氯諾昔康凝膠劑的研制

馬君一，劉煥美，顧一珠

(1.山東大學 威海分校 海洋學院 08級藥學，山東 威海 264209;2.山東大學藥學院，山東 濟南 250012;3.山東大學 齊魯醫(yī)院 藥學部，山東 濟南 250012)

氯諾昔康凝膠劑的研制

馬君一1，劉煥美2，顧一珠3

(1.山東大學 威海分校 海洋學院 08級藥學，山東 威海 264209;2.山東大學藥學院，山東 濟南 250012;3.山東大學 齊魯醫(yī)院 藥學部，山東 濟南 250012)

目的 制備氯諾昔康凝膠劑，考察其體外經皮滲透性。方法 采用紫外分光光度法測定氯諾昔康的表觀溶解度和油水分配系數，采用Franz擴散池考察載藥凝膠劑的體外經皮滲透性，以6 h累積滲透量為指標，采用正交試驗設計篩選最佳處方，探討了卡波姆濃度、氮酮及丙二醇用量對氯諾昔康凝膠劑經皮滲透的影響，并考察其局部刺激性。結果 氯諾昔康在水、pH 6.8和pH 7.4磷酸鹽緩沖液中的表觀溶解度分別為8.65，86.0和324.0 μg/mL，油水分配系數為1.52;正交試驗優(yōu)化的最佳處方為:含0.75%卡波姆、30%丙二醇、4%月桂氮卓酮。制備的凝膠劑外觀細膩，黏度適宜，pH值為6.8～7.0，體外經皮滲透實驗結果符合零級動力學方程，家兔各涂藥部位無水皰、疹塊、紅腫等現象。結論 氯諾昔康凝膠劑制備工藝簡單，質量可控。

氯諾昔康;凝膠劑;經皮擴散;表觀溶解度;油水分配系數

氯諾昔康(Lornoxicam，LNXC)是由Nycomed公司開發(fā)的一種新型昔康類非甾體類抗炎藥，于1997年10月首次在丹麥上市(商品名Xefo)［1］。LNXC治療骨關節(jié)炎(OA)具有雙重作用。既能達到鎮(zhèn)痛和抗炎的目的又能減少關節(jié)炎的破壞，防止骨變性，修復受損關節(jié)。目前市售LNXC有片劑和注射劑兩種劑型，常存在胃腸道反應［2］。本文研制了經皮給藥的LNXC凝膠劑，以提高局部藥物濃度，避免胃腸道毒副作用。

1 材料

UV-2102PCS型紫外—可見分光光度計，上海尤尼柯儀器有限公司;NDJ-8S數顯黏度計，上海天平儀器廠。

LNXC，常州市湖濱醫(yī)藥原料有限公司;卡波姆-940，上海人民制藥廠;其它試劑均為市售分析純。

昆明種雄性小白鼠、家兔，山東大學動物實驗中心，合格證號:SCXK(魯)20090001。

2 方法

2.1 LNXC表觀溶解度的測定

分別量取水、pH 6.8和 pH 7.4的 PBS各200 mL置250 mL磨口錐形瓶中，加過量LNXC，加塞密封，置于磁力攪拌器上，水浴溫度(37±0.5)℃，轉速300 r/min，分別于 2，6，8，12，24，48 h 取樣過濾，精密吸取續(xù)濾液，分別用相應的介質定量稀釋數倍后，在376 nm波長處測定A值，代入標準曲線方程［3］計算表觀溶解度。

2.2 LNXC油水分配系數的測定

量取正辛醇50 mL及pH 7.4的PBS 100 mL，于帶塞錐形瓶中，置于37℃恒溫振蕩器中震蕩24 h，于分液漏斗中靜置過夜，分層，分離已飽和的水相和油相。精密稱取LNXC適量，加至水相(已用油相飽和)中，配成一定濃度的藥物溶液。分別精密量取上述藥物的pH 7.4的 PBS 4 mL與正辛醇(已用水相飽和)4 mL于10 mL離心管中，置37℃恒溫振蕩器中振蕩24 h，取出，離心，取下層水相，于376 nm波長處測定A值，計算pH 7.4 PBS中的藥物質量濃度，推算出正辛醇中的藥物質量濃度，計算油水分配系數。

2.3 LNXC凝膠劑的制備

將處方量的卡波姆灑于甘油表面，使其充分浸潤，然后加入適量水，使其充分溶脹，加入適量三乙醇胺調pH至7.2，混勻得空白凝膠。精密稱取處方量的LNXC于研缽研磨均勻后，將其加入空白凝膠研磨均勻，再加入滲透促進劑氮酮與丙二醇與羥苯乙酯，繼續(xù)研磨，補加水至處方量，混勻即得LNXC凝膠劑。

