自動封閉式病理組織脫水機(jī)的應(yīng)用體會

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(江蘇大學(xué)附屬醫(yī)院病理科,江蘇 鎮(zhèn)江 212001 E-mail：yajunsun@163.com)

自動封閉式組織脫水機(jī)性能優(yōu)良、操作方便,但是使用中諸多因素調(diào)節(jié)不當(dāng),都會不同程度地影響制片的質(zhì)量。為了充分發(fā)揮脫水機(jī)的優(yōu)越性,我們經(jīng)過仔細(xì)地研究和摸索實(shí)踐,設(shè)計(jì)出一套比較合理的程序和方法,有效地提高了組織處理的質(zhì)量,為制片提供了保證。現(xiàn)介紹如下：

1 材料和方法

1.1 儀器 英國原產(chǎn)Shandon牌HYPERCENTER XP型自動封閉式病理組織脫水機(jī)。

1.2 試劑 20%甲醛2缸、70%乙醇 1缸、80%乙醇1缸、95%乙醇3缸、無水乙醇 3缸、硬脂酸石蠟(硬脂酸∶石蠟=2∶3)1缸、100%石蠟1缸依次共為 12個(gè)缸。

1.3 方法 具體操作步驟,見表1。

表1 自動封閉式組織脫水機(jī)的操作步驟

以上所有步驟均在密閉反應(yīng)槽內(nèi)進(jìn)行,共需約14h。標(biāo)本均當(dāng)日下午上班時(shí)取材,下午下班前將組織放入密閉反應(yīng)槽內(nèi)開始脫水,到次日上午8時(shí)就可進(jìn)行包埋。整個(gè)過程在夜間進(jìn)行,節(jié)省了1個(gè)工作日。

1.4 藥液的更換 ①視標(biāo)本量的多少進(jìn)行更換,一般4周更換一次。②甲醛、70%乙醇、80%乙醇全部換新的液體。③95%及無水乙醇分別將Ⅰ號缸的溶液倒棄,將Ⅱ、Ⅲ號缸依次向前移,而將其最后一道缸換新液。④硬脂酸石蠟及100%石蠟一般不需要更換,只要及時(shí)補(bǔ)充新的液體即可。

2 結(jié)果

整個(gè)脫水處理過程,均在封閉環(huán)境內(nèi)進(jìn)行,無需手工介入,操作方便,而且本方法利用夜間時(shí)間完成,不但節(jié)約了時(shí)間,同時(shí)也節(jié)省了人力。整個(gè)脫水過程可批量進(jìn)行,最多可容納約250～300只一次性包埋盒,所處理的組織制成的切片染色清晰、結(jié)構(gòu)分明。而且使用此法,無論標(biāo)本大小,均不會出現(xiàn)小標(biāo)本(如胃鏡切片)干脆或大標(biāo)本脫水不徹底、組織發(fā)白的情況。

3 討論

我們的體會是：固定是整個(gè)組織處理過程的關(guān)鍵,有了完全徹底的固定,脫水效果就明顯。由于我們科所接受的送檢標(biāo)本當(dāng)日取材,為保證標(biāo)本固定充分,脫水程序中增加了補(bǔ)充固定。因市售甲醛濃度可能不佳,所以將甲醛濃度調(diào)整為20%[1],同時(shí)使用兩道甲醛并將固定液的溫度定在40～45℃之間,時(shí)間各定為90min,可達(dá)到良好的固定效果。脫水劑一般選用乙醇,乙醇脫水能力強(qiáng)而快,并能使組織硬化,缺點(diǎn)是使組織強(qiáng)烈收縮易引起過度硬化、變脆,所以脫水時(shí),應(yīng)注意防止過度脫水的現(xiàn)象。我們發(fā)現(xiàn)溫度對乙醇滲透脫水的影響很大,當(dāng)室內(nèi)溫度＞30℃時(shí)組織內(nèi)水分子與乙醇之間運(yùn)動加快,縮短組織脫水時(shí)間。當(dāng)反應(yīng)溫度＜10℃時(shí)組織內(nèi)水分子與乙醇之間運(yùn)動變慢,組織脫水時(shí)間就要延長[2]。這樣由于四季氣溫的變化對組織脫水的效果和速度就會造成一定的影響。為此我們在用自動脫水機(jī)對組織脫水時(shí),在脫水這個(gè)過程中,采用恒溫的方法,將溫度設(shè)定為35℃。使得脫水反應(yīng)的溫度四季恒定,從而使整個(gè)脫水過程在一致的條件下完成,并有利于切片的質(zhì)控。機(jī)器保養(yǎng)和使用的注意事項(xiàng)：①硬脂酸石蠟和100%石蠟的溫度應(yīng)控制在60～62℃之間,不宜過高,否則會出現(xiàn)切片上組織有裂隙或細(xì)胞皺縮。硬脂酸石蠟容易消耗,應(yīng)定期及時(shí)新配補(bǔ)足,使液面保持在標(biāo)志線以上,不然反應(yīng)槽的溫度敏感元件由于位置較高,就有可能被燒壞。此外,蠟液使用久后,其中的雜質(zhì)一定要清除,預(yù)防管道堵塞。②當(dāng)二甲苯呈乳糜狀時(shí),則應(yīng)及時(shí)更換新的液體。執(zhí)行清洗程序之前,應(yīng)該將反應(yīng)槽內(nèi)的殘余的蠟盡量用吸水紙或軟的布擦除,這樣使得作為清洗液的二甲苯的使用周期延長,有一定的經(jīng)濟(jì)效益。③機(jī)箱內(nèi)起去除異味作用的活性炭用久后,可以取出放在干燥箱內(nèi)烘干,則可反復(fù)使用。

[1]吉耘,馬恒輝,孫桂勤,等.全自動密閉式組織脫水機(jī)的使用改進(jìn)[J].中華病理學(xué)雜志,2002,31(3)：274.

[2]胡聞,顧萍,唐慧.自動組織脫水機(jī)應(yīng)用體會[J].臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志,1999,15(5)：465.