間接原子吸收光譜法測定頭孢克肟含量

王尚芝 張 萍 劉月成 王海青

(1.山西大同大學(xué)化學(xué)與化工學(xué)院，大同 037009； 2. 山西振東泰盛制藥有限公司，大同 037010 )

頭孢克肟(Cefixime)為廣譜第三代頭孢抗菌素，具有很高的臨床價值。由于頭孢類抗生素分子內(nèi)含有S、N雜原子，且在強酸、強堿作用下水解，產(chǎn)生硫化物、氨、二酮哌嗪衍生物，故用比色法、分光光度法[1-3]測定的報道較多，此外還有電位滴定法[4]、極譜法[5]、熒光光度法[6，7]、高效液相色譜法[8]等。用間接原子吸收法[9，11]測定頭孢克肟的方法尚未見報道。頭孢克肟在堿性介質(zhì)中加熱水解，內(nèi)酰胺環(huán)開環(huán)，其主要產(chǎn)物硫化物可與酒石酸銅反應(yīng)生成硫化銅沉淀，經(jīng)離心分離，用稀硝酸溶解沉淀物后用原子吸收法測定其中的銅，可間接測定頭孢克肟的含量。該法干擾少，且拓展了原子吸收法在藥物測定中的應(yīng)用。

1 實驗部分

1.1 主要儀器與試劑

原子吸收分光光度計：AA-6800型，日本島津公司；

銅空心陰極燈：北京曙光明電子光源儀器有限公司；

頭孢克肟對照品溶液：1.0 mmol/L；

酒石酸銅溶液：用時取等量A、B液混合即可，A液為100 mmol/L的硫酸銅溶液，B液為用二次蒸餾水將6.025 2 g酒石酸鉀鈉和1.801 4 g氫氧化鈉溶解定容于50 mL的容量瓶中；

氫氧化鈉溶液：4 mol/L。

1.2 儀器工作條件

波長：324.8 nm；燈電流：2 mA；光譜通帶：1.0 nm；乙炔氣流量：1.8 L/min；空氣流量：6.0 L/min； 火焰高度：7 mm。

1.3 實驗方法

準確移取頭孢克肟對照品溶液2.0 mL、氫氧化鈉溶液0.6 mL、酒石酸銅溶液0.7 mL置于10 mL離心管中，加水使總體積為4.0 mL，搖勻，置于沸水浴中加熱40 min，冷卻至室溫后，離心分離。棄去上清液，以水洗滌沉淀2次，加入硝酸溶液(1+1)，加熱溶解后，定容至10 mL，在324.8 nm波長下用原子吸收分光光度計測定吸光度。

2 結(jié)果與討論

2.1 氫氧化鈉溶液用量

分別移取2.0 mL頭孢克肟對照品溶液和0.7 mL酒石酸銅于9支離心管中，考察氫氧化鈉用量不同時對吸光度的影響。結(jié)果表明，當氫氧化鈉溶液加入量大于0.6 mL時，吸光度趨于穩(wěn)定，故實驗選擇加入0.6 mL 氫氧化鈉溶液。

2.2 加熱時間

按1.3實驗方法，改變加熱時間，測定吸光度的變化，結(jié)果見圖1。由圖1可知，加熱至40 min以上時，吸光度趨于平穩(wěn)，因此實驗選擇在沸水浴中加熱40 min。

圖1 加熱時間與吸光度的關(guān)系

2.3 沉淀劑的用量

在2.0 mL頭孢克肟對照品溶液中分別加入0.6 mL氫氧化鈉溶液和不同體積的酒石酸銅溶液，按實驗方法測定，結(jié)果見圖2。由圖2可知，當酒石酸銅溶液加入量大于0.7 mL時，沉淀完全，因此實驗選擇加入0.7 mL酒石酸銅溶液。

圖2 沉淀劑用量與吸光度的關(guān)系

2.4 洗滌液的選擇

分別選擇水、0.01 mol/L乙酸溶液、0.05 mol/L鹽酸溶液作洗滌劑進行試驗，結(jié)果表明，用這些洗滌液洗滌2次，可達到穩(wěn)定的吸光度，且沉淀幾乎無損失。考慮到水比較經(jīng)濟且方便，實驗采用蒸餾水洗滌沉淀2次。

