大鼠海馬CA1區(qū)谷氨酸(Glu)的表達產(chǎn)生影響，這可能是其抑制PTZ誘導癲癇大鼠的癇性發(fā)作的機制之一;石菖蒲的揮發(fā)油部分含有α－細辛醚，這種物質(zhì)具有較強的抗驚厥作用和一定的中樞鎮(zhèn)靜作用。陳俐［3］等研究發(fā)現(xiàn)，用石菖蒲水煎劑(10g/Kg)能夠明顯減少PTZ和MES急性模型驚厥發(fā)作率(P＜0.01)，與丙戊酸鈉對照組比較無顯著差異(P＞0.05)，并且能夠降低PTZ致癇大鼠的發(fā)作等級(P＜0.01)，證明石菖蒲的水溶性部分有治療癲癇的功效。該研究還顯示，石菖蒲揮發(fā)油(50mg/Kg)可延長PTZ急性致驚厥的潛伏期，并且顯著降低MES致驚厥的發(fā)作頻率，因此，石菖蒲萃取物具有較好的抗癲癇作用。陳氏等人的進一步的研究［4］發(fā)現(xiàn)，從石菖蒲中萃取的揮發(fā)油部分能夠調(diào)節(jié)癲癇大鼠腦內(nèi)的興奮性氨基酸與抑制性氨基酸的相對平衡，并認為這可能是其抗癲癇的作用機制。

全蝎可熄風止痙、通絡散結，且有攻毒和止痛的功效。藥理研究表明，全蝎抗癲癇的主要成分來自其蝎毒，而從中提純的肽類物質(zhì)抗癲癇作用更強。姜春玲等［5］觀察到，蝎毒處理紅藻氨酸(KA)癲癇大鼠3周后，能明顯減輕癲癇發(fā)作行為，抑制海馬星形膠質(zhì)細胞的增生肥大，減輕海馬神經(jīng)元受損的程度，并能選擇性地增加癲癇敏感大鼠腹側海馬內(nèi)膽囊收縮素原mRNA的表達，提示此效應很可能是蝎毒抗癲癇反復發(fā)作的重要的機制之一。

靈芝孢子粉含有豐富的氨基酸和微量元素，具有免疫調(diào)節(jié)、清除自由基、提高機體耐缺氧能力等作用，而且對神經(jīng)系統(tǒng)還具有鎮(zhèn)靜和保護功能。李晶等［6］觀察靈芝孢子粉對戊四氮(PTZ)致癇大鼠學習記憶變化、caspase－3和livin的影響，結果表明，靈芝孢子粉能夠使PTZ致癇大鼠學習記憶能力增強，減輕神經(jīng)元的變性、壞死，并使Caspase－3蛋白陽性表達下調(diào)，說明靈芝孢子粉對癲癇后神經(jīng)元具有保護作用。

另外，大量的藥理研究顯示，青陽參、天麻、牡蠣、姜黃、川芎、丹參、寬葉纈草、洋金花、鉤藤、桂枝以及銀杏葉等中藥的有效成分也具有對多種癲癇模型的對抗作用。

2 中藥復方的實驗研究進展

中醫(yī)學對于癲癇的治療源遠流長，許多經(jīng)方中的方劑對現(xiàn)代研究仍具有指導意義，中藥復方的研究主要探討各類經(jīng)方或驗方的抗癇效果及其作用機制。隨著分子生物學技術的進步，近年對于復方治療癲癇的研究水平也上升到一個新的層次，高新技術的應用使中藥復方的研究取得大量成果，主要研究內(nèi)容是中藥復方對神經(jīng)遞質(zhì)的影響，對自由基代謝的影響，對調(diào)節(jié)免疫功能失調(diào)方面的影響，對細胞凋亡的影響，對神經(jīng)肽類遞質(zhì)及生長抑素的影響以及對腦神經(jīng)膠質(zhì)細胞的影響。

