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    血脂康對高脂血癥大鼠脂聯(lián)素、瘦素及炎癥因子的影響

    2011-02-08 07:59:14吳冬梅施廣飛
    中國中醫(yī)急癥 2011年1期
    關(guān)鍵詞:血脂康脂聯(lián)素瘦素

    吳冬梅 潘 濤 施廣飛

    1南京軍區(qū)南京總醫(yī)院湯山分院(江蘇南京210000)

    2南京中醫(yī)藥大學(xué)第一臨床醫(yī)學(xué)院(江蘇南京210046)

    3江蘇省南京鼓樓醫(yī)院(江蘇南京210008)

    脂聯(lián)素、瘦素、白細胞介素6(IL-6)是脂肪組織分泌的細胞因子。脂聯(lián)素不僅與肥胖、胰島素抵抗、2型糖尿病有關(guān),還具有抗炎、抗動脈粥樣硬化(AS)作用;而瘦素可能通過影響血脂代謝、誘導(dǎo)氧化應(yīng)激及炎癥反應(yīng)參與AS的形成。本文通過觀察血脂康對脂聯(lián)素、瘦素及C反應(yīng)蛋白(CRP)、IL-6的影響發(fā)現(xiàn)其抗動脈粥樣硬化的另一機制。

    1 材料與方法

    1.1 實驗動物 清潔級SD大鼠36只,雄性,體質(zhì)量(200±10)g,南京軍區(qū)南京總醫(yī)院比較醫(yī)學(xué)科提供。

    1.2 試劑及儀器 血脂康膠囊由北大維信生物科技有限公司生產(chǎn),批號 20070611;CRP、IL-6試劑盒(美國 ADL公司生產(chǎn),南京夏斯生物科技公司提供);脂聯(lián)素、瘦素試劑盒(上海西唐生物科技有限公司)。Olympus 2700型生化自動分析儀;DENLEY DRAGONWellscan MK3 酶標儀(Thermo,芬蘭);Wellwash 4 MK2洗板機(Thermo,芬蘭);PYX-DHS數(shù)字顯示隔水式電熱恒溫培養(yǎng)箱;TGL-168離心機(上海安亭科學(xué)儀器廠)。

    1.3 高脂飼料配方 造模用高脂飼料由81.3%基礎(chǔ)飼料加10%豬油、5%白糖、3%膽固醇 (粉劑)、0.2%丙基硫氧嘧啶 (片劑)、0.5%膽酸鈉(粉劑)混合,加工成外觀與普通飼料相似的高脂飼料。

    1.4 造模及分組 大鼠隨機分為三組,每組12只,分籠飼養(yǎng),飼養(yǎng)環(huán)境溫度25℃恒溫。大鼠適應(yīng)環(huán)境1d后開始實驗。各組大鼠實驗開始時在無菌操作下,一次性腹腔內(nèi)注射維生素D360萬U/kg,隨后正常組飼喂普通飼料,余各組飼喂高脂飼料。造模6周后,各組隨機取眼眶血4mL,標本離心后取血清檢測血脂指標,證實造模成功,進入治療階段。正常組灌胃純凈水2mL,1次/d;模型組灌胃純凈水 2mL,1次/d;血脂康組灌胃血脂康1000mg/(kg·d),2mL,1 次/d。 各組均于每日早 9 時定時灌藥。1.5 血液標本采集 治療6周后,禁食不禁水1d。應(yīng)用氯胺酮100mg/kg腹腔內(nèi)注射麻醉,待大鼠意識喪失、四肢肌肉松弛后(約5~10min),將大鼠四肢固定于動物手術(shù)臺上。首先于劍突下剪開皮膚及皮下組織,剖開胸腔暴露心臟,于下腔靜脈右心房處,以無菌注射器取血8~10mL,將血樣暫時存放生化管中,4℃冰箱保存。血標本采集完畢,離心后取血清于-70℃恒溫冰箱內(nèi)保存待測。脂聯(lián)素、瘦素、CRP、IL-6測定均采用雙抗體夾心ELISA法。

