桃仁和山桃仁中的氨基酸分析

　　摘要：目的：通過對桃仁蛋白質氨基酸分析，明確氨基酸的種類、質量分數(shù)。方法　采用835～50型氨基酸自動分析儀測定，離子交換柱：柱長2.5×150mm；樹脂2619#；柱溫53℃；緩沖液：流速0.25mL·min；柱壓80～120kg／cm²；茚三酮：流速0.3mL·min；拄壓20～35kg／cm²。結果：所測定的《中國藥典》2005年版中藥桃仁項下收載的桃Prunuspersica(L)Batsch，和山桃Prunusdaridiana(CarL)Franch，2個品種的樣品中均含17種氨基酸，質量分數(shù)和氨基酸總量均有差異。結論：本方法重現(xiàn)性高，操作簡單；山桃仁和桃仁的氨基酸種類相同，質量分數(shù)和氨基酸總量比較，山桃仁均大于桃仁。
　　關鍵詞：桃仁；山桃仁；氨基酸；蛋白質
　　中圖分類號：R284.1
　　文獻標識碼：A
　　文章編號：1007－2349(2010)06－0063－02
　　
　　桃仁來源于薔薇科(Rosaceae)植物桃Prunuspersica(L)Batsch，或山桃Prunusdaridiana(Carr，)Franch，的干燥成熟種子。性味苦、甘，平，具有活血化瘀、潤腸通便的功效。用于經閉，痛經，癥瘕痞塊，跌撲損傷，腸燥便秘。在血府逐瘀湯(《醫(yī)林改錯》)、生化湯(《傅青主女科》)、桂枝茯苓丸(《金匱要略》)、桃核承氣湯(《傷寒論》)等醫(yī)家名方中均重用桃仁，現(xiàn)代研究亦表明桃仁對心腦血管疾病療效顯著，近年來受到廣泛關注。
　　桃仁藥材中主要含油脂和蛋白質。氨基酸的種類和質量分數(shù)，決定著蛋白質品質的高低，而且植物蛋白具有一定的生理活性。為了進一步研究桃仁的化學成分，進行了桃仁蛋白質氨基酸分析，明確氨基酸的種類、質量分數(shù)。為桃仁的進一步開發(fā)研究提供思路和依據(jù)。
　　
　　1　實驗材料
　　
　　1，1　供試材料　桃仁，2007年8月自采于陜西南泥灣和陜西咸陽，經萬德光教授鑒定，分別為薔薇科(Rosaceae)植物桃Prunuspersica(L)Batsch、山桃Prunusdavidiana(Carr，)Franch，的干燥成熟種子。
　　1，2　試劑　酸解劑：鹽酸溶液，C(HCI)=6.0mol／L，優(yōu)級純鹽酸與去離子水等體積混合；稀釋上機用鹽酸緩沖液，C(HCI)=0.02mol／L；不同pH值和離子強度的洗脫用緩沖溶液，按儀器說明書配制。茚三酮溶液：按儀器說明書配制；NaOH溶液：C(NaOH)=6.0mol／L。17種氨基酸標準品：除脯氨酸為200μmol／L外，其余均為100μmol／L。
　　1，3　儀器及設備　實驗室用樣品粉碎機；分析天平；酒精噴燈；恒溫箱；儀器和設備：日立835－50型氨基酸自動分析儀。真空泵。
　　
　　
　　2　實驗方法
　　
　　2，1　儀器測試條件　離子交換柱：柱長2.5×150mm；樹脂2619#；柱溫53℃；緩沖液：流速0.25mL·min；柱壓80～120kg／cm²；茚三酮：流速0.3mL·min；柱壓20～35kg／cm²。
　　2，2　樣品的制備　稱樣：準確稱取一定量的樣品，精確到0.0001g，稱樣量在10～20mg之內，稱好的樣品放于水解管內。水解：在水解管內加6.0mol·L鹽酸15.00mL，再加入巰基乙1.00mL(起保護作用)，蓋上膠塞，用真空泵抽至真空，接進Opsi，將此水解管封口并放在110±1℃的恒溫干燥箱內保溫24h后，取出冷卻。打開水解管，將水解液過濾并沖洗定容50.00mL容量瓶。吸取濾液1.00mL于25mL燒杯內，在水浴上蒸干，殘留物用1～2mL水溶解再蒸干，反復蒸干3次，最后殘留物用0.02mol·L的鹽酸1.00mL溶解上機測定。
　　2，3　測定　用相應的混合氨基酸標準工作液按儀器說明書，調整儀器操作參數(shù)和洗脫用緩沖液的pH值，使各氨基酸分辨率≥85％，自動進樣20μL制備好的試樣水解液分析測定(氨基酸自動分析儀測定流速：緩沖溶液為0.40mL／min，茚三酮溶液0.35mL／min)。
　　2，4　結果計算　以峰面積測定結果，用外標法計算各氨基酸含量。
　　2，5　測定標準　氨基酸測定標準：GB／T5009，124－2003。
　　
　　3　結果與討論
　　
　　桃仁與山桃仁中均富含17種氨基酸。其中尤以谷氨酸質量分數(shù)最高，天門冬氨酸、精氨酸和亮氨酸質量分數(shù)也很高；桃仁中各種氨基酸的總質量分數(shù)達到23.77％，其中必需氨基酸質量分數(shù)為6.76％，山桃仁中氨基酸的總質量分數(shù)為26.85％，高于桃仁中氨基酸的總質量分數(shù)；在必需氨基酸含量上，山桃仁中的必需氨基酸質量分數(shù)為7.87％，高于桃仁中的必需氨基酸。
　　對桃仁不同品種中氨基酸質量分數(shù)的測定表明：山桃仁中氨基酸的總質量分數(shù)及必需氨基酸質量分數(shù)均很高，氨基酸的種類和質量分數(shù)，決定著蛋白質品質的高低，必需氨基酸更是評價食品營養(yǎng)水平最根本的指標；所測定的桃仁中的必需氨基酸質量分數(shù)較高，因此桃仁中蛋白質的質量分數(shù)也較高，所以桃仁的營養(yǎng)價值相對也較好。同時，桃仁中的蛋白質在桃仁中的含量也占相當大一部分，桃仁中的氨基酸研究分析為以后進一步研究桃仁中的蛋白質提供科學的依