王凈凈等［7］以KA誘導癲癇模型，并以愈癇靈湯劑與顆粒劑對其進行藥物干預，采用高效液相色譜熒光法對海馬區(qū)與顳葉不同部位腦組織中的氨基酸類神經(jīng)遞質(zhì)的含量進行分析研究。結果表明，愈癇靈湯劑、顆粒劑均能通過上調(diào)GABA等抑制性神經(jīng)遞質(zhì)(IAAS)的表達水平，下調(diào) Glu等興奮性神經(jīng)遞質(zhì)(EAAS)的表達水平，并減少癲癇大鼠的發(fā)作次數(shù)，研究中還發(fā)現(xiàn)，IAAS的升高與EAAS的降低水平與減輕癲癇發(fā)作程度成一定的平行關系。

賀娟等［8］用草果知母湯對PTZ致癇大鼠進行藥物干預，并用原位雜交方法檢測草果知母湯對癲癇大鼠腦內(nèi)N－甲基－D－天門冬氨酸(NMDA)受體基因表達的影響。結果顯示，與模型組相比，中藥治療組大鼠海馬NMDAR1mRNA的含量明顯下降，說明草果知母湯可能是通過降低NMDAR1mRNA的表達從而降低NMDA受體的含量而起到抗癲癇作用的。

宋立群等［9］用安癇寧(柴胡、白芍、膽南星、鉤藤、茯苓、白胡椒等)沖劑對青霉素誘導的小鼠癲癇模型進行藥物干預，并觀察其腦組織中甲基－D－天門冬氨酸(MDA)、SOD、ATP酶的變化，研究結果表明，該復方能降低癲癇模型小鼠腦內(nèi)MDA的含量，并提高SOD的活性，從而減輕自由基對細胞膜的損傷，能起到一定的抗氧化作用，并有提高小鼠腦中ATP酶活力的作用。

張麗萍等［10］以PTZ誘導建立癲癇動物模型，并應用原位雜交技術研究草果知母湯對PTZ致癇大鼠海馬c－fos、c－jun基因表達的影響。結果顯示，PTZ致癇大鼠腦內(nèi)c－fos、c－jun基因表達顯著升高，經(jīng)草果知母湯治療后其表達下降，由此得出結論，草果知母湯的抗癲癇作用機制可能與下調(diào)癲癇大鼠海馬c－fos、c－jun的基因表達水平，抑制神經(jīng)元凋亡有關。

錢會南等［11］用調(diào)理脾胃復方對PTZ致癇大鼠進行藥物干預，并采用放免法觀察大鼠腦內(nèi)阿片肽含量的變化。結果顯示，大鼠海馬內(nèi)亮腦啡肽(L－ENK)及β－內(nèi)啡肽(β－EP)含量明顯升高，強啡肽(DYNA1－13)含量顯著降低。大腦皮層內(nèi)L－ENK含量顯著升高，DYNA1－13，β－EP含量未見明顯變化，因此認為，調(diào)理脾胃復方的抗癲癇作用機制可能與調(diào)節(jié)大鼠腦內(nèi)L－ENK、DYNA1－13、β－EP含量的變化有關。

戴常梅［12］在滌痰祛瘀法治療癲癇的實驗研究中，采用大鼠腹腔注射青霉素的方法復制癲癇動物模型，觀察腦泰通顆粒對大鼠腦組織中Na+－K+－ATP酶、Ca2+－ATP酶及超氧化物歧化酶(SOD)含量的影響。結果表明，丙戊酸鈉組與腦泰通組Na+－K+－ATP酶、Ca2+－ATP酶的活性明顯優(yōu)于對照組，但兩組間差異無統(tǒng)計學意義。提示滌痰祛瘀法能提高大鼠腦組織中ATP酶和SOD酶的活性，從而具有明顯抗癲癇作用。

