清清爽牌濕巾的殺菌效果

張春梅，陳羽，丁利偉，齊秀蘭*

(1.沈陽鑫卓越藥械進出口有限公司，遼寧沈陽110021;2.沈陽藥科大學(xué)高等職業(yè)技術(shù)學(xué)院，遼寧沈陽110026)

近年來，便捷、清潔消毒的一次性濕巾已成為人們?nèi)粘Ｉ畹谋匦杵?，用途也日趨多樣化，逐漸成為衛(wèi)生紙品市場的新寵［1］。濕巾產(chǎn)品從用途上分為普通濕巾和消毒濕巾。普通濕巾主要用于清潔皮膚，使用時清潔、保濕、滋潤一次性完成;消毒濕巾主要有2種:一種用于擦傷、割傷和劃傷等小傷口及周圍皮膚的清潔、消毒，所浸液體主要成分為苯扎氯銨等，清潔、殺菌一次性完成;另一種具有廣譜殺菌作用，主要用于皮膚清潔、潤膚、消毒和殺菌，也可用于日常用品和衛(wèi)生潔具等的消毒，能迅速有效殺滅金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌、淋病奈瑟菌和銅綠假單胞菌等，所浸液體為純凈水，天然殺菌成分、蘆薈、羊毛脂和丙二醇等［2］。鑒于有些消毒濕巾存在作用單一，易質(zhì)變，長霉菌，存放時間短，效果不穩(wěn)定等問題［3］，本文對清清爽牌濕巾的殺菌消毒效果進行了實驗室研究，為生活中消毒濕巾的合理使用提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 菌種金黃色葡萄球菌(Staphyloccocus aureus ATCC 6538)、大腸埃希菌(Escherichia coli 8099)、白假絲酵母菌(Canidia albicans ATCC 10231)，由沈陽藥科大學(xué)微生物學(xué)與細胞生物學(xué)教研室提供。

1.1.2 培養(yǎng)基營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基(g/L):蛋白胨10.0，牛肉膏5.0，氯化鈉5.0，瓊脂粉14.0;沙堡瓊脂培養(yǎng)基(g/L):葡萄糖40.0，蛋白胨10.0，瓊脂粉14.0。

1.1.3 緩沖液生理鹽水(g/L):氯化鈉9.0;磷酸鹽緩沖液(g/L):無水磷酸氫二鈉2.83，磷酸二氫鉀1.36，pH 7.2;中和劑(g/L):硫代硫酸鈉5.0，溶解于磷酸鹽緩沖液中。

1.2 方法

1.2.1 濕巾中微生物總數(shù)檢查在無菌條件下，稱取10 g清清爽牌濕巾，剪碎后加入200 mL生理鹽水中，充分混勻。分別取1 mL稀釋液涂布于營養(yǎng)瓊脂平板和沙堡平板，恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)，計算樣品中細菌和真菌的菌落總數(shù)。濕巾中微生物總數(shù)檢查的判定標準:細菌菌落總數(shù)≤20 cfu/g;真菌不得檢出。

1.2.2 菌懸液的制備取5.0 mL磷酸鹽緩沖液加入已經(jīng)活化3代的新鮮斜面培養(yǎng)物試管內(nèi)，反復(fù)吹吸，洗下菌苔。用移液管將洗液移至另一無菌試管中，用渦旋混合器振蕩20 s，使菌體懸浮均勻。用磷酸鹽緩沖液稀釋至所需濃度。濃度要求:用100 μL滴于對照樣片上，回收菌數(shù)為1×104～9×104cfu/片。

1.2.3 中和劑的考察試驗設(shè)平行8組試驗，以金黃色葡萄球菌為試驗菌，按載體定量殺菌試驗程序進行［4］。a.染菌樣片+5 mL磷酸鹽緩沖液，b.染菌樣片+5 mL中和劑，c.染菌對照片+5 mL中和劑，d.染菌樣片+5 mL中和劑+染菌對照片，e.染菌對照片+5 mL磷酸鹽緩沖液，f.磷酸鹽緩沖液，g.中和劑，h.培養(yǎng)基。中和劑及其濃度的判定標準:a組無試驗菌或僅有極少數(shù)試驗菌菌落生長;b組有較a組為多，但較c、d、e組為少的試驗菌落生長;c、d、e組有相似量試驗菌生長，并在1×104～9×104cfu/片之間，且組間菌落數(shù)誤差率不應(yīng)超過15%;f、g、h組無菌生長。由此可判定所選中和劑及其濃度適宜。

1.2.4 載體定量殺菌試驗取100 μL菌懸液分別均勻滴加在被試樣片(2.0 cm×3.0 cm)和對照樣片(與被試樣片同質(zhì)材料，同等大小，但不含抗菌材料，且經(jīng)滅菌處理)上，作用至預(yù)定時間。用無菌鑷子分別將樣片投入含5 mL中和劑溶液的試管內(nèi)，充分混勻，中和作用10 min。作適當(dāng)稀釋，取該液或其稀釋液涂布營養(yǎng)瓊脂平板，置于37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48 h，白假絲酵母菌涂布沙堡瓊脂平板上，置于28℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)72 h，作活菌計數(shù)，計算殺菌率。

