復(fù)方頭孢克洛干混懸劑處方工藝及質(zhì)量研究

劉哲鵬,潘 風(fēng),施與群

[1.上海理工大學(xué)醫(yī)療器械與食品學(xué)院藥物制劑(設(shè)備與工藝)研究所,上海200093;2.上海美優(yōu)制藥有限公司產(chǎn)品開(kāi)發(fā)部,上海201423]

頭孢克洛(cefaclor)為廣譜半合成頭孢菌素類(lèi)抗生素,對(duì)G+菌和G—桿菌效果均較好。鹽酸溴己新(bromhexine hydrochloride)為祛痰藥。將頭孢克洛與鹽酸溴己新制成復(fù)方頭孢克洛干混懸劑(siccative compound cefaclor suspension,SCCS),可用于咽炎、扁桃體炎、慢性支氣管炎急性發(fā)作、肺炎、鼻竇炎等的治療,效果良好。干混懸劑藥物吸收快,易儲(chǔ)存、攜帶,病人服用方便,尤其適合吞咽困難的病人服用[1,2]。由于頭孢菌素類(lèi)藥物對(duì)濕、熱等外界條件比較敏感,因此對(duì)于SCCS的處方工藝開(kāi)發(fā)難度較大,特別是在研究過(guò)程中常會(huì)出現(xiàn)藥物降解產(chǎn)物含量超標(biāo)、藥物含量均勻度不合格等問(wèn)題,影響了產(chǎn)品質(zhì)量和臨床應(yīng)用[3,4]。本研究針對(duì) SCCS處方工藝開(kāi)展研究,得到合適處方,并考察樣品的穩(wěn)定性,最終得到可以進(jìn)行臨床研究的處方工藝條件。

1 儀器和試藥

1.1 儀器 D IONEX P680型高效液相色譜儀(美國(guó)戴安公司);GL-5型干法制粒機(jī)(浙江明天機(jī)械有限公司);RCZ-6CZ型藥物溶出度儀(上海黃海藥檢儀器有限公司);低溫光照儀(藥物制劑國(guó)家工程研究中心);GSP-9050MBE型隔水式恒溫培養(yǎng)箱(上海博訊實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠);BPS-250C恒溫恒濕箱(上海一恒科技有限公司)。

1.2 藥品和試劑 頭孢克洛原藥(蘇州中聯(lián)化學(xué)制藥有限公司,含量99.68%,批號(hào)20109194);頭孢克洛對(duì)照品(中國(guó)藥品生物制品檢定所,含量93.2%,批號(hào)130481-200503);鹽酸溴己新原藥(浙江萬(wàn)邦藥業(yè),含量100.4%,批號(hào)H090205);鹽酸溴己新對(duì)照品(上海市食品藥品檢驗(yàn)所標(biāo)定,含量99.8%,批號(hào)040918);羧甲基纖維素鈉(安徽山河藥用輔料有限公司);羧甲基淀粉鈉(永日化學(xué)工業(yè)股份有限公司);蔗糖(蘇州市中泰藥用輔料有限公司);甜菊素(天津南大凱泰藥業(yè)有限公司);枸櫞酸(浙江省臺(tái)山市新寧制藥有限公司);日落黃(上海染料研究所有限公司);桔子香精(上?？兹赶憔懔嫌邢薰?;硬脂酸鎂(浙江省海鹽六和淀粉化工有限公司);微粉硅膠(上海昌為醫(yī)藥輔料技術(shù)有限公司);SCCS [上海理工大學(xué)醫(yī)療器械與食品學(xué)院藥物制劑(設(shè)備與工藝)研究所自制,規(guī)格:每包含頭孢克洛250 mg,鹽酸溴己新8.77 mg]。

