VEGF基因多態(tài)性與子宮內(nèi)膜異位癥遺傳易感性研究進(jìn)展*

王 穩(wěn) 王鳳蓮

(泰山醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院婦產(chǎn)科，山東 泰安 271000)

子宮內(nèi)膜異位癥(EMs)是具有生長功能的子宮內(nèi)膜出現(xiàn)在子宮腔以外的部位，是育齡婦女的常見病，發(fā)病率高達(dá)10%-15%,是導(dǎo)致痛經(jīng)、盆腔痛及不孕的首要原因，嚴(yán)重影響中青年婦女的健康和生活質(zhì)量。子宮內(nèi)膜異位癥的發(fā)生和發(fā)展是一個遺傳和環(huán)境等多因素共同作用的過程，但其發(fā)病機制仍未完全闡明。近年來研究表明，子宮內(nèi)膜異位癥的發(fā)生類似于惡性腫瘤的轉(zhuǎn)移和種植，與血管形成有著密切的關(guān)系。血管內(nèi)皮生長因子(Vascular Endothelial Growth Factor,VEGF)在血管形成中是最重要的因子，它可直接而特異地作用于血管內(nèi)皮細(xì)胞，激活內(nèi)皮細(xì)胞增殖，增加血管通透性，在異位病灶的發(fā)生和發(fā)展過程中起關(guān)鍵作用[1]。因此，研究VEGF單核苷酸多態(tài)性(single nucleotide polymorphisms, SNPs)與內(nèi)異癥發(fā)病風(fēng)險的關(guān)系，進(jìn)一步闡明內(nèi)異癥的分子生物學(xué)機制，已成為目前子宮內(nèi)膜異位癥研究領(lǐng)域的熱點?，F(xiàn)就近年來關(guān)于VEGF基因多態(tài)性與子宮內(nèi)膜異位癥遺傳易感性的研究現(xiàn)狀予以綜述。

1 VEGF簡介

1.1VEGF分類與結(jié)構(gòu)

1.1.1VEGF分類

VEGF是1989年初Ferrara和 Gospdarowicz等分別在牛垂體濾泡星狀細(xì)胞體外培養(yǎng)液中首先純化出來的具有高度生物活性的功能性糖蛋白，是一種高度特異的血管內(nèi)皮細(xì)胞有絲分裂素[2]。目前已發(fā)現(xiàn)的VEGF可分為6類：VEGF-A，-B，-C ，-D，-E和-F。VEGF-A又稱為血管通透因子(vascular permeability factor ,VPF)，是最常見的一種類型，且在血管的形成中具有關(guān)鍵作用，其余5類具有相似的結(jié)構(gòu)、功能及分布。

1.1.2VEGF結(jié)構(gòu)

VEGF是胱氨酸結(jié)生長因子(cystine knot growth factor, CKGF))超家族中的一員，是通過兩對鏈間二硫鍵共價連接的反平行同型二聚體，其蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)具有高度保守性[3]。編碼VEGF的基因定位于6p21.3，長度為14kb，由8個外顯子和7個內(nèi)含子組成。轉(zhuǎn)錄時通過對VEGF-mRNA選擇性剪切可剪接成5種異構(gòu)體，分別為VEGF121、VEGF145、VEGF165、VEGF189、 VEGF206, 其中前三種是分泌型可溶性蛋白，能促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞有絲分裂，提高微血管的通透性；后2種是不可溶性蛋白，與細(xì)胞膜和基底膜緊密結(jié)合，僅有增加內(nèi)皮細(xì)胞通透性的作用[4]。這種可溶與不溶的形式更加符合機體對血管形成的應(yīng)答調(diào)劑機制，當(dāng)機體需要時，即以較大限度的可溶性形式存在；而一旦血管形成應(yīng)答過度，又可以不溶形式結(jié)合到細(xì)胞膜與基底膜上，減少其危害。