2.5 共存物質(zhì)的影響

研究了一般賦形劑淀粉、蔗糖、糊精等對試驗的干擾情況。移取1.0 mL頭孢克肟標準溶液，分別加入1.0 mL淀粉飽和溶液，不同量的糊精飽和溶液、蔗糖溶液，按1.3實驗方法測定。結(jié)果表明，淀粉飽和溶液不產(chǎn)生干擾，0.5倍的糊精、10倍的蔗糖不產(chǎn)生干擾。

2.6 工作曲線和檢出限

配制頭孢克肟含量為0.00、0.05、0.15、0.25、0.30、0.35、0.40、0.45、0.50、0.55 mmol/L的系列標準工作溶液，依1.3實驗方法測定吸光度。在0.02～0.50 mmol/L范圍內(nèi)吸光度與濃度有良好的線性關(guān)系，線性回歸方程為A=1.712 5c+0.022 0，相關(guān)系數(shù)r=0.999 0。

對樣品空白平行測定11次后，按照3倍空白標準偏差除以工作曲線斜率計算出方法的檢出限為1.98 μg/mL。

2.7 方法精密度試驗

對2.0 mL頭孢克肟標準溶液，按實驗方法平行測定8次，測定結(jié)果的相對標準偏差為0.84%，結(jié)果見表1。

表1 精密度試驗結(jié)果

2.8 樣品測定及回收試驗

精密稱定10粒頭孢克肟膠囊的質(zhì)量后，將藥粉倒入研缽中，刷凈殼內(nèi)藥物，稱取殼的質(zhì)量，計算得每粒藥的藥粉末質(zhì)量。研細粉末，準確稱取26.6 mg，用甲醇溶解定容到50 mL的容量瓶中，用干濾紙過濾，棄初濾液，取續(xù)濾液作為供試液。分別移取1.0 mL供試液，按1.3實驗方法測定吸光度，按工作曲線計算頭孢克肟的量，然后進行加標回收試驗，試驗結(jié)果見表2。該方法回收率為96.8%～105.3%。并計算出樣品中頭孢克肟的含量為97.9 mg，標示量百分含量為97.9%。

表2 樣品測定及回收試驗結(jié)果(n=3)

3 結(jié)語

采用原子吸收光譜法測定頭孢克肟含量，操作簡便、結(jié)果準確，為頭孢類藥物的測定提供了一個有效方法。且拓寬了原子吸收法的分析功能和應(yīng)用領(lǐng)域。

[1] Mohamed A, Mohamed H, Mona M, et al. Colorimetic determination some penicillions and cephalosporins with 2-nitrophenylhydrazine hydrochloride[J]. Talanta,1989,36(12):1 253-1 257.

[2] Mohamed A. Selective spectrophotometric determination some cephalosporins in pharmaceutical formulations[J]. Anal Lett, 1991, 24(1): 55-67.

[3] Fogg A G, Abdalla M A, Henriques H P. Titrimetric. Determination of the yield of sulphide formed by alkaline degradation of cephalosporins[J]. Analyst,1982,107(4):449-452.

[4] Faway A, Magda H. Determination of cephalosporins using derivative spectrophotometry[J].Anal Lett,1985,18(B5):629-640.

[5] 曾泳淮, 馬紅艷. 頭孢拉定的電化學(xué)行為[J]. 分析化學(xué), 1997, 25(9): 1 006-1 009.

[6] 歐陽耀國, 蔡維平, 謝箐，等. 光化學(xué)熒光分析法測定頭孢氨芐的研究[J]. 分析化學(xué), 1994, 22(12): 1 211-1 213.

[7] 楊梅,張文偉,周丹紅,等.熒光法快速分析膠囊中的頭孢拉定含量[J].分析試驗室, 2000, 19(1): 66-68.

[8] 蔡爽, 馮婉玉, 李發(fā)美.HPLC法測定人血漿中頭孢克肟血藥濃度[J]. 沈陽藥科大學(xué)學(xué)報, 2004, 21(4): 286-289.

[9] 范大和,王偉.原子吸收光譜法間接測定碘解磷定[J].分析試驗室, 2005, 24(1): 83-84.

[10] 郎惠云,汪海濤,王天寶，等.停流流動注射在線沉淀-原子吸收法測定鹽酸苯海拉明[J].分析科學(xué)學(xué)報, 2004, 20(1): 48-50.

[11] 王尚芝,孟雙明,郭永，等. 間接原子吸收光譜法測定藥物制劑中的西米替丁[J].分析科學(xué)學(xué)報, 2009, 25(3): 370-372.