2.4 正交試驗設計優(yōu)化處方組成

［4-5］，結合預試驗結果，在單因素考察基礎上，以6 h體外累積經皮滲透量為評價指標，選擇卡波姆用量、氮酮濃度、丙二醇濃度3個因素，每個因素選擇3個水平，按L9(3)4正交試驗設計，優(yōu)化最佳處方組成。

2.5 LNXC凝膠劑體外經皮滲透實驗

2.5.1 離體小鼠皮膚的制備 取昆明種小白鼠處死，將腹部毛去除干凈，剝離腹部皮膚，去除皮下和脂肪組織，用pH 7.4 PBS浸泡沖洗干凈后，冰箱冷藏，備用。實驗前仔細檢查鼠皮的完整性，不得有任何損傷。

2.5.2 體外經皮滲透實驗 將皮膚置于擴散池口，角質層面向上，真皮層向下，接受池中加滿pH 7.4 PBS(6.5 mL)，樣品室加入凝膠劑(相當于含LNXC 1 mg)，與皮膚緊密接觸，不留空腔，于(37±1)℃，400 r/min恒溫恒速攪拌，在規(guī)定時間點將吸收液全部取出(同時補充等量pH 7.4 PBS)。于376 nm波長處測定A值［3］，計算累積滲透量。

2.6刺激性試驗

取2.5～3.0 kg的健康家兔6只，在每只家兔脊柱兩側對稱處剃毛，面積約為3 cm×3 cm。24 h后將空白凝膠和含藥凝膠劑各1 g，分別均勻涂在家兔背部剃毛處，24 h后觀察各涂藥部位有無水皰、疹塊、紅腫等現象。

3 結果

3.1 表觀溶解度和油水分配系數測定結果

pH對LNXC的表觀溶解度的影響結果見圖1。在 pH 7.4 PBS，pH 6.8 PBS和水中的溶解度分別為(324.0 ±32.5)，(86.1 ±8.3)，(8.65 ±0.56) μg/mL。根據此表觀溶解度，我們選取pH 7.4 PBS作為體外釋放與滲透試驗的溶媒，保證漏槽條件。藥物的油/水分配系數是影響藥物經皮吸收的主要因素之一。一般認為log P接近1～4間有較好的滲透系數。測得LNXC的油水分配系數為(1.52±0.49)，滲透系數較好，適合于透皮吸收，具有制備成良好透皮制劑的潛質。

圖1 LNXC 在 pH 7.4 PBS(-▲-)、pH 6.8 PBS(-◆-)和水(-■-)中的表觀溶解度(n=3)Fig.1 The plot of apparent solubility pH 7.4 PBS(-▲-)，pH 6.8 PBS(-◆-)and water(-■-)(n=3)

3.2 正交試驗結果

根據L9(3)4正交試驗表設計實驗，以6 h累積滲透百分率為評價指標，篩選最佳處方組成，正交試驗的結果見表1。

表1 正交設計試驗的方案和結果Tab.1 Scheme and results of orthogonal design

極差R反映各因素對指標影響的程度，極差R值越大，影響程度越大。本實驗三個因素R值排列為A＞C＞B;由綜合平均值的大小選取各因素的最佳水平組合:綜合平均值越大，水平越優(yōu)，各因素的最優(yōu)水平組合在一起就是最佳實驗組合。本實驗三個因素分析結果為:A:3＞2＞1;B:2＞3＞1;C:1＞2＞3，0.5%卡波姆濃度太低做成制劑黏度太小，不宜粘附于皮膚上，故選擇0.75%卡波姆。但是B因素中的2和3水平相差不大(P＞0.05)，與單因素考察中的結果一致，所以我們同時制備了兩個處方:即A3B3C2和A3B2C2，并同時考察這兩個處方的體外滲透性，實驗證明丙二醇濃度30%較20%的釋放要好，所以我們選取的最佳組合為A3B3C2，即處方組成:氮酮4%，丙二醇30%，卡波姆0.75%。

3.3 LNXC凝膠劑的體外滲透試驗結果

按優(yōu)化處方制備3批樣品，測定LNXC凝膠劑24 h的累積經皮滲透量，以累積釋放百分率(Q)對時間(t)作圖，得LNXC的體外經皮滲透曲線(見圖2)，對釋放曲線進行數學模型擬合，結果見表2。

圖2 LNXC凝膠體外滲透曲線(以小鼠皮為屏障)(n=3)Fig.2 Release kinetic profile of LNXCgel with optimum formulation across mouse skin(n=3)

表2 數學模型擬合結果Tab.2 Results of mathematical model fitting

由LNXK凝膠體外經皮滲透(以小鼠皮為屏障)試驗數據分析可知，0～6 h內符合零級動力學(r=0.999 0)，6 h以后經皮滲透釋放趨緩，滲透到60 h，滲透曲線符合 Weibull方程(r=0.994 8)，與一般脂溶性藥物的體外釋放規(guī)律基本一致。LNXK的油水分配系數1.52，水溶性不好，但在pH 7.4的PBS中溶解度較大，說明有在皮膚有較好的吸收，且能滿足凝膠劑制備的要求。

