濕熱顆粒抗炎、止癢的實驗研究

郭建生，張 猛，曾貴榮，聶子文，陳 君

（湖南中醫(yī)藥大學中藥現(xiàn)代化重點實驗室；國家中藥管理局藥性與藥效研究三級實驗室，湖南 長沙 410208）

濕熱顆?？寡?、止癢的實驗研究

郭建生，張 猛，曾貴榮，聶子文，陳 君

（湖南中醫(yī)藥大學中藥現(xiàn)代化重點實驗室；國家中藥管理局藥性與藥效研究三級實驗室，湖南 長沙 410208）

目的 研究濕熱顆粒抗炎止癢的作用。方法 通過濕熱顆粒對二甲苯所致小鼠耳廓腫脹模型、角叉菜膠所致大鼠足跖腫脹模型的影響，觀察濕熱顆粒對炎癥的影響；通過濕熱顆粒對葡聚糖-40所致的小鼠瘙癢模型、磷酸組胺豚鼠致癢模型的影響，觀察濕熱顆粒對瘙癢的影響。結(jié)果 與模型組比較，濕熱顆粒各劑量組能顯著降低二甲苯所致的小鼠耳廓腫脹度,差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；濕熱顆粒中劑量組能顯著降低角叉菜膠致炎后30 min，1、2、3、4、6 h大鼠足趾腫脹率，差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；濕熱顆粒中劑量、高劑量組能顯著延長葡聚糖-40所致小鼠瘙癢的潛伏期及減少其瘙癢次數(shù)，差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.01）；濕熱顆粒中劑量、高劑量組能顯著增加磷酸組胺所致豚鼠瘙癢的致癢閾，差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。結(jié)論 濕熱顆粒具有抗炎、止癢的作用。

濕熱顆粒；抗炎；止癢；大鼠；小鼠；豚鼠；土茯苓；金錢草

濕熱顆粒主要由土茯苓、金錢草、黃柏、梔子、地黃、玄參、薏苡仁等藥組成，主要功效為清熱利濕、祛風止癢；主治濕熱所致全身性水皰、膿皰、滲出糜爛性皮炎、泛發(fā)性濕疹、天皰瘡、傳染性濕疹樣皮炎。通過對濕熱顆?？寡缀椭拱W方面的主要藥效實驗研究，為其臨床應(yīng)用提供一定的實驗依據(jù)，現(xiàn)將實驗方法及結(jié)果報道如下。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 動物 清潔級昆明種小鼠，體質(zhì)量18～22 g，雌雄兼用；清潔級SD大鼠，體質(zhì)量180～220 g，雌雄兼用；合格證號：SCXK(豫)2005-0001。清潔級健康豚鼠，體質(zhì)量200～250 g，雌雄兼用，合格證號：SCXK(湘)2006-0001，以上動物由湖南長沙市開福區(qū)東創(chuàng)實驗動物科技服務(wù)部提供。

1.1.2 藥物 濕熱顆粒（批號：20090512，1.0 g干浸膏含生藥4.05 g，臨床擬用量干浸膏8.84 g/d）；撲爾敏（批號：080901國藥準字：H23021064黑龍江百泰藥業(yè)有限公司 規(guī)格：4 mg/片）；阿司匹林腸溶片（批號：090206，國藥準字 H43021814，舒泰神（北京）藥業(yè)有限公司 規(guī)格：50 mg/片）；磷酸組胺（批號：20071017國藥集團化學試劑公司）；二甲苯（批號：20080304長沙精細化工廠）；角叉菜膠（批號：0812生產(chǎn)于Wanbio Corporation）。

1.1.3 儀器 UV-9100分光光度計 (北京瑞利分析儀器有限公司)；PV-200足趾容積測量儀(成都泰盟科技有限公司)；YLS-Q4耳腫打孔器（山東省醫(yī)學科學設(shè)備站）。