1.2VEGF生物學(xué)功能

VEGF具有兩大重要功能：促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞分裂增生和增加血管通透性，主要是通過與血管內(nèi)皮細(xì)胞表面特異性受體結(jié)合而發(fā)揮生物學(xué)效用的[5]。首先，VEGF作為一個選擇性促內(nèi)皮細(xì)胞有絲分裂素，表現(xiàn)出VEGF的有絲分裂原特性，誘導(dǎo)血管內(nèi)皮細(xì)胞的分裂和增殖，進(jìn)而導(dǎo)致新生血管的形成。其次，VEGF還具有促進(jìn)血管構(gòu)建的作用，可通過上調(diào)血漿活化因子的活性，從而最終生成新的毛細(xì)血管。由于VEGF 能特異性地促進(jìn)血管內(nèi)皮分裂、增殖及遷移,因此被公認(rèn)為是血管生成中的"中心調(diào)節(jié)者",是最有力的血管生成因子[6]。

2 VEGF基因多態(tài)性與EMs遺傳易感性

2.1VEGF基因多態(tài)性

基因多態(tài)性是指個體間的核苷酸序列存在著差異性，同一基因位點可存在兩種以上的基因型，從本質(zhì)上來講，多態(tài)性的產(chǎn)生在于基因水平上的變異，一般發(fā)生在基因序列中不編碼蛋白的區(qū)域和沒有重要調(diào)節(jié)功能的區(qū)域。SNPs是人與人之間基因差異的主要表現(xiàn)形式，也就是這些SNPs位點的不同決定了人在壽命、疾病、身高、胖瘦、智慧、性格、對環(huán)境的反應(yīng)等方面的差異。人類的VEGF基因也具有多態(tài)性，并且至少有30個單核苷酸多態(tài)性位點，如+ 405G /C、- 460C /T、+ 936C /T、-2578C /A、- 1154G /A、- 634G /C 等，僅在其啟動子區(qū)就有10 種多態(tài)性[7]。目前研究最多的是5'未翻譯區(qū)的-2578C/A、-460C/T、+405G/C三個多態(tài)性位點和3'未翻譯區(qū)的 +936C/T位點。多個國家的學(xué)者對VEGF基因多態(tài)性開展了相關(guān)研究, 已經(jīng)初步篩選了一些相關(guān)VEGF基因多態(tài)性, 如- 2578C、- 1154G 和- 634C等位基因與增加VEGF 表達(dá)有關(guān)，這些等位基因所構(gòu)成的單倍體基因型對VEGF基因啟動子的活性有很大影響，并可能改變VEGF的產(chǎn)量[8]?；贓Ms是一種多基因遺傳病的認(rèn)識，越來越多的研究者開始致力于研究VEGF基因多態(tài)性與EMs的關(guān)系。

2.2VEGF基因多態(tài)性與EMs遺傳易感性

2.2.1-2578C/A

Liu等[9]研究發(fā)現(xiàn)，-2578A等位基因與EMs的發(fā)病明顯相關(guān)，-2578CC基因型能顯著增加子宮內(nèi)膜異位癥的發(fā)病風(fēng)險。Yang[10]等通過體外轉(zhuǎn)染試驗證實VEGF-2578C/C基因型可提高VEGF的蛋白表達(dá)。Shahbazi等[11]通過脂多糖刺激外周血單核細(xì)胞的實驗進(jìn)一步證實了VEGF-2578C/C基因型攜帶者VEGF蛋白表達(dá)量明顯高于VEGF-2578A/A基因型攜帶者。但是最近Zhao等[12]人的研究表明VEGF-2578C/A基因型并不能影響VEGF蛋白的產(chǎn)量，與內(nèi)異癥發(fā)病風(fēng)險無關(guān)。

2.2.2-460C/T

Watson[13]等的研究證明，-460C單倍型相比-460T單倍型具有更高的啟動子活性和更高的VEGF蛋白產(chǎn)量，從而導(dǎo)致EMs患病率升高。與此相反，Bhanoori等[14]研究發(fā)現(xiàn)，-460T單倍型在對照組中的表達(dá)更高，而-460C多態(tài)性與EMs無關(guān)。Hsieh[15]等證實，-460T等位基因的存在明顯增加內(nèi)異癥的發(fā)病風(fēng)險。Liu等[9]研究證明，VEGF-460C/T多態(tài)的基因型和等位基因頻率分布在病例組與對照組間差異均無統(tǒng)計學(xué)意義。Cosin[16]等研究也發(fā)現(xiàn)-460C/T基因型與EMs發(fā)病風(fēng)險無明顯相關(guān)性。