1.2.5 模擬現(xiàn)場試驗將一只手用滅過菌的棉拭涂抹采樣，置于中和劑中振蕩80次，作活菌培養(yǎng)計數(shù)，視為消毒前。另一只手用清清爽牌濕巾擦拭數(shù)次，待1 min后用滅過菌的棉拭涂抹采樣，放入中和劑中振蕩80次，作活菌培養(yǎng)計數(shù)，視為消毒后。觀察消毒前后的殺菌效果。

1.2.6 穩(wěn)定性試驗將清清爽牌濕巾原包裝置于37℃恒溫培養(yǎng)箱中存放90 d，之后進行載體定量殺菌試驗，計算殺菌率，考察該濕巾的穩(wěn)定性是否符合GB 15979-2002的規(guī)定。

2 結(jié)果

2.1 濕巾中微生物總數(shù)檢查

稱取10 g清清爽牌濕巾，剪碎后加入到200 mL生理鹽水中，將1 mL稀釋液分別涂布于營養(yǎng)瓊脂平板和沙堡平板上，恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)，沒有檢測到細菌和真菌，符合濕巾中微生物總數(shù)檢查的判定標準。

2.2 中和劑的考察試驗

以金黃色葡萄球菌為試驗菌，按載體定量殺菌試驗程序?qū)χ泻蛣┻M行考察。經(jīng)檢測，用質(zhì)量濃度為0.5 g/L的硫代硫酸鈉可有效中和清清爽牌濕巾的殺菌作用，中和劑及中和產(chǎn)物對試驗菌及培養(yǎng)基無影響(見表1)。

表1 濕巾的中和劑試驗Table 1 The result of neutralizer test for wet tissue

2.3 載體定量殺菌試驗

取100 μL菌懸液分別均勻滴加在被試樣片和對照樣片上，作用2 min，對金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌和白假絲酵母菌的殺菌率分別為99.98%、99.76%和99.20%;作用5 min，對3種試驗菌的殺菌率分別為100%、99.97%和99.99%，殺菌效果顯著(見表2)。

表2 濕巾的載體定量殺菌試驗Table 2 The result of carrier quantitative germicidal test for wet tissue

2.4 模擬現(xiàn)場試驗

將一只手用清清爽牌濕巾擦拭數(shù)次，待1 min后用滅過菌的棉拭涂抹采樣，作活菌培養(yǎng)計數(shù)，與未經(jīng)濕巾擦拭的手的活菌計數(shù)結(jié)果進行對照。試驗結(jié)果表明:清清爽牌濕巾對手的殺菌率達到99.99%，起到了明顯地殺菌消毒效果。

2.5 濕巾穩(wěn)定性試驗

表3 濕巾放置90 d后載體定量殺菌試驗Table 3 The result of carrier quantitative germicidal test for wet tissue after 90 days

將清清爽牌濕巾原包裝置于37℃恒溫培養(yǎng)箱中存放90 d，經(jīng)觀察無霉斑，無氣味、顏色等異常變化。取100 μL菌懸液分別均勻滴加在被試樣片和對照樣片上，作用2 min，對金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌和白假絲酵母菌的殺菌率分別為99.86%、99.72%和99.13%;作用5 min，對3種試驗菌的殺菌率分別為100%、99.91%和99.40%(見表3)，符合GB 15979-2002的規(guī)定。

3 結(jié)論

采用載體定量殺菌試驗，對清清爽牌濕巾的殺菌消毒效果進行了實驗室研究。研究結(jié)果表明:清清爽牌濕巾對金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌和白假絲酵母菌作用2 min，殺菌率分別達到99.98%、99.76%和99.20%;作用5 min，殺菌率分別為100%、99.97%和99.99%。之后進行了模擬現(xiàn)場試驗，清清爽牌濕巾對手自然菌殺菌率達到99.99%，具有殺菌速度快、無刺激性氣味、手感舒適等特點，適合用于家居生活消毒。將清清爽牌濕巾原包裝置于37℃恒溫培養(yǎng)箱中存放90 d，從實驗結(jié)果看，對金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌和白假絲酵母菌的殺菌效果雖然符合GB 15979-2002的規(guī)定，但殺菌率還是略有下降，為了保證濕巾最佳殺菌效果，建議產(chǎn)品在有效期內(nèi)低溫保存。

［1］ 梁明生.小心一次性濕巾“病從口入”［J］.上海標準化，2008，12:22-24.

［2］ 劉娜，徐亞民，魏天柱.濕巾產(chǎn)品的應(yīng)用及質(zhì)量概況［J］.中國化纖，2008，2:68-69.

［3］ 丘靜，張靜濤.復(fù)方氯己定消毒濕巾殺菌效果實驗室觀察［J］.中國消毒學(xué)雜志，2004，21(2):135-137.

［4］ 丘靜，張靜濤，蘇麗.多功能消毒濕巾殺菌效果試驗觀察［J］.中國公共衛(wèi)生，2003，19(11):1345-1346.