    2 結(jié) 果

    2.1 各組治療前后血脂水平比較 見表1。模型組、血脂康組治療前總膽固醇明顯高于正常組(P<0.05),說明高脂血癥大鼠模型造模成功。血脂康組治療后與模型組相比總膽固醇明顯降低(P<0.05)。模型組、血脂康組治療前低密度蛋白膽固醇水平均高于正常組(P<0.05),模型組與血脂康組相比,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),提示血脂康能明顯降低低密度脂蛋白水平。

    表1 各組治療前后血脂水平比較(mmol/L

    表1 各組治療前后血脂水平比較(mmol/L

    與正常組比較,*P<0.05;與模型組相比,△P<0.05。下同。

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    2.2 各組治療前后CRP、IL-6比較 見表2。治療前,血脂康組、模型組與正常組相比,CRP、IL-6 明顯增高(P<0.05);治療后,血脂康組CRP、IL-6較模型組明顯降低(P<0.05)。

    表2 各組治療前后CRP、IL-6比較

    表2 各組治療前后CRP、IL-6比較

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    2.3 各組治療前后脂聯(lián)素、瘦素水平比較 見表3。治療前,血脂康組、模型組與正常組相比,脂聯(lián)素水平均明顯降低 (P<0.05),瘦素水平明顯增高(P<0.05),治療后,血脂康組較模型組脂聯(lián)素明顯增高(P<0.05),瘦素明顯降低(P<0.05)。

    表3 各組治療前后脂聯(lián)素、瘦素水平比較

    表3 各組治療前后脂聯(lián)素、瘦素水平比較

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    3 討 論

    動脈粥樣硬化是一個極慢而復(fù)雜的病理過程,血管內(nèi)皮細胞功能與動脈粥樣硬化的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān),各種危險因素導(dǎo)致血管內(nèi)皮細胞損傷后,大量炎癥因子和細胞浸潤,尤其是巨噬細胞在內(nèi)皮下聚集,吞噬大量脂質(zhì)形成泡沫細胞,從而形成粥樣斑塊。內(nèi)皮的慢性炎癥可能是由多種機制所觸發(fā),但主要是由于腫瘤壞死因子(TNF-α)、IL-6、單核細胞趨化蛋白 1(MCP1)和抵抗素等促炎性細胞因子與NO和脂聯(lián)素等抗炎性因子的失衡所致。脂肪組織分泌的IL-6是血中IL-6的主要來源之一,IL-6參與了炎癥反應(yīng)、胰島素抵抗和動脈粥樣硬化的發(fā)生[1-2]。CRP被認為是急性心血管事件最強的炎性標記物,CRP具有直接促炎癥的效應(yīng),在動脈粥樣硬化斑塊內(nèi)可以刺激炎性介質(zhì)的釋放與表達,是冠心病的獨立危險因素。瘦素是由白色脂肪組織合成和分泌的一種多肽激素,是由肥胖基因的編碼產(chǎn)物。有研究發(fā)現(xiàn)瘦素濃度依賴性的促血小板聚集作用。在動脈粥樣斑塊中,瘦素可使血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)、基質(zhì)金屬蛋白酶合成增加,從而導(dǎo)致血管重塑。研究顯示瘦素是獨立的冠心病危險因素,可通過獨立影響脂代謝參與冠心病,其可直接抑制甘油三酯的形成和促進脂肪酸的氧化。

    脂聯(lián)素是近來發(fā)現(xiàn)的脂肪細胞因子,也稱為GBP-28[3-4],是由apM1基因編碼的含244個氨基酸的蛋白,在人類脂肪細胞中特異性地高表達。多項研究表明脂聯(lián)素具有抗炎、抗動脈粥樣硬化作用。針對動脈粥樣硬化形成的幾種主要細胞成分其作用機制有以下方面:脂聯(lián)素能減少TNF-α所刺激內(nèi)皮細胞表達的細胞黏附分子VCAM-1、E-選擇素、ICAM-1等,從而防止血液中單核細胞等黏附到內(nèi)皮細胞上;并發(fā)現(xiàn)脂聯(lián)素能抑制單核細胞來源的巨噬細胞脂質(zhì)攝取及清道夫受體的表達,抑制巨噬細胞向泡沫細胞的分化[6]。 進一步研究[7]顯示,脂聯(lián)素通過 IL-10表達選擇性增加人巨噬細胞中其織金屬蛋白酶抑制劑1的表達而防止斑塊破裂,減少血栓形成。表明不僅在炎癥反應(yīng)所導(dǎo)致的動脈粥樣硬化的初始形成及進展,而且在其急性血栓并發(fā)癥中,脂聯(lián)素都起著極重要的作用。