3 針灸及穴位埋線的實驗研究進展

針刺的抗癲癇作用經(jīng)過長期的臨床觀察和實驗研究已經(jīng)得到證實，探討針刺治療的作用及機制已成為國內(nèi)外學者研究的新熱點。

目前研究認為，癲癇的機制可能是抑制性氨基酸遞質(zhì)，如γ－氨基丁酸(GABA)等介導的抑制作用減輕，引起興奮性神經(jīng)細胞異常高水平突觸傳遞所致。針刺的止癇作用可能是通過調(diào)節(jié)抑制性遞質(zhì)與興奮性遞質(zhì)的平衡而實現(xiàn)的。楊帆等［13］發(fā)現(xiàn)，電針大鼠“百會”、“風池”可明顯提高PTZ誘導癲癇大鼠腦內(nèi)GABA、丙氨酸(Ala)含量，并降低腦內(nèi)Glu含量。劉衛(wèi)英等［14］選擇青霉素－Na腹腔注射誘導大鼠急性癲癇模型，用穴位埋線法進行干預，穴位選取大鼠“大椎”、“肝俞”透“膽俞”(雙側)、“豐隆”(雙側)，并觀察其對癲癇大鼠腦內(nèi)氨基酸類神經(jīng)遞質(zhì)變化的影響。結果發(fā)現(xiàn)，穴位埋線可明顯降低興奮性氨基酸Glu、ASP等的含量，上調(diào)GABA/Glu的比值，從而調(diào)節(jié)皮質(zhì)EAAS與IAAS的平衡，發(fā)揮其抗癲癇作用。

癲癇以腦部興奮性神經(jīng)元突然過度放電為特征，腦電圖是臨床診斷癲癇并判斷癲癇好轉的重要方法。王津存等［15］利用腦立體定位手段，將電極精確植入大鼠腦內(nèi)深部核團以及額葉皮質(zhì)、海馬、杏仁核等這些與發(fā)作關系密切相關的部位，其研究準確地觀察并記錄了電針“百會”穴對癲癇發(fā)作時腦深部電活動的影響。結果表明，電針穴位刺激能明顯抑制氯化鋰－匹羅卡品致癇大鼠慢性期自發(fā)反復發(fā)作次數(shù)，同時還能明顯抑制與癲癇大鼠癲癇發(fā)作關系密切的腦組織部位的放電次數(shù)，尤其是杏仁核部分。張穎等［16］研究了針刺對電刺激模型的作用，發(fā)現(xiàn)針刺可顯著降低癲癇大鼠的放電平均波幅，放電最高波幅及放電頻率，提高其腦電基本頻率，說明針刺可顯著抑制癲癇性放電，控制癲癇發(fā)作。

癲癇發(fā)作神經(jīng)元細胞的損傷和死亡是腦損傷和癲癇反復發(fā)作的重要原因。最近的報導證明針刺能有效地抑制SE后神經(jīng)元細胞凋亡從而保護腦組織。陳文華等［17］用穴位埋線和常規(guī)針刺兩種方法對癲癇模型大鼠進行治療，并觀察其對發(fā)作后海馬神經(jīng)元凋亡的影響，并認為穴位埋線和針刺法可能通過抑制c－jun蛋白表達，促進Bcl－2蛋白表達，從而阻止癲癇持續(xù)狀態(tài)后大鼠海馬神經(jīng)元凋亡的發(fā)生發(fā)展，起到抗癲癇的作用，其中穴位埋線效果優(yōu)于常規(guī)針刺。

4 評述與展望

近年中醫(yī)藥治療癲癇取得了許多新成果［18］，目前的報導以中藥藥理、藥效及針灸治療研究的內(nèi)容為多，為中醫(yī)藥抗癇的機理提供了依據(jù)。今后還應加強中西藥合用以及針藥并用的臨床與實驗研究。臨床發(fā)現(xiàn)中西藥合用，可以減少西藥使用的劑量，直至逐漸停用西藥。這樣中西藥協(xié)同一可提高治癇效果;二可減少西藥相關的副作用，三可克服西藥的一些不良反應，特別是對于單用西藥治療效果不理想的患者，更應該中西醫(yī)結合治療，而針藥并用可以全方位多靶點地增強抗癲癇效應，彌補各自療效上的不足。中藥防治癲癇的歷史悠久，經(jīng)驗豐富，有必要進行努力發(fā)掘和提高。

［1］劉燕，廖衛(wèi)平，郭姣，等.柴胡三種萃取物的抗驚厥作用研究比較［J］.中醫(yī)藥學報，2002，30(6):21 －22.

