巖藻多糖排鉛作用研究*

王 進(jìn) 張 巖 趙德雪 許貴斌 張繼國(guó) 岳 旺

(1.青島大學(xué)醫(yī)學(xué)院，山東 青島 266021；2.青島華氏國(guó)風(fēng)醫(yī)藥有限責(zé)任公司，山東 青島 266000；3. 泰山醫(yī)學(xué)院，山東 泰安 271016)

環(huán)境鉛污染可嚴(yán)重威脅人類健康。鉛可以通過食物、水和空氣經(jīng)口進(jìn)入人體，在人體內(nèi)蓄積，對(duì)骨髓造血系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)、消化系統(tǒng)及其它系統(tǒng)有毒害作用[1]。目前臨床應(yīng)用排鉛藥物主要有依地酸鈣、鈣促排靈和二巰基丁二酸鈉等絡(luò)合型驅(qū)鉛劑，均可排除機(jī)體其他必需元素，并有過敏等毒副作用。

海洋中蘊(yùn)藏著豐富的海藻資源。巖藻多糖(Fucoidan)，是褐藻類海洋植物(海帶等)中所特有的海洋活性多糖 ，有多種生物活性,前期研究表明巖藻多糖可通過與重金屬形成金屬復(fù)合物來抑制腸腔對(duì)重金屬的吸收[2]。本課題系研究巖藻多糖的排鉛效果，旨在開發(fā)巖藻多糖新的藥用價(jià)值。

1 材料與方法

1.1動(dòng) 物

Wistar大鼠，雌雄各半，160～180g，由河北醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供(動(dòng)物合格證號(hào)：SCXK(鄂)2004-0007)。

1.2儀 器

分光光度計(jì)(723N);原子吸收分光光度計(jì)(日本日立Z-7000型)、電子天平、顯微鏡、酶標(biāo)儀( MD29SpectraMax 190)。

1.3藥品與試劑

巖藻多糖，購自日照潔晶集團(tuán)公司；青霉胺片，上海信誼萬象藥業(yè)股份有限公司生產(chǎn)(批號(hào)：080102)；肝素鈉注射液，天津市生物化學(xué)制藥廠生產(chǎn)(批號(hào)：20070601)；醋酸鉛等均為國(guó)產(chǎn)分析純。標(biāo)志酶測(cè)定試劑盒均購自南京建成生物工程研究究所。

1.4實(shí)驗(yàn)方法

1.4.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組方案

大鼠隨機(jī)分為6組，每組8只，雌雄各半，分正常對(duì)照組(正常飲食30天)、模型組(自由飲用0.3%醋酸鉛水溶液30天)、陽性對(duì)照組(自由飲用0.3%醋酸鉛水溶液30天+按90 mg·kg-1體重ip青霉胺21天)、巖藻多糖低、中、高劑量組(自由飲用0.3%醋酸鉛水溶液30天+50 mg·kg-1、100 mg·kg-1、200 mg·kg-1ig巖藻多糖)。

1.4.2血鉛的測(cè)定以及相關(guān)指標(biāo)的測(cè)定

實(shí)驗(yàn)按上述方法實(shí)驗(yàn)一個(gè)月后，各組動(dòng)物麻醉，腹主動(dòng)脈取血，采用原子吸收分光光度計(jì)測(cè)定血鉛；取大鼠的睪丸、附睪、子宮、卵巢等生殖器官，精密稱重，計(jì)算臟器指數(shù)；全血離心得血清，用酶標(biāo)儀測(cè)定生殖激素睪酮(T)、促卵泡成熟激素(FSH)、促黃體生成激素(LH)等的變化。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

數(shù)據(jù)采用單因素方差分析，用spss13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理。

2 結(jié) 果

2.1巖藻多糖對(duì)大鼠血鉛的影響

與空白組比較，血鉛均升高，尤其是模型組，說明鉛中毒模型造模成功(P<0.05)；與模型組比較，陽性組和巖藻多糖高劑量組緩解血鉛升高水平(P<0.05),說明巖藻多糖能夠降低鉛中毒大鼠體內(nèi)的血鉛含量，并呈現(xiàn)一定的量效關(guān)系。結(jié)果見表1。