刺激性試驗結果表明，家兔涂藥部位均無水皰、疹塊、紅腫等現象出現，與空白基質比較無差異。

4 討論

LNXK在376 nm波長處有最大吸收峰，凝膠劑基質在該波長處幾乎無吸收，因此，本文處方和工藝研究過程中選擇紫外分光光度法測定凝膠劑中LNXK 的含量［3］，該法簡便、快速，但靈敏度、專屬性較HPLC法差，在制定凝膠劑質量標準時還應該選擇靈敏度較高的方法。

卡波姆有很強的吸濕性，在水中溶脹，但成團塊者難以溶脹，未溶脹的經堿中和后會形成白色半透明狀物，影響成品質量。處方中加入甘油既可促進卡波姆浸潤溶脹，又能起到保濕的作用。此外先用甘油浸潤研磨卡波姆可防止表面凝膠化，再加適量水讓卡波姆溶脹，可使成品細膩［6］。在制備凝膠的過程中，盡量避免氣泡的產生，隨著卡波姆濃度的增加，較易產生氣泡，且不易消除，卡波姆濃度低的凝膠劑不易產生氣泡，經攪拌后也易消除，但黏度過小，流動性變大，黏性降低，不宜涂抹在皮膚上。綜合考慮各類因素選取了0.75%濃度的卡波姆用量，氣泡較易消除，黏度適中，方便使用。

初步穩(wěn)定性試驗結果表明，本品耐熱、耐寒，3個月加速試驗，外觀、含量等均無明顯變化，初步臨床試驗也取得較好的療效［3］。

參考文獻:

［1］黃 莉，李 娟，王 業(yè)，等.替諾昔康凝膠劑的制備及其經皮吸收研究［J］.中國藥學雜志，2005，40(23):1807-1810.

［2］Tang H B，Atsuko I，Kyokoo，et al.Zaltoprofen inhibits Bradykinininduced responses by blocking the activation of second messenger signaling cascades in rat dorsal root ganglion cells［J］.Neuropharm，2005，48:1035-1042.

［3］馬君一，劉煥美，顧一珠.氯諾昔康凝膠劑的制備與臨床應用［J］.齊魯藥事，2011，30(3):152-154.

［4］陸 彬.藥劑學［M］.北京:中國醫(yī)藥科技出版社，2003:280.

［5］郭 宏，聶淑芳，楊星鋼，等.奧沙普秦凝膠劑處方篩選及穩(wěn)定性研究［J］.中國藥學雜志，2006，41(10):759-762.

［6］張又才，劉大發(fā)，曾慶岳.凝膠基質中卡波姆溶脹方法的改進［J］.中國藥師，2003，6(1):58.

Development of Lornoxicam gel

MA Jun-yi1，LIU Huan-mei2，GU Yi-zhu3
(1.Marine School，Shandong University at Weihai，Weihai 264209，China;2.Pharmaceutical School，Shandong University，Jinan 250012，China;3.Department of Pharmacy，Qilu Hospital，Shandong University，Jinan 250012，China)

Purpose To prepare Lornoxicam gel and to study its release and permeation ability in vitro.Methods The apparent solubility and oil-water partition coefficient of drugs were determined by UV method.The permeation in vitro was carried out by a two-compartment diffusion cells with mouse skin and cellophane as barriers.By taking its 6-hour accumulative penetration amount as index the factors such as the concentration of carbomer，azone，propylene glycol were investigated by an orthogonal design，and thus the best formula could be obtained.The local irritative response of Lornoxicam gel were also measured.Results The apparent solubility of Lornoxicam was 8.65 μg/mL in distilled water and 86.0，324.0 μg/mL in phosphate buffered solution with pH values of 6.8，7.4 and its oil-water partition coefficient was 1.52.The optimal formulation of Lornoxicam gel contained 0.75%carbomer，30%propylene glycol and 4%azone.The gel had suitable viscosity and pH was 6.8-7.0.The process of percutaneous permeation of Lornoxicam gel in vitro conformed to zero order equation.No irritation reactions like blister，rash，redness and swelling occurred in the skin after applying Lornoxicam gel.Conclusion Lornoxicam transcutaneous gel can be prepared simply.Its quality is controllable.

Lornoxicam;gel;transcutaneous;dissolubility;oil-water partition coefficient

R944

A

1005-1678(2011)04-0297-04

2010-12-31

山東省科技廳科技攻關項目(2007GG30002023)

馬君一，男，本科生，E-mail:jazzy941@163.com;顧一珠，女，通信作者，碩士，副主任藥師，主要從事醫(yī)院制劑技術研究，E-mail:yizhu.521@163.com。