2 方法和結(jié)果

2.1 含量測(cè)定及有關(guān)物質(zhì)檢查 (1)頭孢克洛色譜條件 Welchrom-C18色譜柱(150 mm×4.6 mm, 5μm);流動(dòng)相:含0.005 mol/L四丁基氫氧化銨溶液[磷酸調(diào)節(jié)p H值(3.2±0.1)]-甲醇(68∶32);流速1.2 m l/min;檢測(cè)波長(zhǎng)249 nm;進(jìn)樣量20μl。理論塔板數(shù)按頭孢克洛峰計(jì)應(yīng)≥3 000,頭孢克洛峰與相鄰雜質(zhì)峰的分離度＞1.5。該色譜條件下,各輔料對(duì)頭孢克洛檢測(cè)無(wú)干擾,峰形良好,保留時(shí)間約3.0 min。頭孢克洛濃度在215.6～593.7μg/m l范圍內(nèi)與峰面積線性關(guān)系良好,日間和日內(nèi)RSD值均＜0.5%,相對(duì)回收率為98.3%～101.5%。(2)鹽酸溴己新色譜條件 Welchrom-C18色譜柱(150 mm×4.6 mm,5μm);流動(dòng)相:含0.01 mol/L三乙胺甲醇溶液-甲醇-水(1.5∶95∶5);流速1.2 m l/min;檢測(cè)波長(zhǎng)249 nm;進(jìn)樣量20μl。理論塔板數(shù)按鹽酸溴己新峰計(jì)應(yīng)≥1 500,鹽酸溴己新峰與相鄰雜質(zhì)峰的分離度＞1.5。該色譜條件下,各輔料對(duì)鹽酸溴己新檢測(cè)無(wú)干擾,峰形良好,保留時(shí)間約6.5 min。鹽酸溴己新濃度在7.24～21.67μg/m l范圍內(nèi)與峰面積線性關(guān)系良好,日間和日內(nèi)RSD值均＜0.4%,相對(duì)回收率為97.7%～101.6%。

SCCS中鹽酸溴己新的含量均勻度測(cè)定方法按鹽酸溴己新的含量測(cè)定方法測(cè)定,計(jì)算 A+1.8 S (《中華人民共和國(guó)藥典》2010年版中規(guī)定的含量均勻度計(jì)算公式,其中A表示藥物標(biāo)示量與均值之差的絕對(duì)值;S表示標(biāo)準(zhǔn)差),即得。

取SCCS細(xì)粉適量(約相當(dāng)于含頭孢克洛100 mg),置于100 m l量瓶中,加頭孢克洛色譜條件項(xiàng)下流動(dòng)相適量,強(qiáng)力振搖2 min,超聲5 min,放冷,再用該流動(dòng)相稀釋至刻度,搖勻,濾過(guò),取續(xù)濾液得到供試品溶液。精密量取1 m l,置50 m l量瓶中,加該流動(dòng)相稀釋至刻度,搖勻,得到對(duì)照溶液;準(zhǔn)確量取上述溶液各20μl,按頭孢克洛色譜條件進(jìn)樣測(cè)定,記錄色譜圖至主成分峰保留時(shí)間的2.5倍;供試品溶液的色譜圖中如出現(xiàn)雜質(zhì)峰(扣除系統(tǒng)溶劑峰、輔料峰),量取各雜質(zhì)峰峰面積之和,將之與對(duì)照品溶液峰面積比較,得到頭孢克洛有關(guān)物質(zhì)含量[3]。另取 SCCS細(xì)粉適量(約相當(dāng)于含鹽酸溴己新3.5 mg),置于100 m l量瓶中,加鹽酸溴己新色譜條件項(xiàng)下流動(dòng)相適量,其他操作同上,得到鹽酸溴己新有關(guān)物質(zhì)含量。

2.2 溶出度測(cè)定[5]

2.2.1 頭孢克洛溶出度測(cè)定 取SCCS樣品6份,按《中華人民共和國(guó)藥典》2010年版附錄ⅩC第一法檢測(cè)其溶出度,800 m l水為介質(zhì),75 r/min轉(zhuǎn)速。30 min后,取溶液10 m l,0.45μm微孔濾膜濾過(guò),準(zhǔn)確量取上述溶液20μl,按頭孢克洛色譜條件進(jìn)樣測(cè)定,記錄色譜圖。另取頭孢克洛對(duì)照品31.3 mg,置100 m l量瓶中,加水溶解并定容,制成含藥物313μg/m l溶液,同法測(cè)定。按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算,即得每包中頭孢克洛的溶出量。

