液態(tài)發(fā)酵對飼料原料體外消化率的影響

趙娜 李紹章 楊雪海 魏金濤 黃少文

發(fā)酵可以改變飼料原料化學結構、提高飼料中真蛋白的含量（羅明朗，1996）、消除抗營養(yǎng)因子，產生多種生物活性物質，提高飼料利用率，體外消化測定法可以更簡便、快速、準確地對飼料營養(yǎng)價值進行評定，估測體內消化率，較好地比較飼料消化性的優(yōu)劣。

本試驗通過體外消化測定法對發(fā)酵飼料原料營養(yǎng)價值進行評定，比較不同飼料原料發(fā)酵后消化性的優(yōu)劣，為在實際生產中科學選擇發(fā)酵原料配方提供理論依據。

1 試驗材料與方法

1.1 試驗設計

試驗分7組14個處理。以玉米、玉米淀粉、豆粕等組成7種原料（見表1）進行液態(tài)發(fā)酵或不發(fā)酵，對其進行體外消化率的測定。

1.2 發(fā)酵樣品的制備

稱取原料20 g，加入66.67 ml水，接入植物乳桿菌106cfu/g DM，25℃發(fā)酵24 h，50℃烘干后返潮、粉碎。過50目篩，裝入樣品袋密封，低溫保存。

表1 原料組成

1.3 試劑

胃蛋白酶(1∶3 000)、胰酶(1∶250)購自武漢谷歌生物科技有限公司；氯霉素；乙醇、磷酸二氫鈉、磷酸氫二鈉、鹽酸等常規(guī)試劑均為分析純。

1.4 試驗方法

1.4.1 體外消化操作步驟

消化試驗參照Boisen等(1995)體外模擬消化方法和侯小峰（2005）方法改進。

胃消化階段：準確稱取1 g樣品（精確至0.000 1 g），置于100 ml具塞三角瓶中，向瓶中加入15 ml磷酸緩沖液（0.2M，pH值6.0），小心混合均勻后，加入10ml 0.2 M HCl溶液，將食糜pH值調整至2.0，加入1 ml新鮮的胃蛋白酶鹽酸溶液，并使pH值仍保持在2.0。加入0.5 ml細菌生長抑制劑（0.5%氯霉素溶液），用橡膠塞封口。置于40℃恒溫搖床中（120次/min），消化時間為4 h。

小腸消化階段：待胃消化階段結束后，向食糜中加入10 ml磷酸緩沖液（0.2 M，pH值6.8）和5 ml 0.6M的NaOH溶液，調整食糜pH值至6.5，然后加入1 ml豬胰酶溶液，并使pH值仍保持在6.5。置于40℃恒溫搖床中（120次/min），消化時間為4 h。

小腸消化期結束后將所有食糜轉移至過濾器內無氮濾紙中，沖洗殘渣，干燥，測定粗蛋白質、干物質含量。

1.4.2 粗蛋白質的測定

用FOSS公司2300型全自動凱氏定氮儀測定。

1.5 數據處理

所得數據經SPSS13.0和Excel 2003分析，進行t檢驗。

2 試驗結果與分析

各原料發(fā)酵前后CP含量變化見表2，CP體外消化率變化見表3，DM體外消化率見表4。

表2 各原料發(fā)酵前后CP含量（%）

表3 各原料發(fā)酵前后CP體外消化率（%）

表4 各原料發(fā)酵前后DM體外消化率（%）

表2結果顯示，發(fā)酵可以稍微提高原料中CP的含量，但差異并不顯著（P＞0.05）。這與本試驗中接種的益生菌菌種有關，植物乳桿菌對提高原料中CP含量效果不明顯。而楊建雄等（1993）將玉米粉接種枯草桿菌和熱帶假絲酵母發(fā)酵72 h后蛋白質含量由7.56%增長到28.47%。

由表3可以看出，各組原料經發(fā)酵后CP體外消化率均得到提高。這可能是飼料原料經植物乳桿菌發(fā)酵后改善了原料中蛋白質品質，可被消化酶消化利用的部分增加，提高了CP的體外消化率。

表3顯示出較明顯的規(guī)律：發(fā)酵前玉米或玉米淀粉含量高的原料CP體外消化率較高。原料發(fā)酵后隨玉米的比例減少，CP消化率增加的比例下降。玉米、玉米豆粕3∶1組發(fā)酵前后粗蛋白質消化率變化顯著（P＜0.05）。這可能是玉米提供了糖分，促進了發(fā)酵過程中蛋白品質的改善；也可能是玉米中粗蛋白質含量較低，也就是CP基數較低，所以CP消化率提高較大。

本試驗中，玉米、玉米豆粕3∶1經植物乳桿菌發(fā)酵后干物質消化率得到顯著提高（P＜0.05）。說明植物乳桿菌對提高飼料原料中可被消化酶和水溶性物質效果較為明顯。

3 小結

飼料原料經植物乳桿菌體外消化后CP含量略有提高；玉米含量高的混合原料經發(fā)酵后CP體外消化率和DM體外消化率得到明顯提高。

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