1.2 方法

1.2.1 對二甲苯所致小鼠耳廓腫脹的影響[1]選體質(zhì)量18～22 g的昆明小鼠50只，雄性，隨機分成5組：模型空白組；阿司匹林陽性對照組；濕熱顆粒低、中、高劑量組（以下簡稱高、中、低劑量組）。模型空白組灌胃給予生理鹽水，其余各組分別灌胃給予阿司匹林（0.786 g/kg）、濕熱顆粒低劑量（含生藥4.69 g/kg）、中劑量（含生藥 9.38 g/kg）、高劑量（含生藥18.76 g/kg），每只動物按0.2 mL/10 g體質(zhì)量灌胃，連續(xù)灌胃給藥5 d，于末次給藥后1 h，每只小鼠右耳內(nèi)外側(cè)涂二甲苯0.05 mL致炎，左耳不涂為正常耳對照，30 min后脫頸處死，沿耳廓基線剪下雙耳，用YLS-Q4耳腫打孔器沖下左耳及右耳同一部位的圓片，立即在分析天平上稱重。以兩耳質(zhì)量差值，計算小鼠耳廓腫脹度。

1.2.2 對角叉菜膠所致的大鼠足趾腫脹的影響[2]選體質(zhì)量180～220 g的SD大鼠50只，雄性，隨機分成5組：模型空白組；阿司匹林陽性對照組；濕熱顆粒低、中、高劑量組。模型空白組給予灌胃生理鹽水，其余各組分別灌胃給予阿司匹林（0.548 g/kg）、濕熱顆粒低劑量（含生藥3.27 g/kg）、中劑量（含生藥6.54 g/kg）、高劑量（含生藥 13.08 g/kg），每只動物按1 mL/100 g體質(zhì)量灌胃。連續(xù)灌胃給藥5 d，于末次給藥后測量未致炎前的各大鼠足趾體積。給藥后1 h，每只大鼠右足趾皮下注射1%角叉菜膠0.1 mL致炎，隨后測量注射角叉菜膠后30 min，1、2、3、4、6 h的大鼠右后足趾腫脹容積。測定足趾腫脹容積、計算腫脹率。

1.2.3 對葡聚糖-40所致小鼠瘙癢的影響[3]選體質(zhì)量18～22 g的昆明小鼠50只，雌雄各半，隨機分成5組，分別為：模型空白組；撲爾敏組；濕熱顆粒低、中、高劑量組。模型空白組灌胃給予生理鹽水，其余各組分別灌胃給予撲爾敏濕熱顆料低、中、高劑量藥液（給藥劑量同“1.2.1”），連續(xù)灌胃給藥4 d，于末次給藥1 h后，每只小鼠尾靜脈注射0.2 mL葡聚糖-40，觀察小鼠出現(xiàn)以瘙癢、咬尾、撓背等為瘙癢特征的潛伏期以及30 min內(nèi)的搔抓次數(shù)。

1.2.4 對磷酸組胺豚鼠致癢的影響[4]取健康豚鼠60只，雌雄各半，隨機分成5組，每組12只，分別為：模型空白組；撲爾敏陽性對照組；濕熱顆粒低、中、高劑量組。模型空白組灌胃給予生理鹽水，其余各組分別灌胃給予撲爾敏（0.96 mg/kd）、濕熱顆粒低劑量（含生藥2.86 g/kg）、中劑量（含生藥 5.72 g/kg）、高劑量（含生藥 11.44 g/kg），每只動物按1 mL/100 g體質(zhì)量灌胃，連續(xù)給藥7 d。于第6天給藥后剔除各組豚鼠右后足背部的毛，第7天末次給藥后1 h內(nèi)用砂紙分別擦傷各組豚鼠右后足背部剃毛處，面積約1 cm2。于末次給藥1 h后開始分別在各組豚鼠右后足創(chuàng)傷處滴0.01%組胺磷酸溶液0.05 mL，此后每隔3 min分別依次遞增組胺的濃度（0.01%、0.02%、0.03%），每只每次滴0.05 mL，直至豚鼠出現(xiàn)回頭舔右足時，停止實驗，記錄磷酸組胺的滴加次數(shù)，換算成磷酸組胺滴加總量。