2.2.2 鹽酸溴己新溶出度測(cè)定 取SCCS樣品6份,500 m l水為介質(zhì),余同2.2.1項(xiàng)相關(guān)操作,按鹽酸溴己新色譜條件進(jìn)樣測(cè)定,記錄色譜圖。另取鹽酸溴己新對(duì)照品17.5 mg,置100 m l量瓶中,加甲醇10 m l溶解并用水定容至刻度。移取1 m l于10 m l量瓶中,用水定容至刻度,得到含藥物17.5μg/m l的溶液,同法測(cè)定。按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算,即得每包中鹽酸溴己新的溶出量。

2.3 休止角測(cè)定 底盤(pán)為直徑5.5 cm的培養(yǎng)皿,將兩只玻璃漏斗上下交錯(cuò)重疊,固定在鐵架臺(tái)上,下漏斗出口與底盤(pán)距離為3.0～5.0 cm。取顆粒約45 g,從上部漏斗慢慢加入,使顆粒經(jīng)過(guò)兩只漏斗的緩沖逐漸堆積在底盤(pán)上,形成錐體,直至得到最高的錐體為止。測(cè)定錐體的高(H),按下式計(jì)算休止角: α=arctg(H/R)。其中,α為休止角,R為底盤(pán)半徑。

2.4 沉降體積比 取供試品約7 g置具塞量筒中,加水10 m l,密塞,用力振搖1 min,觀察分散情況,同時(shí)記下混懸劑開(kāi)始高度 H0。靜置3 h,記下混懸劑最終高度 H,計(jì)算沉降體積比=H/H0。

2.5 口感考察 用含量均勻度實(shí)驗(yàn)后剩下的樣品考察其口感。

2.6 SCCS影響因素考察及處方篩選

2.6.1 頭孢克洛、鹽酸溴己新與輔料間的影響因素實(shí)驗(yàn) 取頭孢克洛、鹽酸溴己新原藥,分別與羧甲基纖維素鈉、羧甲基淀粉鈉、蔗糖、甜菊素、枸櫞酸、微粉硅膠、硬脂酸鎂等輔料兩兩混勻后,粉末直接壓制成片狀物,將片狀物分別放置在40℃隔水式恒溫培養(yǎng)箱、低溫光照儀和內(nèi)置有飽和氯化鈉溶液的干燥器內(nèi)進(jìn)行高溫(40℃)、強(qiáng)光照射(光照強(qiáng)度為4 500 lx)和高濕[25℃,濕度(75±5)%)]等影響因素實(shí)驗(yàn),于0、5、10 d取樣,按有關(guān)物質(zhì)檢查方法,主成分自身對(duì)照法考察其有關(guān)物質(zhì)變化,結(jié)果見(jiàn)表1。另取頭孢克洛、鹽酸溴己新原藥,分別以藥用乙醇作為濕潤(rùn)劑制軟材,過(guò)20目篩制粒,制得的顆粒在60℃干燥,比較處理前后藥物有關(guān)物質(zhì)變化。結(jié)果制粒前、后頭孢克洛有關(guān)物質(zhì)含量分別為0.68%和1.43%,鹽酸溴己新分別為0.57%和2.41%?？梢?jiàn)頭孢克洛、鹽酸溴己新經(jīng)過(guò)濕法制粒后有關(guān)物質(zhì)變化明顯,提示藥物對(duì)濕熱等條件敏感。藥物與各輔料混勻后,粉末直接壓片,影響因素考察結(jié)果顯示,藥物與羧甲基淀粉鈉經(jīng)影響因素考察后有關(guān)物質(zhì)上升較明顯,因此在處方篩選中不使用羧甲基淀粉鈉。另外,羧甲基纖維素鈉、蔗糖、枸櫞酸在高濕條件下,有關(guān)物質(zhì)也有較大變化,提示干混懸劑應(yīng)密封、干燥保存。