［2］謝煒，鮑勇，于禮建，等.柴胡總皂甙對戊四氮慢性點燃大鼠海馬谷氨酸細胞的影響［J］.中華神經(jīng)醫(yī)學雜志，2006，5(8):761－763.

［3］陳俐，廖衛(wèi)平.石菖蒲萃取揮發(fā)油抗癲癇藥效研究［J］.中藥新藥與臨床藥理，2003，14(3):171 －173.

［4］陳俐，廖衛(wèi)平.石菖蒲揮發(fā)油對癲癇大鼠海馬氨基酸含量的影響［J］.中國中藥雜志，2004，29(7):670 －673.

［5］姜春玲，彭巖，張萬琴.蝎毒誘導紅藻氨酸癲癇大鼠海馬內(nèi)膽囊收縮素原mRNA的表達［J］.中國應用生理學雜志，2000，16(2):108－110.

［6］李晶，于海波，康玉明，等.靈芝孢子粉對癲癇大鼠學習記憶、caspase－3和 livin的影響［J］.中國病理生理雜志，2009，25(2):386－388.

［7］王凈凈，黃雁，何群，等.愈癇靈對慢性致癇大鼠海馬區(qū)氨基酸含量的影響［J］.湖南中醫(yī)學院學報，2004，24(6):8 －11.

［8］賀娟，梁怡，王洪圖.草果知母湯對點燃癲癇模型鼠大腦NMDA受體基因表達的影響［J］.中國中西醫(yī)結合雜志，1999，19(10):617－619.

［9］宋立群，肖洪彬，趙丹陽，等.安癇寧沖劑對小鼠癲癇模型腦組織中 MDA、SOD、ATP酶的影響［J］.中國實驗方劑學雜志，2002，8(3):44－46.

［10］張麗萍，賀娟，翟雙慶，等.草果知母湯在阻斷PTZ點燃癲癇模型中對大鼠腦內(nèi)c－fos、c－junmRNA表達的影響［J］.中國中西醫(yī)結合雜志，2000，20(8):606 －608.

［11］錢會南，王洪圖，齊治家，等.調(diào)理脾胃復方對PTZ點燃癲癇模型阿片肽含量的影響［J］.北京中醫(yī)藥大學學報，1999，22(1):35－37.

［12］戴常梅，李軍.滌痰祛瘀法治療癲癇的實驗研究［J］.浙江中西醫(yī)結合雜志，2007，17(7):419 －420.

［13］楊帆，徐國龍，王頻，等.電針對戊四唑點燃型癲癇大鼠腦內(nèi)氨基酸含量的影響［J］.針刺研究，2002，27(3):174 －176.

［14］劉衛(wèi)英，鄧元江，彭楚湘，等.穴位埋線對實驗性癲癇大鼠大腦皮質(zhì)氨基酸類神經(jīng)遞質(zhì)的影響［J］.中醫(yī)研究，2005，18(12):6 －9.

［15］王津存，黃遠桂，溫曉妮，等.電針穴位刺激對鋰－匹羅卡品誘導致癇大鼠行為及腦電活動的影響［J］.中國臨床康復，2006，10(7):110－112.

［16］張穎，劉芳，張璘，等.針刺對電刺激致癇動物模型影響的實驗研究［J］.河南醫(yī)藥信息，1999，7(7):10 －12.

［17］陳文華，莊禮興，丁曉虹.穴位埋藥線對癲癇持續(xù)狀態(tài)后神經(jīng)細胞凋亡的抑制作用［J］.廣州中醫(yī)藥大學學報，2004，21(2):118－121.

［18］抗癇靈對戊四氮誘導癲癇大鼠海馬區(qū)Bcl－2mRNA及其蛋白表達的影響［J］.中醫(yī)藥學報，2011，39(3):27－29.