表1 巖藻多糖對(duì)大鼠血鉛的影響

注：與空白組比較，aP<0.05；與模型組比較，bP<0.05

2.2巖藻多糖對(duì)大鼠生殖器官重量的影響

各組與空白組比較，模型組雄性大鼠的睪丸指數(shù)和附睪指數(shù)均降低，說明鉛中毒對(duì)雄性大鼠的生殖器官有影響(P<0.05)；各組與模型組比較，睪丸指數(shù)在陽性組和巖藻多糖低、中、高劑量組有所上升(P<0.05)，附睪指數(shù)在陽性組和巖藻多糖低、中、高劑量組有升高(P<0.01)，說明巖藻多糖能夠減輕雄性生殖器官重量的變異情況，并呈現(xiàn)一定的量效關(guān)系。雌性大鼠的子宮指數(shù)中、高劑量組有所上升，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。但是卵巢指數(shù)各組間無差異，說明從臟器指數(shù)上來看，鉛中毒對(duì)雌性大鼠卵巢的影響較小(P>0.05)。見表2。

表2 巖藻多糖對(duì)大鼠生殖器官臟器系數(shù)的影響

注：與空白組比較，aP<0.05；與模型組比較，bP<0.05，cP<0.01

3.5巖藻多糖對(duì)大鼠內(nèi)分泌功能的影響

模型組與空白組比較，T水平和FSH水平均降低，說明鉛中毒對(duì)性激素有一定的影響，鉛中毒模型造模成功(P<0.05)；與模型組比較，陽性對(duì)照青霉胺組以及巖藻多糖高劑量組T和FSH水平顯示有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，F(xiàn)SH巖藻多糖中、高劑量組上升(P<0.05)，說明巖藻多糖能夠緩解鉛中毒對(duì)性激素水平實(shí)驗(yàn)中還發(fā)現(xiàn)與模型組比較的影響，并呈現(xiàn)一定的量效關(guān)系。而鉛中毒對(duì)LH影響不大(P>0.05)。見表3。

表3 巖藻多糖對(duì)大鼠內(nèi)分泌功能的影響

注：與空白組比較，aP<0.05；與模型組比較，bP<0.05，cP<0.01

3 討 論

本實(shí)驗(yàn)參考文獻(xiàn)[3]采用自由飲用0.3%醋酸鉛水溶液30d，大鼠體內(nèi)攝入過多的鉛,超過了大鼠正常的代謝能力,所以使血液中的鉛含量升高,血鉛就升高。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明與空白組比較，血鉛均升高，尤其是模型組，說明鉛中毒模型造模成功(P<0.05)；巖藻多糖能夠降低鉛中毒大鼠體內(nèi)的血鉛含量(P<0.05)，并有量效關(guān)系。

鉛能干擾丘腦下部-垂體-睪丸軸的功能，及FSH與支持細(xì)胞的FSH受體之間的結(jié)合作用，使睪丸和附睪的平均重量明顯減輕。對(duì)睪丸的直接毒性作用是由于睪丸生精系統(tǒng)代謝障礙[4]。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明巖藻多糖能使附睪、睪丸指數(shù)降低情況得到改善(P<0.05)，巖藻多糖具有一定排鉛作用。

根據(jù)本次實(shí)驗(yàn)結(jié)果，巖藻多糖對(duì)鉛中毒大鼠有一定的解毒作用，對(duì)研發(fā)天然低毒的排鉛保健品及藥品提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

[1] Rokho K,Hu H,Rotnitzky A,et al.A longitudinal study of chronic lead exposure and physical growth in Boston children[J].EHP,1995,103:952-971.

[2] Becher G, Osterloh K, Schafer S, et al. Influence of fucoidan on the intestinal absorption of iron, cobalt, manganese and zinc in rats[J].Digestion,1981,21(1):6-12.

[3] 牛延獻(xiàn)，哈小琴.不同程度鉛中毒模型的制備[J].西北國(guó)際醫(yī)學(xué)雜志，2009，30(1)：32-33.

[4] 劉曉梅，石龍，金明華，等，鉛和鎘對(duì)雄性小鼠生殖細(xì)胞DNA損傷的研究[J].中國(guó)公共衛(wèi)生學(xué)報(bào)，2004，20(3):311-312.