2.6.2 單因素篩選SCCS的處方 將頭孢克洛原藥、鹽酸溴己新原藥和輔料分別過(guò)100目篩后,按表2處方混合均勻,其中鹽酸溴己新原藥與其他原輔料以等量遞加的方式混合均勻。GL-5型干法制粒機(jī)制粒(壓輪壓力80 kN,壓縮空氣0.5 M Pa,流量1 L/m in),顆粒經(jīng)20目篩網(wǎng)整粒,即得,制備環(huán)境相對(duì)濕度控制在50%以下?？疾旄魈幏剿妙w粒的外觀、口感、顆粒休止角、沉降體積比和溶出度,結(jié)果見(jiàn)表3。處方1～3顆粒口感稍有苦味,且處方1沉降體積比稍低,處方3加水分散性稍差;處方6顆?？诟兴嵛渡源?處方4和5口感較好,并且顆粒休止角、加水分散性、沉降體積比、藥物溶出度等指標(biāo)均較好。將處方4和5所得樣品進(jìn)行影響因素考察,結(jié)果見(jiàn)表4。影響因素考察結(jié)果顯示,處方4和處方5制得樣品在相對(duì)濕度較高情況下(75%)有關(guān)物質(zhì)上升較明顯,提示干混懸劑應(yīng)在密封、干燥的條件下保存。兩者影響因素考察結(jié)果(藥物溶出、有關(guān)物質(zhì)等)相近,經(jīng)過(guò)綜合考慮,處方4更好一些。

2.7 SCCS試制及影響因素和加速考察結(jié)果 按處方4和2.6.2項(xiàng)下顆粒制備方法制備SCCS 3批,樣品用雙鋁復(fù)合袋包裝后,進(jìn)行加速實(shí)驗(yàn)考察[(30±2)℃,相對(duì)濕度75%]。結(jié)果顯示,試制3批SCCS經(jīng)加速6個(gè)月考察后,其性狀、藥物含量、藥物降解有關(guān)物質(zhì)等質(zhì)量指標(biāo)未見(jiàn)顯著變化。

表1 頭孢克洛、鹽酸溴己新原藥與各輔料影響因素實(shí)驗(yàn)中有關(guān)物質(zhì)的變化Table 1 The changes of related substances in influence factor tests between cefaclor/bromhexine hydrochloride and excipients (%)

表2 復(fù)方頭孢克洛干混懸劑處方篩選Table 2 Screen ing formulae of siccative compound cefaclor suspension (m/g)

3 討 論

干混懸劑的開(kāi)發(fā)應(yīng)特別關(guān)注口感及藥物降解有關(guān)物質(zhì)的變化。在矯味劑的選擇中,合適的甜度對(duì)口感影響較大,除了有適量的甜味劑外,填充輔料也多選用口感好的蔗糖、甘露醇等,另外在處方中有一定量的酸味劑存在,特別有助于調(diào)節(jié)口感。

在干混懸劑的處方中,除了填充劑外,另有較多量的矯味劑(包括酸性矯味劑)、助懸劑、色素等,這對(duì)藥物在制劑制備過(guò)程及以后的儲(chǔ)存過(guò)程中的穩(wěn)定性帶來(lái)挑戰(zhàn)。特別是頭孢克洛和鹽酸溴己新對(duì)光、熱等外界條件較敏感,易產(chǎn)生降解產(chǎn)物。作者在處方篩選前考察原料藥與輔料在濕、熱、光等影響因素條件下的穩(wěn)定性,從中選擇合適的輔料,采用干法制粒技術(shù),并嚴(yán)格控制存儲(chǔ)條件,制得口感良好、質(zhì)量穩(wěn)定的SCCS,值得進(jìn)一步開(kāi)發(fā)。

表3 復(fù)方頭孢克洛干混懸劑處方考察Table 3 Formulae exam ination of siccative compound cefaclor suspension

表4 處方4和處方5的影響因素考察結(jié)果Table 4 Results of influence factor tests of formulae 4 and 5

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