1.3 統(tǒng)計學分析

所有資料采用SPSS 16.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計處理，采用“”表示。均采用雙側(cè)檢驗，符合正態(tài)性和方差齊性的資料，采用t檢驗；不符合正態(tài)性和方差齊性的資料，采用秩和檢驗。

2 結(jié)果

2.1 對二甲苯所致小鼠耳廓腫脹的影響

與模型組比較，濕熱顆粒低、中、高劑量組均能顯著降低二甲苯所致的小鼠耳廓腫脹度,差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；表明濕熱顆粒對二甲苯所致小鼠耳廓腫脹有一定的抗炎作用。結(jié)果見表 1。

2.2 對角叉菜膠所致的大鼠足趾腫脹的影響

與模型組比較，濕熱顆粒低、中、高劑量能顯著降低角叉菜膠所致大鼠足跖腫脹率，差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。表明濕熱顆粒對角叉菜膠所致的大鼠足趾腫脹具有一定的抗炎作用。結(jié)果見表2。

表1 對二甲苯所致小鼠耳廓腫脹的影響（n=10，，mg）

表1 對二甲苯所致小鼠耳廓腫脹的影響（n=10，，mg）

注：與模型組比較▲P<0.05，▲▲P<0.01。下表同。

組 別模型組阿司匹林組低劑量組中劑量組高劑量組劑量(g/kg)—0.786 1.16 2.32 4.63左耳重13.93±1.17 12.68±1.37 12.95±1.76 13.82±3.39 14.22±3.81右耳重34.97±3.95 22.03±4.08▲▲27.25±7.27▲▲27.73±3.26▲26.26±8.34▲▲腫脹度21.04±3.83 9.45±3.40▲▲14.3±7.50▲14.29±5.02▲11.54±8.40▲▲

表2 對角叉菜膠致大鼠足跖腫脹率的影響 （n=10，，%）

表2 對角叉菜膠致大鼠足跖腫脹率的影響 （n=10，，%）

組 別模型組阿司匹林組高劑組中劑組低劑組30 min 19.11±10.17 14.47±4.82 22.86±9.91 17.35±5.98 17.14±12.17 1 h 32.0±9.78 18.77±7.93▲▲18.05±7.44▲▲18.89±6.18▲▲18.86±5.68▲▲2 h 39.40±10.19 19.59±5.76▲▲18.35±7.73▲▲22.79±5.64▲▲22.23±6.23▲▲3 h 32.40±10.46 17.02±9.31▲▲17.90±6.08▲▲19.78±5.28▲▲23.11±6.91▲4 h 26.08±6.27 14.65±7.95▲▲20.21±7.66 15.28±7.31▲▲21.71±5.10 6 h 22.87±7.35 10.44±6.24▲▲20.59±6.54 17.55±4.17▲17.67±4.36

2.3 對葡聚糖-40所致小鼠瘙癢的影響

與模型組比較，濕熱顆粒中劑量、高劑量能顯著延長葡聚糖-40所致小鼠瘙癢的潛伏期及減少其瘙癢次數(shù)，差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.01）。表明濕熱顆粒對葡聚糖-40所致小鼠瘙癢具有一定的止癢作用。結(jié)果見表3。

表3 對葡聚糖-40小鼠瘙癢的影響（n=10，）

表3 對葡聚糖-40小鼠瘙癢的影響（n=10，）

組 別模型組撲爾敏組低劑組中劑組高劑組劑量（g/kg）—1.57×10-3 1.16 2.32 4.63潛伏期（s）181.1±57.39 272.0±68.74▲▲240.9±110.46 261.6±71.05▲283.7±54.58▲▲30 min瘙癢次數(shù)30.4±10.18 18.2±6.34▲▲27.60±9.49 18.3±9.82▲▲16.0±4.11▲▲

2.4 對磷酸組胺豚鼠致癢的影響

與模型組比較，濕熱顆粒中劑量、高劑量組能顯著提高磷酸組胺所致豚鼠瘙癢的致癢閾，差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。表明濕熱顆粒對磷酸組胺所致豚鼠瘙癢具有一定的止癢作用。結(jié)果見表4。