    血脂康是從中藥紅曲中提煉精制而成的天然他汀類藥物,主要成分為洛伐他汀,還含有多種不飽和脂肪酸和必需氨基酸。研究[8]表明血脂康使ox-LDL巨噬細胞降解值下降,抑制巨噬細胞攝取ox-LDL;明顯下降CRP[9],并且與血脂變化無明顯相關(guān);抑制血管平滑肌細胞增殖遷移[10];減輕動脈粥樣硬化,維持血管壁彈性及減少粥樣硬化的面積[11]。表明血脂康可抗炎、抗動脈粥樣硬化,不但具有直接調(diào)脂作用,還可降低CRP、IL-6及瘦素等炎癥因子,升高脂聯(lián)素這一抗炎因子,通過維持炎癥因子與抗炎因子之間的平衡而影響抗動脈粥樣硬化作用。

    [1] Fasshauer M,Klein J,Lossner U,et al.Interleukin (IL ) – 6 mRNA exp ression isstimulated by insulin,isop roterenol,tumour necrosisfactor alpha,growth hormone,and IL-6 in 3T3-L1 Adipocytes[J].Horm Metab Res,2003, 35(1):147-152.

    [2] Fried SK,BunkinDA,GreenbergAS.Omental and subcutane ous adipose tissues of obese subject srelease interleukin- 6:depot difference and regulation by glucocorticoid[J]. JClinEndo2 crinolMetab,1998, 83(5):847-850.

    [3] Maeda K,Okubo K,Shimomura I,et al.cDNA cloningand expression of anovel adiposespecific collagen-likefactor,apM1 (adiposemost abundant genetranscript 1) [J].Biochemical and Biophysical Research Communications,1996,221(3):286-289.

    [4] Nakano Y,Tobe T,Choi-Miura NH,et al.Isolationand characterization of GBP28,a novel gelatin-binding proteinpurified from human plasma[J].Journal of Biochemistry,1996,120(4):803-812.

    [5] Noriyuki O, Shinji K,Yukio A,et al.Novel modulator for endothelial adhesion molecules adipocyte-derived plasma protein adiponectin [J].Circulation,1999,100(12):2473-2476.

    [6] Noriyuki O,Shinji K,Yukio A,et al.Adipocyte-derived plasma protein,Adiponectin,Suppresses Lipid Accumulation and Class A Scavenger Receptor Expression in Human Monocyte-Derived Macrophages[J] .Circulation,2001,103(7):1057-1063.

    [7] Noriyuki O,Masahiro K,Shinji K,et al.Adiponectin specifically increased tissue inhibitor of metalloproteinase-1 through interleukin-10 expression in human Macrophages[J].Circulation,2004,109(10):2046-2049.

    [8]徐伯平,程蘊林,魯翔,等,血脂康對鼠巨噬細胞攝取氧化低密度脂蛋白能力影響的觀察[J].江蘇預(yù)防醫(yī)學(xué),2004,15(1):9-13.

    [9] 王鋒,朱川.血脂康對血脂異常患者C反應(yīng)蛋白的影響[J].廣州醫(yī)藥,2003,33(5):32-33.

    [10]曾定尹,于波,鄭曉偉,等.血脂康對家兔血管平滑肌細胞增殖遷移的抑制作用[J].中華內(nèi)科雜志,1998,37:367-370.

    [11]鄭廣娟,張文高,張亞同,等.血脂康對載脂蛋白E基因敲除小鼠動脈粥樣硬化的影響[J].中國動脈硬化雜志,2003,11(5):408-410.

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