2.2.3+405G/C

Bhanoori等[14]在對南印度婦女的研究中發(fā)現(xiàn)，EMsⅢ～Ⅳ期患者+405G等位基因的頻率更高。+405G等位基因能增加VEGF啟動子活性從而增加VEGF蛋白產(chǎn)量，進(jìn)一步增加患EMs 的風(fēng)險，而+405C等位基因在此則作為一個保護性因素。Watson等[13]研究也發(fā)現(xiàn)，對于VEGF蛋白產(chǎn)量，+405GG基因型最高，CC基因型最低。除此之外，+405G單倍型相比+405C單倍型具有更高的啟動子活性，因此VEGF的產(chǎn)量也更高。

與此相反，Kim SH[17]等在對韓國人的研究中發(fā)現(xiàn)，EMsⅢ～Ⅳ期患者VEGF啟動子區(qū)+405G/C基因多態(tài)性在EMs組及正常對照組均能檢測到，EMs組同正常對照組相比，+405C等位基因的頻率更高，而+405G等位基因在對照組中表達(dá)高，+405C等位基因能提高VEGF啟動子的活性，增加VEGF蛋白產(chǎn)量，從而增加患EMs的風(fēng)險。

Gentilini等[18]的實驗證實，5′未翻譯區(qū)+405G/C 多態(tài)性與子宮內(nèi)膜異位組織的遷移、存活和入侵具有相關(guān)性，并且對VEGF蛋白的表達(dá)有顯著的影響。同時Kim JG等[19]研究還發(fā)現(xiàn)+405C等位基因的EMs患病率是正常人的2倍。

2.2.4+936C/T

Ikuhashi等[20]在日本調(diào)查中發(fā)現(xiàn)，EMs的Ⅲ～Ⅳ期患者中+936T等位基因遠(yuǎn)比對照組高，認(rèn)為VEGF+936T等位基因在EMs的病理過程中發(fā)揮重要作用。Cosin等[16]在對白種人的研究中發(fā)現(xiàn)，+936C/T可能增加EMs的發(fā)病風(fēng)險，但是在已患有EMs患者中并未檢測到與此有關(guān)的多態(tài)性差異這與Kim等得出的結(jié)論一致。而Zhao等[12]研究證明VEGF+936C/T基因型與內(nèi)異癥的發(fā)病風(fēng)險無關(guān)。

3 問題與展望

雖然很多實驗發(fā)現(xiàn)VEGF基因多態(tài)性與EMs的發(fā)病風(fēng)險有明顯的相關(guān)性，但是最近Zhao等[12]在澳大利亞大樣本調(diào)查VEGF候選單核苷酸-2578C/A，-460C/T，+405G/C和+936C/T的多態(tài)性與EMs的關(guān)系時，發(fā)現(xiàn)VEGF基因多態(tài)性與EMs發(fā)病風(fēng)險無明顯相關(guān)性。

目前有關(guān)VEGF多態(tài)性與EMs遺傳易感性關(guān)系的研究尚處于初步階 段，由于不同種族、不同人群基因的等位基因頻率及生活背景的不同，各地結(jié)果頗不相同，有的還相互矛盾，其主要原因和存在的問題首先在于不同國家的人群種族構(gòu)成, 相同多態(tài)性位點的頻率分布在不同的人群與種族中差異較大；其次是所檢測的基因多態(tài)性位點太少或者僅僅檢測到單個位點，較多地注重基因多態(tài)性識別, 未深入探討可能存在的基因與基因之間、基因與環(huán)境之間的交互作用；再次，是由于人力、時間或經(jīng)費的限制，沒有達(dá)到足夠統(tǒng)計學(xué)效能所要求的樣本含量，以及納入人群的標(biāo)準(zhǔn)和評價分級方法不同使不同研究之間的可比性降低。

目前對VEGF基因啟動子區(qū)多態(tài)性與EMs的關(guān)系的研究尚無定論，需要進(jìn)一步探索VEGF基因遺傳多態(tài)性和聯(lián)合多態(tài)性與環(huán)境暴露因素之間的聯(lián)合作用以及與其他EMs相關(guān)基因的關(guān)系。隨著對血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子家族及其受體分子生物學(xué)功能研究的深入，可進(jìn)一步闡明EMs的發(fā)病機制，從基因水平調(diào)控及阻斷VEGF的表達(dá)，為其臨床診斷和治療提供更有力地分子生物學(xué)理論基礎(chǔ)。

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