表4 對磷酸組胺豚鼠致癢的影響（n=10，，mg）

表4 對磷酸組胺豚鼠致癢的影響（n=10，，mg）

組 別模型組撲爾敏組低劑組中劑組高劑組劑量(g/kg）—0.96×10-3 0.71 1.41 2.82致癢閾（磷酸組胺總量）0.08±0.03 0.19±0.09▲▲0.13±0.08 0.16±0.06▲0.20±0.06▲▲

3 討論

全身性水皰、膿皰、滲出糜爛性皮炎、泛發(fā)性濕疹、天皰瘡、傳染性濕疹樣皮炎在其病程發(fā)展過程中均有炎癥反應(yīng)；茯苓、金錢草、黃柏等中藥均具有較好的抗炎癥的效果，是濕熱顆粒治療炎癥的物質(zhì)基礎(chǔ)，也遵照了祖國醫(yī)學的方劑配伍藥性理論。此類皮膚病在產(chǎn)生炎癥的同時也表現(xiàn)腸瘙癢的癥狀，瘙癢的產(chǎn)生與病原微生物密切相關(guān)，然而上述中藥具有很好的抗病原微生物的作用，因此可以有效的解除瘙癢。

通過濕熱顆粒抗炎、止癢等實驗的研究。結(jié)果表明：濕熱顆粒能減輕二甲苯所致的小鼠耳廓腫脹和角叉菜膠所致的大鼠足趾腫脹，具有一定的抗炎作用；對葡聚糖-40所致小鼠瘙癢，均能延長瘙癢的潛伏期和減少30 min內(nèi)瘙癢的次數(shù)，對磷酸組胺所致的豚鼠致癢能延長致癢閾，有一定的止癢作用，結(jié)果表明濕熱顆粒具有抗炎、止癢的作用。

［1］陳 奇.中藥藥理研究方法學［M］.北京:人民衛(wèi)生出版社,2006：298-299.

［2］姜靜巖,張喜旺.風痛丸抗炎作用的藥理學實驗研究［J］.解放軍藥學學報,2009,（3）:200-202.

［3］孫 艷.養(yǎng)血止癢膠囊對小鼠瘙癢模型的實驗研究［J］.齊齊哈爾醫(yī)學院學報,2005,26（1）：19-20.

［4］余明蓮，馬建麗.苦參堿止癢乳膏藥效學研究 ［J］.中國藥師，2008,11(1):18-20.

（本文編輯 彭芝配）

Experimental study of Shire particles on relieving inflammatory and itching

GUO Jian-sheng,ZHANG Meng,ZENG Gui-rong,NIE Zi-wen,CHEN Jun
（Pharmacy College,TCM University of Hunan,Changsha,Hunan 410208,China）

Objective To study the effects of Shire particles on relieving inflammatory and itching.Methods According to the actions of the particles on ear swelling model of mice induced by xylene and paw edema model of rats induced by carrageenan,the effects of the particles on inflammatory was measured;according to the model of the actions of the particles on itching in mice induced by dextran-40 and in guinea pig induced by Histamine phosphate,the effects of the particles on itching was measured.Results Compared with modelgroup,each dose groups of Shire particles significantly decreased the ear swelling(P<0.05);significantly reduced the paw swelling after 30min,1h,2h,3h,4h and 6h of carrageenan inflammation(P<0.05);significantly extended the period of scrapie and reduced the itching(P<0.01);and significant increased in phosphorylation(P<0.05).Conclusion Shire particles is effective for anti-inflammatory and antipruritic.

Shire particles;anti-inflammatory;anti-pruritic;rats;mice;guinea pig;Smilax Glabra;desmodium

R285.5

A

10.3969/j.issn.1674－070X.2011.01.011.040.03

2010－07－15

湖南中醫(yī)藥大學“中藥學”重點學科資助。

郭建生（1953-），男，山西太谷人，教授，博士研究生導師，主要從事中藥藥性理論與中藥新藥研究。