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    諾氟沙星膠囊微生物限度檢查方法研究

    2020-09-02 17:16周永海
    人人健康 2020年5期
    關(guān)鍵詞:中和劑

    周永海

    【關(guān)鍵詞】 薄膜過濾;限度檢查;諾氟沙星膠囊;陽性對照;中和劑

    諾氟沙星,又稱為氟哌酸、淋克小星、淋沙星等。諾氟沙星由于其廣譜抗菌性質(zhì),對需氧類細菌具有很好的抗菌性,但同時其弊端也很明顯諾氟沙星它對真菌無抑菌作用[1]。因此,在臨床上諾佛沙星多用來治療因敏感菌所導致的疾病,比如腸炎、前列腺炎等的感染。我院開展此項研究,報道如下:

    1儀器與材料

    1.1儀器? ?培養(yǎng)箱;生物類安全柜;集菌儀;電子天平;電熱恒溫培養(yǎng)箱-隔水式 。

    1.2樣品與試劑? ?本次實驗采用的樣品為諾氟沙星膠囊;干粉培養(yǎng)基: 氯化鈉蛋白胨緩沖液pH值7.0、蛋白胨水溶液(濃度0.1%)、胰酪大豆胨培養(yǎng)基兩種分別為液體及瓊脂、沙氏葡萄糖培養(yǎng)基分別為液體及瓊脂、麥康凱培養(yǎng)基分別為液體及瓊脂;分析純:氯化鈉、硫酸鎂[2]

    2試驗方法

    首先將枯草芽孢桿菌、金黃色葡萄、銅綠假單胞菌、大腸埃希菌置于30℃ ~35℃的胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基中,將其培養(yǎng) 18~24 h后靜置,以備試驗時使用。在進行試驗時,先將上述培養(yǎng)物各取 1 mL,再使用 0.9% 無菌氯化鈉溶液進行稀釋,稀釋保持在10倍稀釋液至 10-6 或10-3的菌懸液。再將白色念珠菌在 20℃ ~25℃沙氏葡萄糖液體培養(yǎng)基中培養(yǎng) 2~3 d ,實驗開始取該培養(yǎng)基培養(yǎng)物1mL,同樣使用0.9%的無菌氯化鈉溶液保持10倍稀釋至 10-4 ~10-2的菌懸液。然后在20℃ ~25℃的沙氏葡萄糖瓊脂斜面上培養(yǎng)黑曲霉,5-7小時后取出該培養(yǎng)物。隨之加入5ml的無菌氯化鈉溶液,將黑曲霉進行清洗。最后將清洗的孢子懸液取出1 ml,并用濃度為0.05 %的無菌氯化鈉溶液進行10倍稀釋,直至稀釋到10-4 ~10-2的孢子懸液[3]。

    2.1微生物計數(shù)方法適用性試驗

    2.1.1 需氧菌總數(shù)計數(shù)

    試驗組:取1ml 1∶10的供試液,使用薄膜過濾法,使用800 ml無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液(pH7.0)進行沖洗,分8次沖洗,每次取100mL進行沖洗;沖洗之后濾干,隨之將濾膜菌進行轉(zhuǎn)移,并將濾膜菌正面朝上貼在胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基平板上。上述操作后,接著將其置于培養(yǎng)箱中,進行約為72小時的培養(yǎng),并每天觀察實驗變化結(jié)果[4]。

    其中實驗需氧菌總數(shù)計數(shù)適用性試驗結(jié)果見表1。

    2.2.1霉菌和酵母菌總數(shù)計數(shù)

    試驗組: 取9.9mL 的1:10供試液,在供試液中加入0.1 ml上述配制的試驗菌液,并混合均勻。取混合均勻的供試液1ml注入平皿,隨之將其倒入沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基中。然后將經(jīng)過培養(yǎng)基培養(yǎng)的供試液置于20℃ ~25℃的培養(yǎng)箱中,培養(yǎng)約24到120 小時之間,并做好每日實驗結(jié)果的記錄。

    供試品對照組:將試驗組的操作進行重復(fù)操作,隨之進行培養(yǎng)計數(shù)。

    菌液對照組: 將供試品對照組和試驗組中配備的菌液取適量,隨后用稀釋劑進行稀釋,并進行培養(yǎng)計數(shù)。霉菌和酵母菌總數(shù)計數(shù)適用性試驗結(jié)果如下:菌液對照組中的白色念珠菌有80菌、試驗組有白色念珠菌75菌、供試品對照組的白色念珠菌有0菌,回收比值為1.0;菌液對照組中的黑曲霉有79菌、試驗組中有黑曲霉69菌、供試品對照組有黑曲霉0菌,回收比值為:1.1。

    3.討論

    根據(jù)臨床試驗顯示,諾氟沙星膠囊抑菌性較強,若單獨采取薄膜過濾法,會導致最終試驗結(jié)果的回收效果不理想。為了研究微生物限度檢查方法的成效,我院對諾氟沙星膠囊進行生物限度檢查進行研究。

    本次研究結(jié)果顯示:所實驗的各試驗菌其回收比值需要符合藥典規(guī)定,而大腸埃希菌則需要在控制菌檢查的陽性對照試驗檢中被檢出。諾氟沙星膠囊的抗菌活性則由中和劑硫酸鎂來去除。各項試驗數(shù)據(jù)表明,試驗方法可用于諾氟沙星膠囊的微生物限度檢查。

    因此,對諾氟沙星膠囊進行微生物限度檢查,該方法價值較高,可大力推廣。

    【參考文獻】

    [1]曹寒梅,蔡虎,楊曉莉,常春,傅強.氧氟沙星膠囊微生物限度檢查方法的建立[J].中國藥業(yè),2019,28(16):35-38.

    [2]衛(wèi)延明,閔朕,陳子龍,杜思迪,秦亞紅.倍芪腹瀉貼微生物限度檢查方法的適用性試驗[J].安徽醫(yī)藥,2018,22(10):1877-1880.

    [3]楊小春,謝家軍,侯澤峰.鹽酸左氧氟沙星膠囊微生物限度檢查方法的建立[J].實用醫(yī)技雜志,2015,22(04):438-440.

    [4]孫偉,劉文杰,崔穎,牛振東,高春.β-環(huán)糊精在喹諾酮類抗生素藥品微生物限度檢查方法建立中的應(yīng)用[J].藥物分析雜志,2013,33(01):18-21+29.

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